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基于NIR BODIPY的低背景、高灵敏荧光检测NO新方法及其应用研究

摘要第12-15页
Abstract第15-18页
第一章 绪论第19-94页
    1.1 引言第19-21页
    1.2 自由基荧光探针第21-57页
        1.2.1 单线态氧荧光探针第21-25页
        1.2.2 羟基自由基荧光探针第25-29页
        1.2.3 超氧阴离子荧光探针第29-34页
        1.2.4 过氧化氢荧光探针第34-39页
        1.2.5 过氧亚硝酸根荧光探针第39-43页
        1.2.6 一氧化氮荧光探针第43-57页
            1.2.6.1 金属配合物类荧光探针第43-46页
            1.2.6.2 邻苯二胺类荧光探针第46-55页
            1.2.6.3 其他类荧光探针第55-57页
    1.3 本论文选题思想第57-58页
    1.4 参考文献第58-94页
第二章 新型近红外一氧化氮荧光探针的合成、表征和荧光性质研究第94-121页
    2.1 引言第94-95页
    2.2 实验部分第95-109页
        2.2.1 仪器与试剂第95-96页
            2.2.1.1 仪器第95页
            2.2.1.2 试剂第95-96页
        2.2.2 DANPBO-H的合成第96-101页
            2.2.2.1 4,5-二氢苯并[g]吲哚的合成第96-97页
            2.2.2.2 4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二硝基)-二氟化硼二苯并[g]吲哚甲烷(DNNPBO-H)的合成第97-99页
            2.2.2.3 4,5-二氢_8-笨基-(3, 4-二氨基)-二氟化棚二笨并[g]吲哚曱烷(DANPBO-H)的合成第99-101页
        2.2.3 DANPBO-M的合成第101-107页
            2.2.3.1 2-羟亚氨基乙酰乙酸乙酯的合成第102-103页
            2.2.3.2 2-乙氧羰基-3-甲基-4,5-二氧苯并[g]吲哚的合成第103页
            2.2.3.3 3-甲基-4,5-二氢苯并[g]吲哚的合成第103页
            2.2.3.4 4,5-二氢-3-甲基-8-苯基-(3,4-二硝基)-二氟化硼二苯并[g]吲哚甲烷(DNNPBO-M)的合成第103-105页
            2.2.3.5 3-甲基-4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二氨基)-二氟化硼二苯并[g]吲哚甲烷(DANPBO-M)的合成第105-107页
        2.2.4 荧光探针及其衍生产物溶液的制备第107-108页
        2.2.5 荧光光谱的测定第108页
        2.2.6 荧光量子产率的测定第108页
        2.2.7 荧光稳定性的测定第108页
        2.2.8 探针及其衍生产物细胞保留能力的考察第108-109页
    2.3 结果与讨论第109-117页
        2.3.1 探针设计思路第109-110页
        2.3.2 DANPBOs及其NO衍生产物的光谱性质第110-111页
        2.3.3 DANPBOs及其NO衍生产物的稳定性第111-113页
        2.3.4 不同有机溶剂对衍生产物荧光性质的影响第113-115页
        2.3.5 溶液pH值对衍生产物荧光性质影响第115-116页
        2.3.6 探针及其衍生产物细胞保留能力的初步考察第116-117页
    2.4 结论第117页
    2.5 参考文献第117-121页
第三章 4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二氨基)-二氟化硼二苯并[g]吲哚甲烷柱前衍生高效液相色谱分离荧光检测动植物样品中的一氧化氮第121-140页
    3.1 引言第121-122页
    3.2 实验部分第122-126页
        3.2.1 仪器第122-123页
        3.2.2 试剂第123页
        3.2.3 生物材料第123-124页
        3.2.4 色谱分离第124-125页
        3.2.5 衍生过程第125页
        3.2.6 DANPBO-H与干扰物的反应第125页
        3.2.7 样品处理第125-126页
            3.2.7.1 标准加入组第125-126页
            3.2.7.2 样品组第126页
            3.2.7.3 空白组第126页
    3.3 结果与讨论第126-136页
        3.3.1 色谱分离条件优化第126-127页
        3.3.2 衍生条件优化第127-131页
            3.3.2.1 缓冲溶液的影响第127-128页
            3.3.2.2 衍生温度和衍生时间的影响第128-130页
            3.3.2.3 乙腈用量的影响第130页
            3.3.2.4 DANPBO-H浓度的影响第130-131页
        3.3.3 稳定性实验第131页
        3.3.4 共存物质的干扰第131-132页
        3.3.5 线性回归分析及检测限第132页
        3.3.6 生物背景干扰研究第132-134页
        3.3.7 分析应用第134-136页
    3.4 结论第136页
    3.5 参考文献第136-140页
第四章 新型近红外荧光探针用于活细胞中一氧化氮释放的实时成像研究第140-159页
    引言第140-141页
    第一部分:DANPBO-H对ECV-304和RAW 264.7细胞中NO的成像研究第141-154页
        1.1 实验部分第141-145页
            1.1.1 仪器第141页
            1.1.2 试剂第141-142页
            1.1.3 细胞第142-143页
            1.1.4 细胞毒性试验(MTT法)第143-144页
                1.1.4.1 有机溶剂的细胞毒性试验第143-144页
                1.1.4.2 内酮细胞毒性试验第144页
                1.1.4.3 DANPBO-H细胞毒性试验第144页
            1.1.5 DANPBO-H对细胞中NO的成像第144-145页
                1.1.5.1 ECV-304细胞第144页
                1.1.5.2 RAW 264.7细胞第144-145页
            1.1.6 成像后细胞提取物的HPLC分析第145页
