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细菌群体感应抑制因子的筛选与功能的初步研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第一章 前言第12-28页
    1.1 细菌耐药性的现状及新型抗生素研发的必要性和紧迫性第12-16页
        1.1.1 微生物感染与抗生素的应用第12-13页
        1.1.2 细菌耐药性的产生及耐药机制第13-14页
        1.1.3 细菌耐药性控制策略一开发新型抗生素第14-16页
    1.2 细菌的群体感应体系及应用第16-21页
        1.2.1 群体感应的发现与提出第16-17页
        1.2.2 群体感应的种类与特征第17-20页
        1.2.3 群体感应体系的应用第20-21页
    1.3 细菌群体感应抑制的研究及其应用第21-25页
        1.3.1 群体感应抑制及意义第21页
        1.3.2 群体感应抑制的途径第21-23页
        1.3.3 群体感应抑制的研究现状及进展第23-25页
        1.3.4 群体感应抑制因子筛选方法的多样性第25页
    1.4 本实验研究的内容第25-27页
        1.4.1 基于中草药小分子库的群体感应抑制因子虚拟筛选第25-26页
        1.4.2 基于食用菌的群体感应抑制因子的筛选第26页
        1.4.3 群体感应抑制因子对细菌浮游迁移现象的抑制第26页
        1.4.4 群体感应RhlR受体蛋白的诱导表达与稳定性研究第26页
        1.4.5 群体感应抑制因子的分离纯化和活性分析第26-27页
    1.5 本实验研究的目的和意义第27-28页
第二章 基于中草药小分子库的群体感应抑制因子虚拟筛选第28-37页
    2.1 引言第28页
    2.2 材料与方法第28-30页
        2.2.1 实验材料第28-29页
        2.2.2 方法第29-30页
    2.3 结果与分析第30-35页
        2.3.1 RhlR蛋白的空间结构建模第30-31页
        2.3.2 RhlR蛋白空间结构的描述第31页
        2.3.3 抑制剂的虚拟筛选第31-34页
        2.3.4 候选化合物的活性测定第34-35页
    2.4 结论与分析第35-37页
第三章 基于食用菌的群体感应抑制因子的筛选与抑制作用研究第37-47页
    3.1 引言第37-39页
        3.1.1 食用菌中群体感应抑制因子的研究第37页
        3.1.2 细菌的群集迁移运动与致病性第37-39页
    3.2 材料与方法第39-41页
        3.2.1 实验菌株及特征第39页
        3.2.2 试剂与培养基第39页
        3.2.3 方法与设备第39-41页
    3.3 样品处理与提取第41页
    3.4 群体感应抑制因子的检测与抑制试验第41-42页
        3.4.1 报告菌平板法检测抑制实验第41页
        3.4.2 粗提物抑制色素产生的试管实验第41-42页
    3.5第42-45页
        3.5.2 试管抑制及色素测定试验第42-44页
        3.5.3 食用菌粗提物对致病菌浮游迁移的抑制实验第44-45页
    3.6 讨论第45-47页
第四章 群体感应受体RHLR蛋白的诱导表达与稳定性研究第47-56页
    4.1 引言第47页
    4.2 材料与方法第47-52页
        4.2.1 实验菌株及质粒第47-48页
        4.2.2 试剂与溶液第48页
        4.2.3 RhlR基因的克隆与表达第48-51页
        4.2.4 RhlR蛋白的诱导表达与QSI的作用第51-52页
    4.3 实验结果与分析第52-55页
        4.3.1 RhlR基因的克隆第52-53页
        4.3.2 RhlR基因的表达第53-54页
        4.3.3 RhlR蛋白的诱导表达与稳定性第54-55页
    4.4 结论与讨论第55-56页
第五章 群体感应抑制因子的分离纯化和活性分析第56-62页
    5.1 引言第56页
    5.2 材料与方法第56-58页
        5.2.1 材料、试剂与仪器第56-57页
        5.2.2 粗提物浸膏的溶解性实验第57页
        5.2.3 TLC分离条件的摸索第57页
        5.2.4 加压柱层析分离与活性追踪第57页
        5.2.5 薄层层析分析样品第57-58页
        5.2.6 高效液相色谱检测第58页
    5.3 结果与分析第58-61页
        5.3.1 溶解性实验第58页
        5.3.2 TLC分离条件的摸索第58页
        5.3.3 加压柱层析分离与活性追踪第58-59页
        5.3.4 薄层层析分析样品第59-60页
        5.3.5 高效液相色谱检测第60-61页
    5.4 讨论第61-62页
第六章 总结与展望第62-64页
参考文献第64-72页
致谢第72页

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