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甘草愈伤组织遗传转化体系建立与盐胁迫差减cDNA文库构建

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第1章 文献综述第10-18页
    1.1 甘草的基本特征第10页
    1.2 甘草次生代谢产物的生物合成途径第10-11页
        1.2.1 甘草三萜类化合物的合成途径第11页
        1.2.2 甘草黄酮类化合物的合成途径第11页
    1.3 甘草愈伤组织的研究进展第11-16页
        1.3.1 植物次生代谢产物细胞工程研究进展第12页
        1.3.2 甘草愈伤组织生产次生代谢产物研究进展第12-14页
        1.3.3 甘草愈伤组织的诱导及毛状根培养第14-16页
    1.4 植物抑制性消减 PCR 的研究进展第16-17页
    1.5 本研究的目的和意义第17-18页
第2章 材料与方法第18-25页
    2.1 试验材料第18-20页
        2.1.1 植物材料第18页
        2.1.2 宿主菌株及质粒载体第18页
        2.1.3 实验药品第18-19页
        2.1.4 培养基第19页
        2.1.5 溶液及缓冲液第19-20页
        2.1.6 主要仪器设备第20页
    2.2 实验方法第20-25页
        2.2.1 甘草愈伤组织的继代培养第20-21页
        2.2.2 农杆菌介导的甘草愈伤组织遗传转化第21-23页
        2.2.3 盐胁迫甘草愈伤组织 cDNA 差减文库的构建第23-25页
第3章 结果与分析第25-34页
    3.1 农杆菌介导的胀果甘草愈伤组织遗传转化第25-29页
        3.1.1 抗生素敏感性试验第25-26页
        3.1.2 根癌农杆菌介导绿色荧光蛋白基因导入甘草愈伤组织第26-27页
        3.1.3 不同因素对甘草愈伤组织遗传转化效率的影响第27-29页
    3.2 盐胁迫甘草愈伤组织差减文库的构建第29-34页
        3.2.1 总 RNA 的提取第29-30页
        3.2.2 总 RNA 中 mRNA 的纯化第30页
        3.2.3 SSH 法富集差异序列第30-31页
        3.2.4 差减文库质量检测第31-32页
        3.2.5 部分克隆的 EST 序列分析第32-34页
第4章 讨论第34-37页
    4.1 不同浓度 Kan 对胀果甘草愈伤组织生长的影响第34页
    4.2 农杆菌转化对甘草愈伤组织的影响第34-35页
    4.3 抑制性差减杂交分离差异表达基因的有效性第35页
    4.4 mRNA 质量对差减文库构建的影响第35-37页
第5章 结论第37-38页
参考文献第38-43页
致谢第43页

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