摘要 | 第12-15页 |
Abstract | 第15-18页 |
第一章 绪论 | 第19-94页 |
1.1 引言 | 第19-21页 |
1.2 自由基荧光探针 | 第21-57页 |
1.2.1 单线态氧荧光探针 | 第21-25页 |
1.2.2 羟基自由基荧光探针 | 第25-29页 |
1.2.3 超氧阴离子荧光探针 | 第29-34页 |
1.2.4 过氧化氢荧光探针 | 第34-39页 |
1.2.5 过氧亚硝酸根荧光探针 | 第39-43页 |
1.2.6 一氧化氮荧光探针 | 第43-57页 |
1.2.6.1 金属配合物类荧光探针 | 第43-46页 |
1.2.6.2 邻苯二胺类荧光探针 | 第46-55页 |
1.2.6.3 其他类荧光探针 | 第55-57页 |
1.3 本论文选题思想 | 第57-58页 |
1.4 参考文献 | 第58-94页 |
第二章 新型近红外一氧化氮荧光探针的合成、表征和荧光性质研究 | 第94-121页 |
2.1 引言 | 第94-95页 |
2.2 实验部分 | 第95-109页 |
2.2.1 仪器与试剂 | 第95-96页 |
2.2.1.1 仪器 | 第95页 |
2.2.1.2 试剂 | 第95-96页 |
2.2.2 DANPBO-H的合成 | 第96-101页 |
2.2.2.1 4,5-二氢苯并[g]吲哚的合成 | 第96-97页 |
2.2.2.2 4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二硝基)-二氟化硼二苯并[g]吲哚甲烷(DNNPBO-H)的合成 | 第97-99页 |
2.2.2.3 4,5-二氢_8-笨基-(3, 4-二氨基)-二氟化棚二笨并[g]吲哚曱烷(DANPBO-H)的合成 | 第99-101页 |
2.2.3 DANPBO-M的合成 | 第101-107页 |
2.2.3.1 2-羟亚氨基乙酰乙酸乙酯的合成 | 第102-103页 |
2.2.3.2 2-乙氧羰基-3-甲基-4,5-二氧苯并[g]吲哚的合成 | 第103页 |
2.2.3.3 3-甲基-4,5-二氢苯并[g]吲哚的合成 | 第103页 |
2.2.3.4 4,5-二氢-3-甲基-8-苯基-(3,4-二硝基)-二氟化硼二苯并[g]吲哚甲烷(DNNPBO-M)的合成 | 第103-105页 |
2.2.3.5 3-甲基-4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二氨基)-二氟化硼二苯并[g]吲哚甲烷(DANPBO-M)的合成 | 第105-107页 |
2.2.4 荧光探针及其衍生产物溶液的制备 | 第107-108页 |
2.2.5 荧光光谱的测定 | 第108页 |
2.2.6 荧光量子产率的测定 | 第108页 |
2.2.7 荧光稳定性的测定 | 第108页 |
2.2.8 探针及其衍生产物细胞保留能力的考察 | 第108-109页 |
2.3 结果与讨论 | 第109-117页 |
2.3.1 探针设计思路 | 第109-110页 |
2.3.2 DANPBOs及其NO衍生产物的光谱性质 | 第110-111页 |
2.3.3 DANPBOs及其NO衍生产物的稳定性 | 第111-113页 |
2.3.4 不同有机溶剂对衍生产物荧光性质的影响 | 第113-115页 |
2.3.5 溶液pH值对衍生产物荧光性质影响 | 第115-116页 |
2.3.6 探针及其衍生产物细胞保留能力的初步考察 | 第116-117页 |
2.4 结论 | 第117页 |
2.5 参考文献 | 第117-121页 |
第三章 4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二氨基)-二氟化硼二苯并[g]吲哚甲烷柱前衍生高效液相色谱分离荧光检测动植物样品中的一氧化氮 | 第121-140页 |
3.1 引言 | 第121-122页 |
3.2 实验部分 | 第122-126页 |
3.2.1 仪器 | 第122-123页 |
3.2.2 试剂 | 第123页 |
3.2.3 生物材料 | 第123-124页 |
3.2.4 色谱分离 | 第124-125页 |
3.2.5 衍生过程 | 第125页 |
3.2.6 DANPBO-H与干扰物的反应 | 第125页 |
3.2.7 样品处理 | 第125-126页 |
