摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 甘草的基本特征 | 第10页 |
1.2 甘草次生代谢产物的生物合成途径 | 第10-11页 |
1.2.1 甘草三萜类化合物的合成途径 | 第11页 |
1.2.2 甘草黄酮类化合物的合成途径 | 第11页 |
1.3 甘草愈伤组织的研究进展 | 第11-16页 |
1.3.1 植物次生代谢产物细胞工程研究进展 | 第12页 |
1.3.2 甘草愈伤组织生产次生代谢产物研究进展 | 第12-14页 |
1.3.3 甘草愈伤组织的诱导及毛状根培养 | 第14-16页 |
1.4 植物抑制性消减 PCR 的研究进展 | 第16-17页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
第2章 材料与方法 | 第18-25页 |
2.1 试验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 宿主菌株及质粒载体 | 第18页 |
2.1.3 实验药品 | 第18-19页 |
2.1.4 培养基 | 第19页 |
2.1.5 溶液及缓冲液 | 第19-20页 |
2.1.6 主要仪器设备 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-25页 |
2.2.1 甘草愈伤组织的继代培养 | 第20-21页 |
2.2.2 农杆菌介导的甘草愈伤组织遗传转化 | 第21-23页 |
2.2.3 盐胁迫甘草愈伤组织 cDNA 差减文库的构建 | 第23-25页 |
第3章 结果与分析 | 第25-34页 |
3.1 农杆菌介导的胀果甘草愈伤组织遗传转化 | 第25-29页 |
3.1.1 抗生素敏感性试验 | 第25-26页 |
3.1.2 根癌农杆菌介导绿色荧光蛋白基因导入甘草愈伤组织 | 第26-27页 |
3.1.3 不同因素对甘草愈伤组织遗传转化效率的影响 | 第27-29页 |
3.2 盐胁迫甘草愈伤组织差减文库的构建 | 第29-34页 |
3.2.1 总 RNA 的提取 | 第29-30页 |
3.2.2 总 RNA 中 mRNA 的纯化 | 第30页 |
3.2.3 SSH 法富集差异序列 | 第30-31页 |
3.2.4 差减文库质量检测 | 第31-32页 |
3.2.5 部分克隆的 EST 序列分析 | 第32-34页 |
第4章 讨论 | 第34-37页 |
4.1 不同浓度 Kan 对胀果甘草愈伤组织生长的影响 | 第34页 |
4.2 农杆菌转化对甘草愈伤组织的影响 | 第34-35页 |
4.3 抑制性差减杂交分离差异表达基因的有效性 | 第35页 |
4.4 mRNA 质量对差减文库构建的影响 | 第35-37页 |
第5章 结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
致谢 | 第43页 |