摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-19页 |
1.1 褐飞虱危害及其研究进展 | 第11-12页 |
1.2 褐飞虱与水稻互作 | 第12-13页 |
1.3 蛋白组学研究概况 | 第13-16页 |
1.3.1 蛋白组学的研究进展 | 第13页 |
1.3.2 蛋白质组学的研究技术 | 第13-14页 |
1.3.3 同位素相对与绝对定量技术(iTRAQ) | 第14-16页 |
1.4 实时荧光定量PCR (Real-time quantitative PCR)技术 | 第16页 |
1.4.1 实时定量PCR定量PCR的发展 | 第16页 |
1.4.2 实时定量PCR的原理与应用 | 第16页 |
1.5 免疫组织化学技术的发展与应用 | 第16-17页 |
1.6 研究目的与意义 | 第17-19页 |
第二章 取食抗、感水稻的褐飞虱蛋白组学的研究 | 第19-35页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 供试虫源 | 第19页 |
2.1.2 药品试剂 | 第19页 |
2.1.3 溶液试剂 | 第19-20页 |
2.1.4 主要仪器 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-25页 |
2.2.1 取食抗、感水稻的褐飞虱总蛋白的提取与检测 | 第20-22页 |
2.2.2 胰蛋白酶消化和iTRAQ质谱分析 | 第22-24页 |
2.2.3 数据分析 | 第24-25页 |
2.3 绪果与分析 | 第25-35页 |
2.3.1 两次独立检测的蛋白表达水平的比值(114:116,117:115,115:116) | 第25-34页 |
2.3.2 iTRAQ实验重复性分析 | 第34-35页 |
第三章 表达差异较大蛋白基因的实时定量PCR检测分析 | 第35-51页 |
3.1 实验材料 | 第35-36页 |
3.1.1 供试虫源 | 第35页 |
3.1.2 主要试剂 | 第35页 |
3.1.3 主要溶液 | 第35页 |
3.1.4 主要仪器 | 第35-36页 |
3.2 实验方法 | 第36-40页 |
3.2.1 荧光定量PCR所需cDNA的获得 | 第36-37页 |
3.2.2 差异较大的蛋白基因的实时定量PCR引物的设计与合成 | 第37-40页 |
3.2.3 实时定量PCR反应体系的配制及扩增效率分析方法 | 第40页 |
3.3 结果与分析 | 第40-51页 |
3.3.1 RNA的提取与检测 | 第40-41页 |
3.3.2 实时定量结果分析 | 第41-51页 |
第四章 重要差异蛋白的表达检测 | 第51-57页 |
4.1 实验材料 | 第51页 |
4.1.1 供试虫源 | 第51页 |
4.1.2 主要试剂 | 第51页 |
4.1.3 溶液 | 第51页 |
4.2 实验方法 | 第51-54页 |
4.2.1 褐飞虱脂肪酸合成酶与蛋白激酶的Western印迹杂交检测 | 第51-53页 |
4.2.2 免疫组化检测脂肪酸合酶与蛋白激酶时空表达特性 | 第53-54页 |
4.3 结果与分析 | 第54-57页 |
4.3.1 褐飞虱脂肪酸合酶与蛋白激酶的Western印迹杂交检测 | 第54-55页 |
4.3.2 免疫组化检测脂肪酸合酶时空表达特性 | 第55-56页 |
4.3.3 免疫组化检测蛋白激酶时空表达特性 | 第56-57页 |
讨论与展望 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
致谢 | 第63页 |