| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| ·禽传染性支气管炎抗体检测方法的研究进展 | 第9-10页 |
| ·禽传染性支气管炎ELISA方法的研究进展 | 第10-11页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒表位抗原研究进展 | 第11-13页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒原核表达研究进展 | 第13-15页 |
| ·本研究前期工作基础 | 第15页 |
| ·存在的主要问题 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的意义及创新点 | 第16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| 2 试验材料 | 第17-19页 |
| ·病毒、血清、抗体 | 第17页 |
| ·质粒、宿主菌 | 第17页 |
| ·主要药品试剂 | 第17-19页 |
| ·试验仪器 | 第19页 |
| 3 试验方法 | 第19-31页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒多表位抗原的设计、构建与鉴定 | 第19-25页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒抗原表位预测与多表位抗原基因的设计 | 第19-20页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒多表位抗原基因的分析 | 第20页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒多表位抗原基因的构建与鉴定 | 第20-25页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒多表位抗原的原核表达 | 第25-30页 |
| ·IBV多表位抗原原核表达质粒PGEX-4T-1-D的构建 | 第25-26页 |
| ·IBV多表位抗原的原核表达 | 第26-27页 |
| ·IBV多表位抗原原核表达产物SDS-PAGE及Western-blots鉴定 | 第27-29页 |
| ·IBV多表位抗原原核表达条件的优化 | 第29页 |
| ·IBV多表位蛋白的大量诱导表达及纯化 | 第29-30页 |
| ·多表位抗原ELISA检测方法初探 | 第30-31页 |
| ·包被抗原和抗体最佳浓度的选择 | 第30-31页 |
| ·酶标二抗稀释倍数选择 | 第31页 |
| ·阴阳性临界值的确定 | 第31页 |
| ·敏感性试验 | 第31页 |
| ·特异性试验 | 第31页 |
| 4 试验结果 | 第31-47页 |
| ·IBV多表位抗原设计结果 | 第31-37页 |
| ·S1蛋白的结构预测与表位的设计 | 第31-33页 |
| ·M蛋白的结构预测与表位的设计 | 第33-34页 |
| ·N蛋白结构预测与表位的设计 | 第34-36页 |
| ·多表位抗原D结构分析 | 第36-37页 |
| ·IBV多表位抗原的构建与鉴定结果 | 第37-39页 |
| ·D1、D2、D3、D4区域基因片段的鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·多表位抗原D基因的构建结果 | 第38页 |
| ·多表位抗原D基因的鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒多表位抗原的原核表达结果 | 第39-44页 |
| ·多表位抗原原核表达质粒PGEX-4-1-D的鉴定 | 第39-40页 |
| ·多表位抗原可溶性表达分析结果 | 第40页 |
| ·多表位抗原表达产物的SDS-PAGE及Western-blots鉴定 | 第40-41页 |
| ·多表位抗原原核表达诱导时间、浓度、温度的筛选 | 第41-43页 |
| ·多表位抗原原核表达产物的纯化结果 | 第43-44页 |
| ·多表位抗原间接ELISA抗体检测方法的初探 | 第44-47页 |
| ·抗原最佳稀释浓度和血清最佳稀释度的确定 | 第44页 |
| ·酶标二抗稀释倍数的确定 | 第44-45页 |
| ·间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第45页 |
| ·敏感性试验 | 第45页 |
| ·特异性试验 | 第45-46页 |
| ·多表位抗原间接ELISA检测方法的操作步骤 | 第46-47页 |
| 5 讨论 | 第47-51页 |
| ·关于IBV结构蛋白表位预测与多表位抗原的设计 | 第47页 |
| ·关于IBV多表位抗原原核表达 | 第47-48页 |
| ·多表位抗原原核系统系统的选择 | 第47-48页 |
| ·多表位抗原原核表达条件的优化 | 第48页 |
| ·关于IBV多表位抗原ELISA方法 | 第48-50页 |
| ·关于IBV多表位抗原进一步研究的建议 | 第50-51页 |
| 6 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第58页 |
