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苎麻性别分化相关基因的克隆、表达及遗传转化研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第1章 前言第10-15页
    1.1 内源乙烯对植物性别表达的研究进展第10-11页
    1.2 乙烯的生物合成第11-14页
        1.2.1 ACC合成酶基因的克隆与功能研究进展第11-12页
        1.2.2 ACC合成酶基因的表达调控第12-13页
        1.2.3 ACC氧化酶基因克隆的研究进展第13页
        1.2.4 ACC氧化酶基因的表达调控第13-14页
    1.3 本研究的目的和意义第14-15页
第2章 苎麻ACO和ACS家族部分基因的克隆和序列分析第15-34页
    2.1 试验材料、试剂与仪器第15页
    2.2 方法第15-23页
        2.2.1 苎麻组织总RNA的提取第15-16页
        2.2.2 首链cDNA的合成第16-19页
        2.2.3 RACE引物设计第19-20页
        2.2.4 PCR扩增及目的基因片段的纯化回收第20-22页
        2.2.5 PCR产物的TA克隆第22页
        2.2.6 连接产物转化大肠杆菌Trans1-T1第22页
        2.2.7 PCR筛选阳性克隆第22-23页
        2.2.8 cDNA开放读码框序列扩增第23页
        2.2.9 克隆基因的生物信息学分析第23页
    2.3 结果与分析第23-32页
        2.3.1 BnACO1、BnACO2、BnACS2全长基因的克隆第23-25页
        2.3.2 BnACO1、BnACO2、BnACS2基因的生物信息学分析第25-32页
    2.4 讨论第32-34页
第3章 苎麻ACO1,ACO2,ACS2基因的表达特征分析第34-44页
    3.1 试验材料、试剂与仪器第34页
    3.2 方法第34-36页
        3.2.1 苎麻各组织总RNA的提取第34-35页
        3.2.2 实时荧光定量PCR引物设计第35页
        3.2.3 gDNA去除和第一链cDNA的合成第35-36页
        3.2.4 实时荧光定量PCR第36页
    3.3 结果与分析第36-41页
        3.3.1 RNA提取第36-37页
        3.3.2 BnACO1基因不同部位表达差异性及胁迫诱导表达分析第37-39页
        3.3.3 BnACO1、BnACO2、BnACS2基因的时空表达分析第39-41页
    3.4 讨论与分析第41-44页
第4章 BnACO2基因原核表达、过表达载体构建以及及转化拟南芥研究第44-56页
    4.1 试验材料、试剂与仪器第44页
    4.2 方法第44-51页
        4.2.1 原核表达载体构建第44-48页
        4.2.2 植物转基因过表达载体的构建第48-49页
        4.2.3 重组质粒转化农杆菌第49-50页
        4.2.4 转化拟南芥第50页
        4.2.5 转基因拟南芥的筛选和PCR鉴定第50-51页
    4.3 结果与分析第51-54页
        4.3.1 BnACO2基因原核表达载体的构建与重组质粒的酶切验证第51-52页
        4.3.2 BnACO2基因过表达载体的构建与重组质粒的酶切验证第52-53页
        4.3.3 转基因拟南芥的获得第53-54页
        4.3.4 转基因拟南芥的PCR鉴定第54页
    4.4 讨论第54-56页
第5章 结论与展望第56-58页
    5.1 论文结论第56页
    5.2 后续研究第56-58页
参考文献第58-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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