摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
缩写表(Abbreviations) | 第13-15页 |
第一章 前言 | 第15-18页 |
第二章 蝮蛇毒PCA的分离纯化及初步生物学特性鉴定 | 第18-25页 |
材料与方法 | 第18-22页 |
1 实验材料 | 第18-19页 |
1.1 实验标本 | 第18页 |
1.2 主要实验药品及试剂 | 第18-19页 |
1.3 实验仪器 | 第19页 |
2 实验方法 | 第19-22页 |
2.1 AKTAprime蛋白质纯化系统分离纯化 | 第19-20页 |
2.2 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳 | 第20-21页 |
2.3 发色底物法(Chromogenic Substrate Assay) | 第21-22页 |
2.4 血小板聚集率的测定 | 第22页 |
结果 | 第22-23页 |
1.1 蝮蛇毒PCA的分离纯化 | 第22-23页 |
1.2 AHV-PCA经SDS-PAGE电泳结果 | 第23页 |
1.3 AHV-PCA经LC-MS鉴定结果 | 第23页 |
讨论 | 第23-25页 |
第三章 蝮蛇毒PCA对H_2O_2诱导的内皮细胞损伤保护效应及可能机制 | 第25-44页 |
材料与方法 | 第26-35页 |
1 实验材料 | 第26-27页 |
1.1 人脐静脉内皮细胞 | 第26页 |
1.2 主要实验药品及试剂 | 第26-27页 |
1.3 实验仪器 | 第27页 |
2 实验方法 | 第27-34页 |
2.1 人脐静脉内皮细胞体外培养 | 第29页 |
2.2 实验设计与分组 | 第29页 |
2.3 CCK-8法测定细胞增殖活力 | 第29-30页 |
2.4 AnnexinⅤ-FITC/PI检测细胞凋亡 | 第30页 |
2.5 流式检测细胞内ROS | 第30页 |
2.6 IL-1和NO水平检测 | 第30-31页 |
2.7 Rea-l time PCR检测P38-MAPK和eNOSmRNA的表达 | 第31-33页 |
2.8 蛋白免疫印迹检测P38-MAPK及eNOS蛋白表达 | 第33-34页 |
3 统计学处理 | 第34-35页 |
结果 | 第35-41页 |
1 PCA对血管内皮细胞形态的影响 | 第35页 |
2 CCK-8药物敏感性实验 | 第35-36页 |
3 流式细胞仪检测内皮细胞凋亡 | 第36-38页 |
4 PCA对H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞ROS水平的影响 | 第38-39页 |
5 PCA对H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞IL-1表达的影响 | 第39页 |
6 PCA对H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞p38-MAPK、eNOS表达和NO水平的影响 | 第39-41页 |
讨论 | 第41-44页 |
第四章 蝮蛇毒PCA对糖尿病大鼠心肌纤维化的抑制效应及可能机制 | 第44-59页 |
材料与方法 | 第46-53页 |
1 实验材料 | 第46-47页 |
1.1 实验动物 | 第46页 |
1.2 主要实验药品及试剂 | 第46页 |
1.3 实验仪器 | 第46-47页 |
2 实验方法 | 第47-53页 |
2.1 糖尿病大鼠模型制备与分组 | 第47页 |
2.2 样品采集 | 第47-48页 |
2.3 心肌标本处理 | 第48页 |
2.4 病理形态学观察 | 第48-49页 |
2.5 酶联免疫(ELISA)法TGF-β1及IL-1β的含量 | 第49-50页 |
2.6 实时定量(Q-PCR)检测MMP-2和TIMP-2mRNA表达 | 第50-52页 |
2.7 Western blotting检测MMP-2和TIMP-2蛋白表达水平 | 第52-53页 |
3 统计学处理 | 第53页 |
结果 | 第53-56页 |
1 各组大鼠空腹血糖(FBG)、体重、左心室重量指数的改变 | 第53页 |
2 各组大鼠TGF-β1、IL-1β含量变化 | 第53-54页 |
3 各组大鼠心肌形态病理学改变 | 第54-55页 |
4 PCA对大鼠心肌组织胶原纤维的影响 | 第55页 |
5 PCA对大鼠心肌MMP-2、TIMP-2 mRNA、蛋白的影响 | 第55-56页 |
讨论 | 第56-59页 |
第五章 全文总结 | 第59-61页 |
主要研究结论 | 第59页 |
本研究的主要创新点 | 第59-60页 |
研究展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
第六章 综述 蛇毒有效成分的药理研究进展及其临床应用 | 第68-77页 |
1 蛇毒成分的构成 | 第68-71页 |
1.1 蛇毒酶 | 第69页 |
1.2 生长因子 | 第69-70页 |
1.3 神经毒性多肽 | 第70页 |
1.4 膜活性多肽 | 第70页 |
1.5 蛇毒去整合蛋白 | 第70-71页 |
2 蛇毒的临床应用研究 | 第71-72页 |
2.1 防治心血管疾病治疗(抗凝、止血、降压) | 第71页 |
2.2 抗炎、镇痛,免疫调节 | 第71-72页 |
2.3 抗肿瘤治疗 | 第72页 |
3 蛇毒的开发前景 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
附:博士在读期间发表论文及获奖情况 | 第78页 |