3.2.7.1 标准加入组 | 第125-126页 |
3.2.7.2 样品组 | 第126页 |
3.2.7.3 空白组 | 第126页 |
3.3 结果与讨论 | 第126-136页 |
3.3.1 色谱分离条件优化 | 第126-127页 |
3.3.2 衍生条件优化 | 第127-131页 |
3.3.2.1 缓冲溶液的影响 | 第127-128页 |
3.3.2.2 衍生温度和衍生时间的影响 | 第128-130页 |
3.3.2.3 乙腈用量的影响 | 第130页 |
3.3.2.4 DANPBO-H浓度的影响 | 第130-131页 |
3.3.3 稳定性实验 | 第131页 |
3.3.4 共存物质的干扰 | 第131-132页 |
3.3.5 线性回归分析及检测限 | 第132页 |
3.3.6 生物背景干扰研究 | 第132-134页 |
3.3.7 分析应用 | 第134-136页 |
3.4 结论 | 第136页 |
3.5 参考文献 | 第136-140页 |
第四章 新型近红外荧光探针用于活细胞中一氧化氮释放的实时成像研究 | 第140-159页 |
引言 | 第140-141页 |
第一部分:DANPBO-H对ECV-304和RAW 264.7细胞中NO的成像研究 | 第141-154页 |
1.1 实验部分 | 第141-145页 |
1.1.1 仪器 | 第141页 |
1.1.2 试剂 | 第141-142页 |
1.1.3 细胞 | 第142-143页 |
1.1.4 细胞毒性试验(MTT法) | 第143-144页 |
1.1.4.1 有机溶剂的细胞毒性试验 | 第143-144页 |
1.1.4.2 内酮细胞毒性试验 | 第144页 |
1.1.4.3 DANPBO-H细胞毒性试验 | 第144页 |
1.1.5 DANPBO-H对细胞中NO的成像 | 第144-145页 |
1.1.5.1 ECV-304细胞 | 第144页 |
1.1.5.2 RAW 264.7细胞 | 第144-145页 |
1.1.6 成像后细胞提取物的HPLC分析 | 第145页 |
1.2 结果与讨论 | 第145-154页 |
1.2.1 细胞毒性试验 | 第145-147页 |
1.2.1.1 有机溶剂的细胞毒性试验 | 第145-147页 |
1.2.1.2 DANPBO-H细胞毒性试验 | 第147页 |
1.2.2 DANPBO-H用于细胞中NO成像的可行性研究 | 第147-149页 |
1.2.3 RAW 264.7细胞内NO成像的条件优化 | 第149-152页 |
1.2.3.1 LPS用量 | 第149-150页 |
1.2.3.2 LPS刺激时间 | 第150-151页 |
1.2.3.3 DANPBO-H浓度 | 第151页 |
1.2.3.4 DANPBO-H孵育时间 | 第151-152页 |
1.2.4 RAW 264.7细胞释放NO的成像 | 第152-154页 |
第二部分:DANPBO-M对ECV-304细胞中NO的成像研究 | 第154-155页 |
2.1 实验部分 | 第154页 |
2.2 结果与讨论 | 第154-155页 |
2.2.1 DANPBO-M细胞毒性试验 | 第154页 |
2.2.2 DANPBO-M用于细胞中NO成像的可行性研究 | 第154-155页 |
结论 | 第155页 |
参考文献 | 第155-159页 |
第五章 新型近红外荧光探针用于小鼠肝脏组织成像的研究 | 第159-174页 |
5.1 引言 | 第159-160页 |
5.2 实验部分 | 第160-162页 |
5.2.1 仪器 | 第160页 |
5.2.2 试剂 | 第160-161页 |
5.2.3 实验动物 | 第161页 |
5.2.4 DANPBOs对小鼠离体肝脏中NO的成像 | 第161页 |
5.2.5 小鼠肝损伤模型的建立 | 第161页 |
5.2.6 小鼠肝脏中NO的成像 | 第161-162页 |
5.2.7 小鼠肝脏的冰冻切片 | 第162页 |
5.2.8 用于HPLC的小鼠肝脏样品的处理 | 第162页 |
5.3 结果与讨论 | 第162-168页 |
5.3.1 切片方法的选择 | 第162-163页 |
5.3.2 DANPBOs对小鼠离体肝脏中NO的成像 | 第163-164页 |
5.3.3 小鼠肝损伤模型的建立 | 第164-165页 |
