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氧化应激诱导猪卵巢颗粒细胞自噬及其对凋亡的作用

摘要第7-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语中英文对照表第10-11页
第一章 卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡第11-21页
    1. 卵泡闭锁第11-13页
        1.1 卵泡发育第11页
        1.2 卵泡闭锁第11-12页
        1.3 卵泡闭锁的原因第12-13页
    2. 颗粒细胞凋亡第13-15页
        2.1 颗粒细胞凋亡途径第13页
        2.2 颗粒细胞凋亡研究方法第13-14页
        2.3 颗粒细胞凋亡与氧化应激第14-15页
    3. 卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡的研究意义第15-16页
    参考文献第16-21页
第二章 细胞自噬研究进展第21-39页
    1. 自噬分类和形成过程第21-24页
        1.1 自噬分类第21-22页
        1.2 自噬的形成过程第22-24页
    2. 自噬调控分子机制第24-27页
        2.1 Beclin 1第25页
        2.2 mTOR第25页
        2.3 Foxo第25-26页
        2.4 p53第26-27页
    3. 自噬与凋亡第27页
    4. 自噬与卵泡闭锁第27-28页
    5. 自噬检测方法第28-31页
        5.1 电镜检测第29页
        5.2 LC3检测第29-30页
        5.3 p62的检测第30页
        5.4 MDC染色第30页
        5.5 吖啶橙染色(AO)第30-31页
        5.6 Keima标记检测第31页
    6. 自噬研究意义第31-32页
    参考文献第32-39页
第三章 实验研究 氧化应激诱导猪卵巢颗粒细胞自噬及其对凋亡的作用第39-70页
    1. 前言第39-40页
    2. 材料与方法第40-56页
        2.1 实验材料第40-43页
            2.1.1 实验动物组织第40页
            2.1.2 主要试剂与耗材第40-41页
            2.1.3 主要仪器第41页
            2.1.4 RT-PCR引物第41-42页
            2.1.5 相关生物学数据库和软件第42页
            2.1.6 主要溶液配置第42-43页
        2.2 实验方法第43-56页
            2.2.1 分离猪卵泡及形态观察第43页
            2.2.2 颗粒细胞的培养及转染第43-44页
            2.2.3 实验处理第44-45页
            2.2.4 细胞总RNA提取第45-46页
            2.2.5 RNA反转录合成cDNA第46-47页
            2.2.6 荧光定量PCR第47页
            2.2.7 流式细胞术第47-48页
            2.2.8 CCK8测定第48页
            2.2.9 质粒的转化和提取第48-50页
                2.2.9.1 质粒转化第48-49页
                2.2.9.2 质粒鉴定第49页
                2.2.9.3 质粒提取第49-50页
                2.2.9.4 质粒转染第50页
            2.2.10 免疫荧光第50-52页
            2.2.11 Western blot第52-56页
        2.3 数据分析第56页
    3. 实验结果第56-70页
        3.1 氧化应激能诱导猪卵巢颗粒细胞凋亡第56-59页
        3.2 氧化应激能诱导猪卵巢颗粒细胞自噬第59-63页
        3.3 抑制自噬能减少H_2O_2诱导的猪卵巢颗粒细胞凋亡第63-67页
            3.3.1 3-MA能抑制氧化应激诱导的猪卵巢颗粒细胞自噬第63-65页
            3.3.2 3-MA能减少氧化应激诱导的猪卵巢颗粒细胞凋亡和提高细胞活力第65-67页
        3.4 氧化应激诱导猪卵泡颗粒细胞自噬和凋亡的分子机制初探第67-70页
            3.4.1 mTOR可能参与了氧化应激诱导的猪卵巢颗粒细胞自噬第67-68页
            3.4.2 Foxo1可能参与了猪卵泡颗粒细胞自噬的调节第68-69页
            3.4.3 胰岛素能显著抑制氧化应激诱导的猪卵巢颗粒细胞自噬第69-70页
讨论第70-73页
参考文献第73-77页
全文结论第77-79页
致谢第79-81页
攻读硕士期间发表的论文第81页

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