摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第12-28页 |
1.1 细菌耐药性的现状及新型抗生素研发的必要性和紧迫性 | 第12-16页 |
1.1.1 微生物感染与抗生素的应用 | 第12-13页 |
1.1.2 细菌耐药性的产生及耐药机制 | 第13-14页 |
1.1.3 细菌耐药性控制策略一开发新型抗生素 | 第14-16页 |
1.2 细菌的群体感应体系及应用 | 第16-21页 |
1.2.1 群体感应的发现与提出 | 第16-17页 |
1.2.2 群体感应的种类与特征 | 第17-20页 |
1.2.3 群体感应体系的应用 | 第20-21页 |
1.3 细菌群体感应抑制的研究及其应用 | 第21-25页 |
1.3.1 群体感应抑制及意义 | 第21页 |
1.3.2 群体感应抑制的途径 | 第21-23页 |
1.3.3 群体感应抑制的研究现状及进展 | 第23-25页 |
1.3.4 群体感应抑制因子筛选方法的多样性 | 第25页 |
1.4 本实验研究的内容 | 第25-27页 |
1.4.1 基于中草药小分子库的群体感应抑制因子虚拟筛选 | 第25-26页 |
1.4.2 基于食用菌的群体感应抑制因子的筛选 | 第26页 |
1.4.3 群体感应抑制因子对细菌浮游迁移现象的抑制 | 第26页 |
1.4.4 群体感应RhlR受体蛋白的诱导表达与稳定性研究 | 第26页 |
1.4.5 群体感应抑制因子的分离纯化和活性分析 | 第26-27页 |
1.5 本实验研究的目的和意义 | 第27-28页 |
第二章 基于中草药小分子库的群体感应抑制因子虚拟筛选 | 第28-37页 |
2.1 引言 | 第28页 |
2.2 材料与方法 | 第28-30页 |
2.2.1 实验材料 | 第28-29页 |
2.2.2 方法 | 第29-30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
2.3.1 RhlR蛋白的空间结构建模 | 第30-31页 |
2.3.2 RhlR蛋白空间结构的描述 | 第31页 |
2.3.3 抑制剂的虚拟筛选 | 第31-34页 |
2.3.4 候选化合物的活性测定 | 第34-35页 |
2.4 结论与分析 | 第35-37页 |
第三章 基于食用菌的群体感应抑制因子的筛选与抑制作用研究 | 第37-47页 |
3.1 引言 | 第37-39页 |
3.1.1 食用菌中群体感应抑制因子的研究 | 第37页 |
3.1.2 细菌的群集迁移运动与致病性 | 第37-39页 |
3.2 材料与方法 | 第39-41页 |
3.2.1 实验菌株及特征 | 第39页 |
3.2.2 试剂与培养基 | 第39页 |
3.2.3 方法与设备 | 第39-41页 |
3.3 样品处理与提取 | 第41页 |
3.4 群体感应抑制因子的检测与抑制试验 | 第41-42页 |
3.4.1 报告菌平板法检测抑制实验 | 第41页 |
3.4.2 粗提物抑制色素产生的试管实验 | 第41-42页 |
3.5 | 第42-45页 |
3.5.2 试管抑制及色素测定试验 | 第42-44页 |
3.5.3 食用菌粗提物对致病菌浮游迁移的抑制实验 | 第44-45页 |
3.6 讨论 | 第45-47页 |
第四章 群体感应受体RHLR蛋白的诱导表达与稳定性研究 | 第47-56页 |
4.1 引言 | 第47页 |
4.2 材料与方法 | 第47-52页 |
4.2.1 实验菌株及质粒 | 第47-48页 |
4.2.2 试剂与溶液 | 第48页 |
4.2.3 RhlR基因的克隆与表达 | 第48-51页 |
4.2.4 RhlR蛋白的诱导表达与QSI的作用 | 第51-52页 |
4.3 实验结果与分析 | 第52-55页 |
4.3.1 RhlR基因的克隆 | 第52-53页 |
4.3.2 RhlR基因的表达 | 第53-54页 |
4.3.3 RhlR蛋白的诱导表达与稳定性 | 第54-55页 |
4.4 结论与讨论 | 第55-56页 |
第五章 群体感应抑制因子的分离纯化和活性分析 | 第56-62页 |
5.1 引言 | 第56页 |
5.2 材料与方法 | 第56-58页 |
5.2.1 材料、试剂与仪器 | 第56-57页 |
5.2.2 粗提物浸膏的溶解性实验 | 第57页 |
5.2.3 TLC分离条件的摸索 | 第57页 |
5.2.4 加压柱层析分离与活性追踪 | 第57页 |
5.2.5 薄层层析分析样品 | 第57-58页 |
5.2.6 高效液相色谱检测 | 第58页 |
5.3 结果与分析 | 第58-61页 |
5.3.1 溶解性实验 | 第58页 |
5.3.2 TLC分离条件的摸索 | 第58页 |
5.3.3 加压柱层析分离与活性追踪 | 第58-59页 |
5.3.4 薄层层析分析样品 | 第59-60页 |
5.3.5 高效液相色谱检测 | 第60-61页 |
5.4 讨论 | 第61-62页 |
第六章 总结与展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
致谢 | 第72页 |