| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| 英文摘要 | 第12-16页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 文献回顾 | 第20-28页 |
| 第一部分 人脐带间充质干细胞的分离培养、鉴定及诱导分化 | 第28-40页 |
| 1 材料 | 第28-30页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂和材料 | 第28-30页 |
| 2 方法 | 第30-33页 |
| 2.1 hUCMSCs 的原代培养 | 第30-31页 |
| 2.2 hUCMSCs 流式细胞仪检测 | 第31页 |
| 2.3 hUCMSCs 成神经细胞诱导实验 | 第31-32页 |
| 2.4 hUCMSCs 成脂肪细胞诱导实验 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-37页 |
| 3.1 hUCMSCs 原代培养及细胞形态学观察 | 第33-34页 |
| 3.2 hUCMSCs 细胞流式细胞仪检测 | 第34-35页 |
| 3.3 hUCMSCs 细胞成神经细胞诱导 | 第35-36页 |
| 3.4 hUCMSCs 细胞成脂肪细胞诱导 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 第二部分 人 NOTCH1受体SHRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定 | 第40-61页 |
| 1 材料 | 第40-43页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第40页 |
| 1.2 质粒、菌株及细胞株 | 第40-41页 |
| 1.3 其他材料 | 第41-43页 |
| 2 方法 | 第43-53页 |
| 2.1 shRNA 的设计及合成 | 第43-44页 |
| 2.2 重组质粒 pGenesil-1.1-Notch1-shRNA 的构建及鉴定 | 第44-46页 |
| 2.3 重组腺病毒表达质粒 pGsadeno- Notch1-shRNA 的构建及鉴定 | 第46-47页 |
| 2.4 重组腺病毒 rAd5-Notch1-shRNA 的制备 | 第47-48页 |
| 2.5 重组腺病毒 rAd5-Notch1-shRNA 的滴度测定 | 第48-49页 |
| 2.6 重组腺病毒 rAd5-Notch1-shRNA 沉默效应鉴定 | 第49-53页 |
| 3 结果 | 第53-57页 |
| 3.1 重组质粒 pGenesil-1.1-Notch1-shRNA 的构建及鉴定 | 第53-55页 |
| 3.2 重组腺病毒质粒 pGsadeno-Notch1-shRNA 的构建及鉴定 | 第55页 |
| 3.3 重组腺病毒 rAd5-Notch1-shRNA 的制备 | 第55页 |
| 3.4 腺病毒转染 hUCMSCs 细胞形态及 GFP 表达情况的观察 | 第55-56页 |
| 3.5 腺病毒转染 hUCMSCs 后，对 Notch1 转录水平的沉默效应 | 第56页 |
| 3.6 腺病毒转染 hUCMSCs 后，对 Notch1 蛋白表达水平的沉默效应 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-61页 |
| 第三部分 AD-HGF诱导HUCMSCS向血管动静脉内皮细胞分化的体外研究 | 第61-82页 |
| 1 材料 | 第61-63页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第61页 |
| 1.2 腺病毒及细胞株 | 第61-62页 |
| 1.3 引物合成、工具酶等 | 第62页 |
| 1.4 主其他要试剂及材料 | 第62页 |
| 1.5 常用试剂的配置方法 | 第62-63页 |
| 2 方法 | 第63-66页 |
| 2.1 腺病毒感染 hUCMSCs 最佳 MOI 的测定 | 第63页 |
| 2.2 腺病毒感染 hUCMSCs 细胞形态学观察 | 第63页 |
| 2.3 ELISA 检测腺病毒 Ad-HGF 感染 hUCMSCs 后 HGF 水平 | 第63-64页 |
| 2.4 MTT 检测腺病毒感染 hUCMSCs 生长的影响 | 第64页 |
| 2.5 流式细胞仪检测腺病毒感染 hUCMSCs 细胞生长周期的影响 | 第64页 |
| 2.6 细胞贴壁实验检测腺病毒感染 hUCMSCs 贴壁能力的影响 | 第64页 |
| 2.7 Transwell 小室检测腺病毒感染 hUCMSCs 迁移能力的影响 | 第64-65页 |
| 2.8 体外成血管实验检测腺病毒感染 hUCMSCs 血管生成能力的影响 | 第65页 |
| 2.9 实时定量荧光 PCR 检测血管分化相关基因的转录水平 | 第65-66页 |
| 2.10 Western Blot 检测血管分化相关蛋白的表达水平 | 第66页 |
| 2.11 统计学分析 | 第66页 |
| 3 结果 | 第66-76页 |
| 3.1 腺病毒感染 hUCMSCs 最佳 MOI 的测定 | 第66-67页 |
| 3.2 腺病毒感染 hUCMSCs 细胞形态学观察 | 第67-68页 |
| 3.3 ELISA 检测腺病毒 Ad-HGF 感染 hUCMSCs 后 HGF 水平 | 第68-69页 |
| 3.4 MTT 检测腺病毒感染 hUCMSCs 生长的影响 | 第69-70页 |
| 3.5 流式细胞仪检测腺病毒感染 hUCMSCs 细胞生长周期的影响 | 第70页 |
| 3.6 细胞贴壁实验检测腺病毒感染 hUCMSCs 贴壁能力的影响 | 第70-71页 |
| 3.7 Transwell 小室检测腺病毒感染 hUCMSCs 迁移能力的影响 | 第71-73页 |
| 3.8 体外成血管实验检测腺病毒感染 hUCMSCs 血管生成能力的影响 | 第73页 |
| 3.9 实时定量荧光 PCR 检测血管分化相关基因的转录水平 | 第73-75页 |
| 3.10 Western Blot 检测血管分化相关蛋白的表达水平 | 第75-76页 |
| 4 讨论 | 第76-82页 |
| 小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 个人简历和研究成果 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
