| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 0 前言 | 第11-14页 |
| 1 环境雌激素快速筛选方法研究进展 | 第14-21页 |
| ·动物模型整体水平 | 第14-15页 |
| ·大鼠子宫增重方法 | 第14页 |
| ·水生生物形态学变化观察法 | 第14-15页 |
| ·组织与器官水平 | 第15页 |
| ·细胞水平 | 第15-17页 |
| ·细胞培养检测法 | 第15-16页 |
| ·酵母雌激素筛选测试法(yeast estrogen screen,YES) | 第16-17页 |
| ·分子水平 | 第17-18页 |
| ·免疫检测法(Immunoassays) | 第17-18页 |
| ·生物传感器检测法 | 第18页 |
| ·研究展望 | 第18-21页 |
| ·快速筛选技术的优劣势分析 | 第18-19页 |
| ·快速筛选模式生物的选择 | 第19-20页 |
| ·快速筛选技术的甄选 | 第20页 |
| ·快速筛选试剂盒的研制及应用方向 | 第20-21页 |
| 2 细小色矛线虫卵黄原蛋白基因的克隆 | 第21-38页 |
| ·材料与方法 | 第21-28页 |
| ·实验动物来源与培养 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·样品采集 | 第22页 |
| ·RNA提取 | 第22-23页 |
| ·DNA提取 | 第23页 |
| ·AMV-RT反应体系 | 第23-24页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·PCR反应 | 第24-25页 |
| ·PCR扩增条带的凝胶回收 | 第25-26页 |
| ·扩增片段的克隆 | 第26-28页 |
| ·扩增核苷酸序列的特异性检测 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-34页 |
| ·电泳检测RNA质量 | 第28页 |
| ·PCR检测反转录cDNA质量 | 第28-30页 |
| ·电泳检测基因组DNA质量 | 第30页 |
| ·引物设计 | 第30-31页 |
| ·C.germanica VTG基因特异性序列的克隆 | 第31-32页 |
| ·所得C.germanica VTG基因片段的特异性比对 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-38页 |
| ·线虫的VTG基因家族 | 第34-36页 |
| ·基因克隆与序列比较分析 | 第36-38页 |
| 3 利用原位杂交技术检测细小色矛线虫VTG mRNA的表达 | 第38-48页 |
| ·材料与方法 | 第38-41页 |
| ·实验动物 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·主要器材 | 第39页 |
| ·久效磷农药和E_2暴露实验 | 第39-40页 |
| ·原位杂交检测细小色矛线虫VTG mRNA的表达 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-45页 |
| ·原位杂交寡核苷酸探针的设计 | 第41-42页 |
| ·原位杂交结果 | 第42-45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| ·原位杂交基础上的快速筛选方法的建立 | 第45-46页 |
| ·提高寡核苷酸探针的杂交效率和准确率的讨论 | 第46页 |
| ·原位杂交技术和细小色矛线虫在活体筛选中的应用 | 第46-48页 |
| 4 利用荧光原位杂交技术检测细小色矛线虫VTG mRNA的表达 | 第48-54页 |
| ·材料与方法 | 第48-49页 |
| ·实验动物 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·主要器材 | 第48页 |
| ·久效磷农药和E_2暴露实验 | 第48页 |
| ·FISH检测细小色矛线虫VTG mRNA的表达 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·荧光原位杂交寡核苷酸探针的设计 | 第49页 |
| ·荧光原位杂交结果 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·荧光素标记的探针与原位杂交方法的结合 | 第52页 |
| ·增强FISH中杂交信号的改进方法 | 第52-53页 |
| ·以细小色矛线虫为模型动物的荧光原位杂交活体筛选技术 | 第53-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附录 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简历 | 第70页 |
| 发表的学术论文 | 第70页 |
