| 英文缩略词表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 核苷单糖的生物合成途径 | 第11-13页 |
| 1.2 蔗糖合酶研究现状 | 第13-21页 |
| 1.2.1 蔗糖合酶家族基因染色体定位 | 第13-17页 |
| 1.2.2 蔗糖合酶结构 | 第17页 |
| 1.2.3 蔗糖合酶亚细胞定位 | 第17-18页 |
| 1.2.4 蔗糖合酶的生物学功能 | 第18-21页 |
| 1.2.4.1 为机体提供核苷单糖供体 | 第18-19页 |
| 1.2.4.2 参与淀粉的合成 | 第19页 |
| 1.2.4.3 与棉花纤维产量相关 | 第19-20页 |
| 1.2.4.4 蔗糖合酶具有影响植株生长的作用 | 第20页 |
| 1.2.4.5 蔗糖合酶可提高植株抗性 | 第20-21页 |
| 1.3 虎眼万年青中Sus克隆及鉴定的意义 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-32页 |
| 2.1 主要仪器设备及生产厂家 | 第23-24页 |
| 2.2 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.2.1 标准品及常用试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.1.1 标准品及底物 | 第24页 |
| 2.2.1.2 常用生化试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.2 常见溶液配方 | 第25-26页 |
| 2.2.2.1 DNA电泳缓冲液(50×Tris-TAE) | 第25页 |
| 2.2.2.2 培养基配方 | 第25页 |
| 2.2.2.3 蛋白变性电泳SDS-PAGE所涉及溶液 | 第25-26页 |
| 2.2.2.4 蛋白染色：银染试剂 | 第26页 |
| 2.2.2.5 蛋白纯化相关溶液 | 第26页 |
| 2.2.2.6 Western-Blot相关溶液配方 | 第26页 |
| 2.3 植物材料 | 第26页 |
| 2.4 抗生素的配制 | 第26-27页 |
| 2.5 试剂盒及酶等生化试剂 | 第27页 |
| 2.6 菌株及质粒 | 第27页 |
| 2.7 常用实验方法 | 第27-32页 |
| 2.7.1 感受态制备方法(CaCl_2法) | 第27-28页 |
| 2.7.2 克隆载体连接 | 第28页 |
| 2.7.3 大肠杆菌的转化 | 第28页 |
| 2.7.4 重组子的筛选 | 第28-29页 |
| 2.7.5 重组蛋白的诱导 | 第29页 |
| 2.7.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第29页 |
| 2.7.7 蛋白染色—银染法 | 第29-30页 |
| 2.7.8 蛋白纯化及超滤 | 第30页 |
| 2.7.9 Western-Blot方法 | 第30-32页 |
| 第三章 虎眼万年青中蔗糖合酶(Sus)基因的克隆及生物信息学分析 | 第32-48页 |
| 引言 | 第32页 |
| 3.1 实验方法 | 第32-37页 |
| 3.1.1 虎眼万年青转录组测序及序列分析 | 第32页 |
| 3.1.2 虎眼万年青全cDNA的合成及OcSus基因的克隆 | 第32-34页 |
| 3.1.3 生物信息学分析 | 第34-35页 |
| 3.1.4 表达载体构建 | 第35-37页 |
| 3.1.4.1 质粒提取 | 第35-36页 |
| 3.1.4.2 载体酶切 | 第36页 |
| 3.1.4.3 基因片段扩增 | 第36页 |
| 3.1.4.4 In-fusion技术快速连接 | 第36-37页 |
| 3.2 实验结果 | 第37-46页 |
| 3.2.1 虎眼万年青转录组测序结果分析 | 第37-38页 |
| 3.2.2 OcSus cDNA的克隆 | 第38-39页 |
| 3.2.3 OcSus1、OcSus2和OcSus3的生物信息学分析 | 第39-45页 |
