| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 绪论 | 第9-24页 |
| 1.1 强直性脊柱炎概述 | 第9-10页 |
| 1.2 HLA-B27概述 | 第10-18页 |
| 1.2.1 HLA的简述 | 第10页 |
| 1.2.2 HLA的种类 | 第10-12页 |
| 1.2.3 HLA的功能 | 第12-13页 |
| 1.2.4 HLA的分子结构 | 第13-16页 |
| 1.2.5 HLA-B27 | 第16-18页 |
| 1.3 HLA-B27与强直性脊柱炎的联系 | 第18-19页 |
| 1.4 晶体学介绍 | 第19-23页 |
| 1.4.1 X射线晶体学发展概述 | 第19-20页 |
| 1.4.2 蛋白质结构解析 | 第20页 |
| 1.4.3 蛋白晶体的生长和影响因素 | 第20-23页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-28页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.3 主要溶液的配方 | 第26-27页 |
| 2.1.4 菌株与载体质粒 | 第27-28页 |
| 2.2 试验方法 | 第28-46页 |
| 2.2.1 生物信息学分析方法 | 第28页 |
| 2.2.2 载体的构建 | 第28-35页 |
| 2.2.3 蛋白小量表达与检测 | 第35-38页 |
| 2.2.4 蛋白扩大表达和包涵体提取 | 第38-39页 |
| 2.2.5 包涵体复性 | 第39-43页 |
| 2.2.6 复性溶液透析 | 第43页 |
| 2.2.7 蛋白的纯化 | 第43-45页 |
| 2.2.8 晶体筛选 | 第45-46页 |
| 3 实验结果与分析 | 第46-56页 |
| 3.1 HLA-B27的生物信息学分析 | 第46-48页 |
| 3.1.1 HLA-B27跨膜结构分析 | 第46页 |
| 3.1.2 二级结构分析 | 第46-47页 |
| 3.1.3 蛋白的基本信息预测 | 第47-48页 |
| 3.2 密码子优化 | 第48页 |
| 3.3 pET-30a-B27重组质粒菌落PCR结果 | 第48-49页 |
| 3.4 pET-30a-B27重组质粒测序结果比对 | 第49-50页 |
| 3.5 HLA-B27重链小量表达检测 | 第50-51页 |
| 3.5.1 SDS-PAGE检测 | 第50页 |
| 3.5.2 HLA-B27重链小量表达的western-blot检测 | 第50-51页 |
| 3.6 HLA-B27重链包涵体提取检测 | 第51-52页 |
| 3.7 复性条件筛选结果 | 第52页 |
| 3.8 阴离子交换层析 | 第52-53页 |
| 3.9 凝胶过滤层析 | 第53-54页 |
| 3.10 结晶条件初筛 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 研究总结 | 第56页 |
| 4.2 多肽对B27_2复性的影响 | 第56页 |
| 4.3 晶体生长存在的问题 | 第56-57页 |
| 4.4 B27_2可能存在的识别机制 | 第57-58页 |
| 4.5 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
