摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
第一节 免疫系统概述 | 第12-14页 |
一、获得性免疫系统 | 第12-13页 |
二、固有免疫系统 | 第13页 |
三、无脊椎动物的固有免疫 | 第13-14页 |
第二节 固有免疫的模式识别作用 | 第14-17页 |
一、病原相关分子模式 | 第14-15页 |
二、模式识别受体 | 第15-17页 |
1. 分泌型PRRs | 第15-16页 |
2. 信号传递型PRRs | 第16页 |
3. 内吞型PRRs | 第16-17页 |
第三节 清道夫受体家族的研究 | 第17-27页 |
一、清道夫受体的发现和定义 | 第17页 |
二、清道夫受体的分类和特点 | 第17-22页 |
三、清道夫受体的功能 | 第22-26页 |
1. 免疫识别功能 | 第23页 |
2. 介导细胞吞噬 | 第23-24页 |
3. 促进细胞粘附 | 第24-25页 |
4. 调节炎症反应 | 第25页 |
5. 对凋亡细胞的清除 | 第25页 |
6. 参与动脉粥样硬化的形成 | 第25-26页 |
四、无脊椎动物清道夫受体的研究进展 | 第26-27页 |
第四节 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
第二章 实验材料和方法 | 第28-44页 |
第一节 实验材料 | 第28-29页 |
一、实验用扇贝及菌株 | 第28页 |
二、扇贝样品的处理 | 第28页 |
三、主要化学试剂 | 第28-29页 |
四、主要设备 | 第29页 |
第二节 实验方法 | 第29-44页 |
一、扇贝总RNA 的提取 | 第29-30页 |
二、cDNA 文库的构建及序列分析 | 第30-31页 |
三、RACE 技术扩增获得基因全长序列 | 第31-33页 |
四、琼脂糖凝胶电泳回收PCR 产物 | 第33-34页 |
五、质粒的制备 | 第34页 |
六、感受态细胞的制备、连接及转化 | 第34-35页 |
七、目的基因的生物信息学分析 | 第35-36页 |
八、荧光实时定量PCR 检测目的基因的表达 | 第36-37页 |
九、蛋白的原核重组表达和纯化 | 第37-40页 |
十、多克隆抗体的制备 | 第40页 |
十一、免疫印迹(Western-bolt) | 第40-41页 |
十二、免疫荧光实验 | 第41-42页 |
十三、配体结合实验 | 第42-44页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第44-59页 |
第一节 实验结果 | 第44-56页 |
一、CfSR 基因的全长克隆和核苷酸序列分析 | 第44-48页 |
二、CfSR 蛋白同源性和结构分析 | 第48-50页 |
三、CfSR 的组织表达规律及PAMPs 刺激下时序表达特征 | 第50-52页 |
四、CfSR 的原核重组表达、抗体制备和免疫印迹检测 | 第52-53页 |
五、CfSR 细胞免疫荧光检测分析 | 第53-54页 |
六、CfSR 的配体结合活性分析 | 第54-56页 |
第二节 讨论 | 第56-59页 |
第四章 结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
硕士期间完成的文章 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |