摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
中英缩略词表 | 第9-10页 |
前言 | 第10-15页 |
参考文献 | 第12-15页 |
第一部分 体外诱导高毒力肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药及微生物学变化 | 第15-29页 |
1 引言 | 第15-16页 |
2 材料 | 第16-18页 |
2.1 实验菌株 | 第16-17页 |
2.2 菌株保存 | 第17页 |
2.3 试剂与溶液 | 第17-18页 |
3 实验方法 | 第18-22页 |
3.1 细菌培养 | 第18页 |
3.2 细菌总DNA提取 | 第18页 |
3.3 PCR扩增毒力基因与耐药基因 | 第18-19页 |
3.4 引物设计与合成 | 第19-20页 |
3.5 药敏试验 | 第20-21页 |
3.6 体外诱导实验与诱导后耐药菌株稳定性检测 | 第21页 |
3.7 高粘液性(hypermucoviscosityHM)表型检测: | 第21页 |
3.8 CPS定量实验 | 第21-22页 |
3.9 PFGE | 第22页 |
4 结果 | 第22-26页 |
4.1 诱导后耐药菌株的鉴定及同源性分析 | 第22-24页 |
4.2 诱导前后菌株的MIC值变化 | 第24-25页 |
4.3 诱导前后菌株粘性变化 | 第25页 |
4.4 CPS定量结果 | 第25-26页 |
4.5 统计学分析 | 第26页 |
5 讨论 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-29页 |
第二部分 诱导后耐药菌株的毒力特征及相关基因表达变化研究 | 第29-46页 |
1. 引言 | 第29-30页 |
2. 材料 | 第30-31页 |
2.1 实验菌株 | 第30页 |
2.2 试剂与溶液 | 第30-31页 |
3. 方法 | 第31-35页 |
3.1 血清抗性实验 | 第31-32页 |
3.2 异硫氰酸FITC荧光标记细菌 | 第32页 |
3.3 外周血中性粒细胞的分离 | 第32-33页 |
3.4 流式细胞术检测中性粒细胞抗吞噬实验 | 第33页 |
3.5 生物膜形成能力评估 | 第33-34页 |
3.6 小鼠毒力实验 | 第34页 |
3.7 转录组学分析 | 第34-35页 |
4. 结果 | 第35-42页 |
4.1 诱导前后菌株血清抗性实验结果 | 第35-36页 |
4.2 抗中性粒细胞吞噬实验结果 | 第36-37页 |
4.3 生物膜形成能力评估结果 | 第37页 |
4.4 小鼠毒力实验结果 | 第37-38页 |
4.5 相关转录组学分析 | 第38-42页 |
5. 讨论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
结论 | 第46-47页 |
不足与展望 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
综述 | 第50-59页 |
参考文献 | 第55-59页 |