| 致谢 | 第4-5页 |
| 缩略字表 | 第5-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 低温诱导植物开花的分子机理 | 第12页 |
| 1.2 胞外脱氢抗坏血酸与植物开花调控有关 | 第12-17页 |
| 1.2.1 抗坏血酸的功能 | 第12-14页 |
| 1.2.1.1 影响开花时间和衰老 | 第12-13页 |
| 1.2.1.2 影响植物发育 | 第13页 |
| 1.2.1.3 促进细胞分裂 | 第13页 |
| 1.2.1.4 影响细胞壁合成 | 第13-14页 |
| 1.2.1.5 保护光合作用和影响碳代谢 | 第14页 |
| 1.2.1.6 提高抗逆性 | 第14页 |
| 1.2.2 胞外脱氢抗坏血酸的合成 | 第14-15页 |
| 1.2.3 胞外脱氢抗坏血酸的降解 | 第15-16页 |
| 1.2.4 胞外脱氢抗坏血酸含量影响开花时间 | 第16-17页 |
| 1.3 活性氧参与低温和开花调控 | 第17-18页 |
| 1.3.1 活性氧的产生和消除 | 第17页 |
| 1.3.1.1 低温诱导活性氧的产生 | 第17页 |
| 1.3.1.2 活性氧的消除 | 第17页 |
| 1.3.2 NADPH氧化酶 | 第17页 |
| 1.3.3 ROS影响开花时间 | 第17-18页 |
| 2 引言 | 第18-20页 |
| 2.1 研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2.2 研究内容及技术路线 | 第19-20页 |
| 2.2.1 研究内容 | 第19-20页 |
| 2.2.2 技术路线 | 第20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-27页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第20-21页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第21页 |
| 3.2 实验方法 | 第21-27页 |
| 3.2.1 pROK2-AOS表达载体并进行转化 | 第21页 |
| 3.2.2 叶盘法转化烟草 | 第21-22页 |
| 3.2.3 低温处理方法 | 第22-23页 |
| 3.2.4 茎尖生长点的获得 | 第23页 |
| 3.2.5 野生型、AO过表达型烟草顶芽及叶片中RNA的提取 | 第23页 |
| 3.2.6 引物设计及半定量RT-PCR | 第23-24页 |
| 3.2.6.1 引物设计 | 第23-24页 |
| 3.2.6.2 半定量RT-PCR | 第24页 |
| 3.2.7 生理指标的测定和组织及酶活性染色 | 第24-27页 |
| 3.2.7.1 H_2O_2染色方法 | 第24页 |
| 3.2.7.2 H_2O_2含量的测定 | 第24页 |
| 3.2.7.3 超氧阴离子染色方法 | 第24-25页 |
| 3.2.7.4 淀粉的染色 | 第25页 |
| 3.2.7.5 α淀粉酶活性的测定 | 第25页 |
| 3.2.7.6 光合指标的测定 | 第25页 |
| 3.2.7.7 SS和SPS活性的测定 | 第25页 |
| 3.2.7.8 淀粉含量测定 | 第25页 |
| 3.2.7.9 可溶性糖含量的测定 | 第25-26页 |
| 3.2.7.10 蔗糖、葡萄糖和果糖的测定 | 第26页 |
| 3.2.7.11 气孔开度的检测及照像 | 第26页 |
| 3.2.7.12 NADPH氧化酶胶内染色方法 | 第26页 |
| 3.2.7.13 AO酶活性的测定 | 第26页 |
| 3.2.7.14 抗坏血酸和DHA含量测定 | 第26-27页 |
| 4 结果与分析 | 第27-41页 |
| 4.1 抗坏血酸氧化酶CDNA的克隆 | 第27-30页 |
| 4.2 农杆菌介导的转化及转基因植株的获得及鉴定 | 第30-31页 |
| 4.3 胞外DHA与烟草生长状态 | 第31-39页 |
| 4.3.1 生长差异 | 第31-32页 |
| 4.3.2 气孔开度与密度 | 第32-34页 |
| 4.3.3 光合作用 | 第34-35页 |
| 4.3.4 碳代谢 | 第35-37页 |
| 4.3.5 顶端分生组织中的激素和氧含量 | 第37-38页 |
| 4.3.6 叶片中的抗氧化能力 | 第38-39页 |
| 4.4 胞外DHA与低温诱导烟草成花的关系 | 第39页 |
| 4.4.1 DHA转运抑制剂对SOC1表达水平的影响 | 第39页 |
| 4.5 NADPH氧化酶在DHA和低温诱导烟草成花过程中的作用 | 第39-41页 |
| 4.5.1 NADPH氧化酶对成花作用的影响 | 第39-40页 |
| 4.5.2 H_2O_2和超氧阴离子在低温诱导成花过程中的作用 | 第40-41页 |
| 5 结论与讨论 | 第41-44页 |
| 5.1 结论 | 第41-42页 |
| 5.2 讨论 | 第42-44页 |
| 5.2.1 DHA信号途径 | 第42页 |
| 5.2.1.1 胞外DHA与低温诱导烟草成花的关系 | 第42页 |
| 5.2.1.2 NADPH氧化酶在DHA和低温诱导烟草成花过程中的作用 | 第42页 |
| 5.2.2 AO对碳代谢的影响 | 第42-43页 |
| 5.2.3 进一步研究的建议 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
