| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略词对照表 | 第6-10页 |
| 1 前言 | 第10-15页 |
| 1.1 神经毒性研究现状 | 第10页 |
| 1.2 神经毒性的评价 | 第10页 |
| 1.3 ROS产生及作用 | 第10-11页 |
| 1.4 参与神经生长相关蛋白 | 第11-12页 |
| 1.4.1 βⅢ-Tubulin蛋白 | 第11页 |
| 1.4.2 NCAM蛋白 | 第11页 |
| 1.4.3 NueroD1定位及作用 | 第11-12页 |
| 1.4.4 GAP-43蛋白 | 第12页 |
| 1.5 细胞凋亡 | 第12-13页 |
| 1.5.1 Bax蛋白与凋亡 | 第12-13页 |
| 1.5.2 Caspase-3蛋白与凋亡 | 第13页 |
| 1.6 细胞自噬 | 第13-14页 |
| 1.6.1 Beclin-1蛋白与自噬 | 第13-14页 |
| 1.6.2 LC3B蛋白与自噬 | 第14页 |
| 1.7 PC12细胞株 | 第14页 |
| 1.8 研究的目的及意义 | 第14-15页 |
| 2 实验材料和方法 | 第15-26页 |
| 2.1 材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 常用试剂配置 | 第15-17页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-26页 |
| 2.2.1 PC12细胞培养 | 第17-18页 |
| 2.2.2 PC12铺板 | 第18页 |
| 2.2.3 流式细胞仪检测H_2O_2处理细胞后ROS含量的变化 | 第18-19页 |
| 2.2.4 流式细胞仪检测H_2O_2处理后PC12细胞周期变化(PI染色) | 第19页 |
| 2.2.5 Real Time-PCR检测H_2O_2处理后PC12细胞中相关基因的转录水平变化 | 第19-21页 |
| 2.2.6 Western blotting检测H_2O_2处理后PC12细胞中相关蛋白表达水平变化 | 第21-24页 |
| 2.2.7 免疫荧光技术检测H_2O_2处理后PC12细胞中βⅢ-tubulin变化 15 | 第24-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-67页 |
| 3.1 流式细胞技术分析H_2O_2对PC12细胞影响 | 第26-32页 |
| 3.1.1 H_2O_2处理后PC12细胞线粒体中ROS变化 | 第26-28页 |
| 3.1.2 H_2O_2处理后PC12细胞生长周期变化 | 第28-32页 |
| 3.2 Real-Time PCR技术检测H_2O_2对PC12细胞相关基因影响 | 第32-38页 |
| 3.2.1 H_2O_2处理对PC12细胞中βⅢ-Tubulin转录水平的影响规律 | 第32-33页 |
| 3.2.2 H_2O_2处理对PC12细胞中NCAM基因转录水平的影响 | 第33-35页 |
| 3.2.3 H_2O_2处理对PC12细胞中GAP-43基因转录水平的影响 | 第35-37页 |
| 3.2.4 检测H_2O_2处理对PC12细胞中NeuroD1基因转录水平的影响 | 第37-38页 |
| 3.3 Western Blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞相关蛋白影响 | 第38-46页 |
| 3.3.1 western blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞βⅢ-Tubulin蛋白影响 | 第38-41页 |
| 3.3.2 western blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞GAP-43蛋白影响 | 第41-43页 |
| 3.3.3 Western Blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞NeuroD1蛋白影响 | 第43-46页 |
| 3.4 免疫荧光技术分析H_2O_2对PC12细胞βⅢ-Tubulin蛋白 | 第46-59页 |
| 3.5 小结 | 第59-60页 |
| 3.6 Western Blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞凋亡相关蛋白影响 | 第60-63页 |
| 3.6.1 Western Blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞Bax蛋白影响 | 第60-62页 |
| 3.6.2 Western Blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞Caspase-3蛋白影响 | 第62-63页 |
| 3.7 Western Blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞自噬相关蛋白影响 | 第63-66页 |
| 3.7.1 Western Blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞Beclin-1蛋白影响 | 第63-65页 |
| 3.7.2 Western Blotting技术检测H_2O_2对PC12细胞LC3B蛋白影响 | 第65-66页 |
| 3.8 小结 | 第66-67页 |
| 4 结论 | 第67-68页 |
| 5 讨论 | 第68-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 硕士期间科研成果及参与项目情况 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
