| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·杆状病毒概述 | 第10页 |
| ·杆状病毒分类 | 第10-11页 |
| ·杆状病毒侵染与复制过程 | 第11-12页 |
| ·杆状病毒基因组研究 | 第12-13页 |
| ·HearNPV 基因组研究概况 | 第12-13页 |
| ·杆状病毒的基因重组与生物防治 | 第13-17页 |
| ·HearNPV ORF33 研究现状 | 第17页 |
| ·杆状病毒几丁质酶 | 第17-18页 |
| 第二章 论文研究内容 | 第18-21页 |
| ·ORF33 基因研究 | 第18-19页 |
| ·原核表达与多抗制备 | 第18页 |
| ·缺失载体构建 | 第18页 |
| ·ORF33 从HearNPV Bacmid 中基因敲除 | 第18-19页 |
| ·几丁质酶对HearNPV 增效作用研究 | 第19页 |
| ·几丁质酶基因原核表达 | 第19页 |
| ·几丁质酶基因融合蛋白的诱导表达及粗蛋白液制备 | 第19页 |
| ·生物测定 | 第19页 |
| ·ORF33 基因缺失Bacmid 基因组构建及几丁质酶增效作用技术路线 | 第19-21页 |
| 第三章 HearNPV ORF33 基因的诱导表达及多克隆抗体的制备 | 第21-27页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·病毒、菌种和载体 | 第21页 |
| ·常规试剂及工具酶 | 第21页 |
| ·试剂的配制(后续与本章节相同) | 第21-22页 |
| ·方法（后续章节与本章节相同） | 第22-24页 |
| ·感受态细胞制备 | 第22页 |
| ·质粒DNA 转化 | 第22页 |
| ·诱导表达 | 第22页 |
| ·SDS-PAGE 步骤 | 第22-23页 |
| ·Western blot | 第23页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第23-24页 |
| ·多克隆抗体效价的测定 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-26页 |
| ·ORF33 基因的诱导表达及融合蛋白的回收 | 第24-25页 |
| ·ORF33 基因多克隆抗体的制备 | 第25-26页 |
| ·小结与讨论 | 第26-27页 |
| ·小结 | 第26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 第四章 HearNPV ORF33 基因缺失重组病毒Bacmid 构建 | 第27-35页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·病毒、菌种和载体 | 第27页 |
| ·细菌培养基 | 第27页 |
| ·碱法质粒抽提液 | 第27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-29页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·同源重组电转化感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·电转化感受态细胞的方法 | 第28页 |
| ·ORF33 基因的缺失 | 第28页 |
| ·ORF33 HearNPV 人工基因组的提取 | 第28页 |
| ·ORF33 基因缺失Bacmid 的PCR 和酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-33页 |
| ·33F 和33R 基因的克隆 | 第29-30页 |
| ·PKSE-33F 重组载体的鉴定 | 第30-31页 |
| ·缺失载体PKSE-33F、R 的鉴定 | 第31页 |
| ·同源重组线性片段的获得 | 第31-32页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第32-33页 |
| ·小结与讨论 | 第33-35页 |
| ·小结 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第五章 HearNPV 几丁质酶的可溶性表达与其对HearNPV 协同增效作用 | 第35-41页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·病毒、菌种和载体,试虫 | 第35页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·引物设计与合成 | 第35页 |
| ·PCR 扩增 | 第35页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及粗蛋白液制备 | 第36页 |
| ·生物测定 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-40页 |
| ·几丁质酶基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·重组质粒PMAL-p2x-ChiA 和PET-32a-ChiA 的构建 | 第37-38页 |
| ·HearNPV ChiA 基因在大肠杆菌中的表达 | 第38-39页 |
| ·HearNPV ChiA 蛋白对HearNPV 的增效作用 | 第39-40页 |
| ·小结与讨论 | 第40-41页 |
| ·结论 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第41-43页 |
| ·结论 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
