| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写 | 第10-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-36页 |
| 1.1 肝炎病毒概述 | 第15-22页 |
| 1.1.1 丙型肝炎病毒的基本特征 | 第15-19页 |
| 1.1.2 乙型肝炎病毒的基本特征 | 第19-22页 |
| 1.2 肝炎病毒感染模型简介 | 第22-26页 |
| 1.2.1 细胞培养模型 | 第22-24页 |
| 1.2.2 动物模型 | 第24-26页 |
| 1.3 模式识别受体简介 | 第26-30页 |
| 1.3.1 RIG-I样受体 | 第26-28页 |
| 1.3.2 Toll样受体 | 第28-29页 |
| 1.3.3 其它模式识别受体 | 第29-30页 |
| 1.4 抗病毒天然免疫蛋白 | 第30-32页 |
| 1.5 病毒免疫逃逸机制 | 第32-35页 |
| 1.5.1 病毒因素 | 第32-34页 |
| 1.5.2 宿主因素 | 第34-35页 |
| 1.6 本论文的设计思路 | 第35-36页 |
| 第2章 新型肝癌细胞系HLCZ01的分离与鉴定 | 第36-47页 |
| 2.1 前言 | 第36页 |
| 2.2 实验材料 | 第36-37页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第36-37页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-43页 |
| 2.3.1 体外分离和培养原代肝癌细胞 | 第37-38页 |
| 2.3.2 小鼠成瘤实验 | 第38页 |
| 2.3.3 Western Blot实验步骤 | 第38-39页 |
| 2.3.4 Immunofluorescence实验步骤 | 第39-40页 |
| 2.3.5 Real-time PCR实验步骤 | 第40-42页 |
| 2.3.6 统计学分析 | 第42-43页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第43-46页 |
| 2.4.1 HLCZ01细胞具有肝细胞特征 | 第43-44页 |
| 2.4.2 HLCZ01细胞表达HCV受体 | 第44-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-47页 |
| 第3章 HLCZ01支持HCV和HBV感染的完整生活周期 | 第47-79页 |
| 3.1 前言 | 第47-48页 |
| 3.2 实验材料 | 第48页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第48页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第48页 |
| 3.3 实验方法 | 第48-53页 |
| 3.3.1 HBV感染方法 | 第48-49页 |
| 3.3.2 HCV感染方法 | 第49页 |
| 3.3.3 HBV和HCV sera感染方法 | 第49-50页 |
| 3.3.4 ELISA检测HBV病毒蛋白 | 第50页 |
| 3.3.5 Southern Blot实验步骤 | 第50-51页 |
| 3.3.6 Northern Blot实验步骤 | 第51页 |
| 3.3.7 Lamivdine动物实验 | 第51页 |
| 3.3.8 流式细胞仪检测病毒感染细胞 | 第51-52页 |
| 3.3.9 免疫电镜 | 第52页 |
| 3.3.10 Western Blot实验步骤 | 第52页 |
| 3.3.11 Immunofluorescence实验步骤 | 第52页 |
| 3.3.12 Real-time PCR实验步骤 | 第52-53页 |
| 3.3.13 统计学分析 | 第53页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第53-78页 |
| 3.4.1 HLCZ01细胞支持HCV感染 | 第53-60页 |
| 3.4.2 HLCZ01细胞支持HBV感染 | 第60-74页 |
| 3.4.3 HLCZ01细胞支持HCV和HBV共感染 | 第74-78页 |
| 3.5 小结 | 第78-79页 |
| 第4章 HCV诱导HLCZ01和PHH产生有效的先天免疫应答 | 第79-98页 |
| 4.1 前言 | 第79页 |
| 4.2 实验材料 | 第79-80页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第79-80页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第80页 |
| 4.3 实验方法 | 第80-83页 |
| 4.3.1 HCV感染方法 | 第80页 |
| 4.3.2 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第80-81页 |
| 4.3.3 Western Blot实验步骤 | 第81页 |
| 4.3.4 过表达和沉默载体构建 | 第81页 |
| 4.3.5 Immunofluorescence实验步骤 | 第81页 |
| 4.3.6 Real-time PCR实验步骤 | 第81-82页 |
| 4.3.7 统计学分析 | 第82-83页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第83-96页 |
| 4.4.1 HCV感染HLCZ01和PHH可诱导IFN-β和ISGs表达 | 第83-87页 |
| 4.4.2 HCV诱导HLCZ01和PHH细胞凋亡 | 第87-90页 |
| 4.4.3 TRAIL介导HCV诱导的肝细胞凋亡 | 第90-92页 |
| 4.4.4 HCV诱导的先天免疫应答依赖于RIG-I通路 | 第92-96页 |
| 4.5 小结 | 第96-98页 |
| 第5章 MIR-942通过调控ISG12A表达以介导NOXA依赖的HCV所致细胞凋亡 | 第98-110页 |
| 5.1 前言 | 第98页 |
| 5.2 实验材料 | 第98-99页 |
| 5.2.1 材料与试剂 | 第98-99页 |
| 5.2.2 仪器设备 | 第99页 |
| 5.3 实验方法 | 第99-101页 |
| 5.3.1 HCV感染方法 | 第99页 |
| 5.3.2 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第99页 |
| 5.3.3 过表达和沉默载体构建 | 第99-100页 |
| 5.3.4 双荧光素酶报告基因检测 | 第100页 |
| 5.3.5 Western Blot实验步骤 | 第100页 |
| 5.3.6 Immunofluorescence实验步骤 | 第100页 |
| 5.3.7 Real-time PCR实验步骤 | 第100-101页 |
| 5.3.8 统计学分析 | 第101页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第101-108页 |
| 5.4.1 ISG12a介导HCV诱导的肝细胞凋亡 | 第101-102页 |
| 5.4.2 MiR-942靶向于ISG12a以调控HCV诱导的肝细胞凋亡 | 第102-105页 |
| 5.4.3 ISG12a调控HCV诱导的肝细胞凋亡依赖于Noxa | 第105-108页 |
| 5.5 小结 | 第108-110页 |
| 结论 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-133页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文 | 第133-135页 |
| 附录B 攻读学位期间所申请的发明专利 | 第135-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