| 3.2.3.1 OcSus1-3 ORF预测及其理论编码蛋白的理化性质预测 | 第39-40页 |
| 3.2.3.2 OcSus1-3跨膜域及相应蛋白性质预测 | 第40-41页 |
| 3.2.3.3 OcSus1-3结构域预测及序列一致性分析 | 第41-44页 |
| 3.2.3.4 OeSus1-3的系统进化关系分析 | 第44-45页 |
| 3.2.4 OcSus1-3相应表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.3 本章小结 | 第46-48页 |
| 第四章 OcSus1-3重组蛋白的表达及功能分析 | 第48-73页 |
| 引言 | 第48页 |
| 4.1 实验方法 | 第48-55页 |
| 4.1.1 OcSus重组蛋白的诱导表达及检测 | 第48页 |
| 4.1.2 OcSus1-3的纯化及超滤 | 第48-49页 |
| 4.1.3 OcSus1-3的功能鉴定 | 第49-52页 |
| 4.1.3.1 蛋白定量 | 第50页 |
| 4.1.3.2 功能鉴定 | 第50-52页 |
| 4.1.4 OcSus1-3底物谱偏好性研究 | 第52页 |
| 4.1.5 OcSus1-3催化的最适pH、最适温度及二价金属离子影响分析 | 第52-53页 |
| 4.1.5.1 蔗糖分解反应催化所需最适温度 | 第52页 |
| 4.1.5.2 蔗糖分解反应催化所需最适pH | 第52页 |
| 4.1.5.3 二价金属离子对OcSus1-3催化的蔗糖分解反应的影响 | 第52-53页 |
| 4.1.6 OcSus1-3催化蔗糖分解反应酶促动力学参数测定 | 第53-54页 |
| 4.1.6.1 产物标准品UDP-葡萄糖标准曲线的绘制 | 第53页 |
| 4.1.6.2 OcSus1-3催化UDP的酶促动力学参数测定 | 第53页 |
| 4.1.6.3 OcSus1-3催化蔗糖的酶促动力学参数测定 | 第53-54页 |
| 4.1.7 OcSus1-3表达模式分析 | 第54-55页 |
| 4.2 实验结果 | 第55-71页 |
| 4.2.1 OcSus1-3重组蛋白的检测 | 第55-58页 |
| 4.2.2 OeSus1-3的功能验证 | 第58-63页 |
| 4.2.2.1 蔗糖合成方向功能鉴定 | 第58-60页 |
| 4.2.2.2 蔗糖分解方向功能鉴定 | 第60-63页 |
| 4.2.3 OcSus1-3的底物偏好性研究 | 第63页 |
| 4.2.4 OcSus1-3催化蔗糖分解反应的最适温度及最适pH | 第63-66页 |
| 4.2.4.1 OcSus1-3催化蔗糖分解反应的最适温度 | 第63-64页 |
| 4.2.4.2 OcSus1-3催化蔗糖分解反应的最适pH | 第64-65页 |
| 4.2.4.3 二价金属离子对OcSus1-3催化蔗糖分解反应的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.5 OcSus1-3催化蔗糖分解反应的酶促动力学参数测定 | 第66-69页 |
| 4.2.5.1 产物UDP-葡萄糖标准品标准曲线的绘制 | 第66-67页 |
| 4.2.5.2 OcSus1-3催化UDP和蔗糖的酶促动力学参数测定 | 第67-69页 |
| 4.2.6 OcSus1-3表达模式研究 | 第69-71页 |
| 4.3 本章小结 | 第71-73页 |
| 第五章 全文总结 | 第73-75页 |
| 5.1 主要内容和意义 | 第73-74页 |
| 5.1.1 蔗糖合酶基因家族的克隆及表达 | 第73页 |
| 5.1.2 蔗糖合酶基因家族的功能鉴定 | 第73页 |
| 5.1.3 蔗糖合酶基因家族酶学性质研究 | 第73-74页 |
| 5.1.4 蔗糖合酶基因家族的表达模式研究 | 第74页 |
| 5.2 论文创新点 | 第74页 |
| 5.3 论文不足之处 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 附表 | 第80-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 个人简介 | 第85页 |