5.3.4 小鼠肝损伤肝脏中NO成像的条件优化 | 第165-168页 |
5.3.4.1 D-氨基半乳糖与脂多糖诱导时间 | 第165-166页 |
5.3.4.2 DANPBO-H与活体小鼠肝脏内NO的反应时间 | 第166-167页 |
5.3.4.3 DANPBO-H的浓度 | 第167-168页 |
5.3.5 DANPBOs对肝损伤小鼠肝脏成像 | 第168页 |
5.4 结论 | 第168-169页 |
5.5 参考文献 | 第169-174页 |
第六章 4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二氨基)-二氟化硼二苯并[G]吲哚甲烷荧光成像法监测水稻根部一氧化氮的微量变化 | 第174-194页 |
6.1 引言 | 第174-175页 |
6.2 实验部分 | 第175-177页 |
6.2.1 仪器 | 第175页 |
6.2.2 试剂 | 第175-176页 |
6.2.3 生物材料 | 第176页 |
6.2.4 DANPBO-H对水稻根部NO成像过程 | 第176页 |
6.2.5 水稻样品处理 | 第176-177页 |
6.3 结果与讨论 | 第177-187页 |
6.3.1 水稻根中NO成像条件的优化 | 第177-179页 |
6.3.1.1 DANPBO-H用量 | 第177页 |
6.3.1.2 探针孵育时间 | 第177-178页 |
6.3.1.3 水稻根内源性NO的荧光成像 | 第178-179页 |
6.3.2 水稻根中NO的来源 | 第179-187页 |
6.3.2.1 一氧化氮合酶途径 | 第179-181页 |
6.3.2.2 硝酸还原酶和亚硝酸还原酶途径 | 第181-182页 |
6.3.2.3 盐处理的水稻根NO释放的变化 | 第182-184页 |
6.3.2.4 聚乙二醇-6000处理的水稻根NO释放的变化 | 第184-186页 |
6.3.2.5 温度对水稻根NO释放的影响 | 第186-187页 |
6.4 结论 | 第187-188页 |
6.5 参考文献 | 第188-194页 |
第七章 4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二氨基)-二氟化硼二苯并[G]吲哚甲烷用于研究植物激素对水稻根产生一氧化氮的影响 | 第194-214页 |
7.1 引言 | 第194-195页 |
7.2 实验部分 | 第195-197页 |
7.2.1 仪器 | 第195页 |
7.2.2 试剂 | 第195-196页 |
7.2.3 生物材料 | 第196页 |
7.2.4 样品处理 | 第196-197页 |
7.2.5 DANPBO-H对水稻根部NO成像 | 第197页 |
7.3 结果与讨论 | 第197-206页 |
7.3.1 生长素对水稻根产生NO的影响 | 第197-201页 |
7.3.2 赤霉素对水稻根产生NO的影响 | 第201-203页 |
7.3.3 水杨酸对水稻根产生NO的影响 | 第203-205页 |
7.3.4 脱落酸对水稻根产生NO的影响 | 第205-206页 |
7.4 结论 | 第206页 |
7.5 参考文献 | 第206-214页 |
第八章 4-,5-二氧-8-苯基(3,4-二氧基)-二氟化棚二苯并[g]吲哚甲院用于焚光光度法测定植物组织中的一氧化氮 | 第214-227页 |
8.1 引言 | 第214-215页 |
8.2 实验部分 | 第215-216页 |
8.2.1 仪器 | 第215页 |
8.2.2 试剂 | 第215-216页 |
8.2.3 衍生步骤 | 第216页 |
8.2.4 样品处理 | 第216页 |
8.3 结果与讨论 | 第216-222页 |
8.3.1 衍生条件 | 第216-219页 |
8.3.1.1 反应介质的影响 | 第216-218页 |
8.3.1.2 反应时间和温度的影响 | 第218页 |
8.3.1.3 探针浓度的影响 | 第218-219页 |
8.3.2 体系稳定性 | 第219页 |
8.3.3 共存物质干扰 | 第219-220页 |
8.3.4 工作曲线、检测限和精密度 | 第220-221页 |
8.3.5 样品分析 | 第221-222页 |
8.4 结论 | 第222页 |
8.5 参考文献 | 第222-227页 |
附录 | 第227-229页 |
致谢 | 第229页 |