| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 上篇 文献综述 | 第11-26页 |
| 第一章 产酶溶杆菌在植物病害防治中的研究进展 | 第12-18页 |
| 1 产酶溶杆菌OH11的分类和鉴定 | 第12页 |
| 2 产酶溶杆菌的生物学特性 | 第12-13页 |
| 3 产酶溶杆菌的生防机制 | 第13-16页 |
| 3.1 胞外水解酶 | 第13-14页 |
| 3.2 表面活性剂 | 第14-15页 |
| 3.3 热稳定抗真菌因子-HSAF | 第15-16页 |
| 3.4 生防调控基因 | 第16页 |
| 4 产酶溶杆菌OH11在植物病害防治中的应用 | 第16-18页 |
| 第二章 细菌环二鸟苷酸c-di-GMP信号调节机制的研究进展 | 第18-26页 |
| 1 环二鸟苷酸c-di-GMP的代谢调控 | 第18-21页 |
| 1.1 环二鸟苷酸c-di-GMP的合成 | 第18-19页 |
| 1.2 环二鸟苷酸c-di-GMP的降解 | 第19-20页 |
| 1.3 GGDEF-EAL或者GGDEF-HD-GYP结构域 | 第20-21页 |
| 2 环二鸟苷酸c-di-GMP的结合受体或效应蛋白 | 第21-23页 |
| 2.1 PilZ受体 | 第21-22页 |
| 2.2 I-site、退化的EAL或HD-GYP结构域作为c-di-GMP的受体 | 第22页 |
| 2.3 核糖开关作为c-di-GMP的受体 | 第22-23页 |
| 3 环二鸟苷酸c-di-GMP信号调控的功能机制研究 | 第23-26页 |
| 3.1 C-di-GMP调控细菌生物膜的形成 | 第23-24页 |
| 3.2 C-di-GMP调控细菌的运动性 | 第24-25页 |
| 3.3 C-di-GMP调控细菌毒性表达 | 第25-26页 |
| 下篇 研究内容 | 第26-68页 |
| 第一章 产酶溶杆菌第二信使c-di-GMP代谢相关蛋白的酶活检测及其功能研究 | 第28-54页 |
| 1 实验材料 | 第32-37页 |
| 1.1 菌株、质粒和培养条件 | 第32-34页 |
| 1.2 引物设计 | 第34-36页 |
| 1.3 试剂盒、化学试剂、抗生素和酶 | 第36页 |
| 1.4 培养基 | 第36-37页 |
| 2 实验方法 | 第37-44页 |
| 2.1 产酶溶杆菌OH11菌株基因组DNA的提取方法 | 第37-38页 |
| 2.2 热转化感受态的制备及转化 | 第38-39页 |
| 2.3 载体构建体系和条件 | 第39-40页 |
| 2.4 PCR产物的回收 | 第40页 |
| 2.5 质粒的提取和质粒双酶切验证 | 第40-41页 |
| 2.6 游动性实验操作方法和条件 | 第41页 |
| 2.7 Western Blot | 第41-42页 |
| 2.8 蛋白表达 | 第42-43页 |
| 2.9 HPLC检测DGC合成酶 | 第43-44页 |
| 2.10 数据分析 | 第44页 |
| 3 结果分析 | 第44-52页 |
| 3.1 产酶溶杆菌26个c-di-GMP代谢相关蛋白的鉴定与序列分析 | 第44-46页 |
| 3.2 产酶溶杆菌c-di-GMP相关基因酶活载体的构建(25个) | 第46-47页 |
| 3.3 产酶溶杆菌c-di-GMP相关基因的酶活实验统计及分析 | 第47-50页 |
| 3.4 产酶溶杆菌c-di-GMP合成酶3756结构域GGDEF的其相关载体构建及酶活检测 | 第50-51页 |
| 3.5 C-di-GMP合成酶3756的GGDEF结构域酶活的生化测定 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第二章 产酶溶杆菌c-di-GMP代谢相关基因在HSAF生物合成中的功能研究 | 第54-68页 |
| 1 实验材料 | 第56-61页 |
| 1.1 菌株、质粒和培养条件 | 第56-59页 |
| 1.2 引物设计 | 第59-61页 |
| 1.3 试剂盒、化学试剂、抗生素和酶 | 第61页 |
| 1.4 培养基 | 第61页 |
| 2 方法 | 第61-63页 |
| 2.1 产酶溶杆菌OH11菌株基因组的提取方法方法 | 第61页 |
| 2.2 大肠杆菌热转化感受态的制备及转化 | 第61页 |
| 2.3 载体构建体系和条件方法 | 第61页 |
| 2.4 PCR产物的回收方法 | 第61页 |
| 2.5 质粒的提取和质粒双酶切验证方法 | 第61页 |
| 2.6 OH11电转化感受态的制备和转化 | 第61-62页 |
| 2.7 产酶溶杆菌c-di-GMP相关基因过表达菌株的构建 | 第62页 |
| 2.8 HSAF提取及HPLC检测 | 第62-63页 |
| 3 结果分析 | 第63-66页 |
| 3.1 产酶溶杆菌c-di-GMP代谢相关基因的过表达菌株的构建 | 第63-64页 |
| 3.2 产酶溶杆菌c-di-GMP代谢相关基因过表达后对HSAF产量的影响 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
