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HLA-B27非经典同源二聚体的表达、纯化与晶体生长

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
1 绪论第9-24页
    1.1 强直性脊柱炎概述第9-10页
    1.2 HLA-B27概述第10-18页
        1.2.1 HLA的简述第10页
        1.2.2 HLA的种类第10-12页
        1.2.3 HLA的功能第12-13页
        1.2.4 HLA的分子结构第13-16页
        1.2.5 HLA-B27第16-18页
    1.3 HLA-B27与强直性脊柱炎的联系第18-19页
    1.4 晶体学介绍第19-23页
        1.4.1 X射线晶体学发展概述第19-20页
        1.4.2 蛋白质结构解析第20页
        1.4.3 蛋白晶体的生长和影响因素第20-23页
    1.5 研究的目的与意义第23-24页
2 材料与方法第24-46页
    2.1 实验材料第24-28页
        2.1.1 主要试剂第24-25页
        2.1.2 主要实验仪器第25-26页
        2.1.3 主要溶液的配方第26-27页
        2.1.4 菌株与载体质粒第27-28页
    2.2 试验方法第28-46页
        2.2.1 生物信息学分析方法第28页
        2.2.2 载体的构建第28-35页
        2.2.3 蛋白小量表达与检测第35-38页
        2.2.4 蛋白扩大表达和包涵体提取第38-39页
        2.2.5 包涵体复性第39-43页
        2.2.6 复性溶液透析第43页
        2.2.7 蛋白的纯化第43-45页
        2.2.8 晶体筛选第45-46页
3 实验结果与分析第46-56页
    3.1 HLA-B27的生物信息学分析第46-48页
        3.1.1 HLA-B27跨膜结构分析第46页
        3.1.2 二级结构分析第46-47页
        3.1.3 蛋白的基本信息预测第47-48页
    3.2 密码子优化第48页
    3.3 pET-30a-B27重组质粒菌落PCR结果第48-49页
    3.4 pET-30a-B27重组质粒测序结果比对第49-50页
    3.5 HLA-B27重链小量表达检测第50-51页
        3.5.1 SDS-PAGE检测第50页
        3.5.2 HLA-B27重链小量表达的western-blot检测第50-51页
    3.6 HLA-B27重链包涵体提取检测第51-52页
    3.7 复性条件筛选结果第52页
    3.8 阴离子交换层析第52-53页
    3.9 凝胶过滤层析第53-54页
    3.10 结晶条件初筛第54-56页
4 讨论第56-59页
    4.1 研究总结第56页
    4.2 多肽对B27_2复性的影响第56页
    4.3 晶体生长存在的问题第56-57页
    4.4 B27_2可能存在的识别机制第57-58页
    4.5 展望第58-59页
参考文献第59-64页
致谢第64页

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