        1.2 结果与讨论第145-154页
            1.2.1 细胞毒性试验第145-147页
                1.2.1.1 有机溶剂的细胞毒性试验第145-147页
                1.2.1.2 DANPBO-H细胞毒性试验第147页
            1.2.2 DANPBO-H用于细胞中NO成像的可行性研究第147-149页
            1.2.3 RAW 264.7细胞内NO成像的条件优化第149-152页
                1.2.3.1 LPS用量第149-150页
                1.2.3.2 LPS刺激时间第150-151页
                1.2.3.3 DANPBO-H浓度第151页
                1.2.3.4 DANPBO-H孵育时间第151-152页
            1.2.4 RAW 264.7细胞释放NO的成像第152-154页
    第二部分:DANPBO-M对ECV-304细胞中NO的成像研究第154-155页
        2.1 实验部分第154页
        2.2 结果与讨论第154-155页
            2.2.1 DANPBO-M细胞毒性试验第154页
            2.2.2 DANPBO-M用于细胞中NO成像的可行性研究第154-155页
    结论第155页
    参考文献第155-159页
第五章 新型近红外荧光探针用于小鼠肝脏组织成像的研究第159-174页
    5.1 引言第159-160页
    5.2 实验部分第160-162页
        5.2.1 仪器第160页
        5.2.2 试剂第160-161页
        5.2.3 实验动物第161页
        5.2.4 DANPBOs对小鼠离体肝脏中NO的成像第161页
        5.2.5 小鼠肝损伤模型的建立第161页
        5.2.6 小鼠肝脏中NO的成像第161-162页
        5.2.7 小鼠肝脏的冰冻切片第162页
        5.2.8 用于HPLC的小鼠肝脏样品的处理第162页
    5.3 结果与讨论第162-168页
        5.3.1 切片方法的选择第162-163页
        5.3.2 DANPBOs对小鼠离体肝脏中NO的成像第163-164页
        5.3.3 小鼠肝损伤模型的建立第164-165页
        5.3.4 小鼠肝损伤肝脏中NO成像的条件优化第165-168页
            5.3.4.1 D-氨基半乳糖与脂多糖诱导时间第165-166页
            5.3.4.2 DANPBO-H与活体小鼠肝脏内NO的反应时间第166-167页
            5.3.4.3 DANPBO-H的浓度第167-168页
        5.3.5 DANPBOs对肝损伤小鼠肝脏成像第168页
    5.4 结论第168-169页
    5.5 参考文献第169-174页
第六章 4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二氨基)-二氟化硼二苯并[G]吲哚甲烷荧光成像法监测水稻根部一氧化氮的微量变化第174-194页
    6.1 引言第174-175页
    6.2 实验部分第175-177页
        6.2.1 仪器第175页
        6.2.2 试剂第175-176页
        6.2.3 生物材料第176页
        6.2.4 DANPBO-H对水稻根部NO成像过程第176页
        6.2.5 水稻样品处理第176-177页
    6.3 结果与讨论第177-187页
        6.3.1 水稻根中NO成像条件的优化第177-179页
            6.3.1.1 DANPBO-H用量第177页
            6.3.1.2 探针孵育时间第177-178页
            6.3.1.3 水稻根内源性NO的荧光成像第178-179页
        6.3.2 水稻根中NO的来源第179-187页
            6.3.2.1 一氧化氮合酶途径第179-181页
            6.3.2.2 硝酸还原酶和亚硝酸还原酶途径第181-182页
            6.3.2.3 盐处理的水稻根NO释放的变化第182-184页
            6.3.2.4 聚乙二醇-6000处理的水稻根NO释放的变化第184-186页
            6.3.2.5 温度对水稻根NO释放的影响第186-187页
    6.4 结论第187-188页
    6.5 参考文献第188-194页
第七章 4,5-二氢-8-苯基-(3,4-二氨基)-二氟化硼二苯并[G]吲哚甲烷用于研究植物激素对水稻根产生一氧化氮的影响第194-214页
    7.1 引言第194-195页
    7.2 实验部分第195-197页
        7.2.1 仪器第195页
        7.2.2 试剂第195-196页
        7.2.3 生物材料第196页
        7.2.4 样品处理第196-197页
        7.2.5 DANPBO-H对水稻根部NO成像第197页
    7.3 结果与讨论第197-206页
        7.3.1 生长素对水稻根产生NO的影响第197-201页
        7.3.2 赤霉素对水稻根产生NO的影响第201-203页
        7.3.3 水杨酸对水稻根产生NO的影响第203-205页
        7.3.4 脱落酸对水稻根产生NO的影响第205-206页
    7.4 结论第206页
    7.5 参考文献第206-214页
第八章 4-,5-二氧-8-苯基(3,4-二氧基)-二氟化棚二苯并[g]吲哚甲院用于焚光光度法测定植物组织中的一氧化氮第214-227页
    8.1 引言第214-215页
    8.2 实验部分第215-216页
        8.2.1 仪器第215页
        8.2.2 试剂第215-216页
        8.2.3 衍生步骤第216页
        8.2.4 样品处理第216页
    8.3 结果与讨论第216-222页
        8.3.1 衍生条件第216-219页
            8.3.1.1 反应介质的影响第216-218页
            8.3.1.2 反应时间和温度的影响第218页
            8.3.1.3 探针浓度的影响第218-219页
        8.3.2 体系稳定性第219页
        8.3.3 共存物质干扰第219-220页
        8.3.4 工作曲线、检测限和精密度第220-221页
        8.3.5 样品分析第221-222页
    8.4 结论第222页
    8.5 参考文献第222-227页
附录第227-229页
致谢第229页

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