中文摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第1章 绪论 | 第15-29页 |
1.1 背景知识 | 第15-25页 |
1.1.1 细胞凋亡的定义 | 第15-16页 |
1.1.2 细胞凋亡途径 | 第16-20页 |
1.1.3 Caspase家族 | 第20-21页 |
1.1.4 PARP | 第21-22页 |
1.1.5 细胞色素C(Cytochrome c) | 第22页 |
1.1.6 Smac与IAPs | 第22-23页 |
1.1.7 Bcl-2家族 | 第23-25页 |
1.2 肿瘤治疗与细胞凋亡 | 第25-26页 |
1.3 桦木醇的研究进展 | 第26页 |
1.4 本论文的设计思路 | 第26-29页 |
第2章 材料与方法 | 第29-37页 |
2.1 材料、仪器和溶液 | 第29-31页 |
2.1.1 细胞株 | 第29页 |
2.1.2 主要试剂 | 第29页 |
2.1.3 试剂盒 | 第29-30页 |
2.1.4 抗体 | 第30页 |
2.1.5 仪器 | 第30页 |
2.1.6 溶液 | 第30-31页 |
2.2 试验方法 | 第31-37页 |
2.2.1 药物溶解与储存 | 第31页 |
2.2.2 细胞培养 | 第31页 |
2.2.3 MTT测定 | 第31页 |
2.2.4 细胞的形态学观察 | 第31-32页 |
2.2.5 免疫印迹分析 | 第32页 |
2.2.6 Annexin V检测 | 第32-33页 |
2.2.7 细胞凋亡小体的检测 | 第33页 |
2.2.8 Caspase-3活性检测 | 第33页 |
2.2.9 线粒体和胞浆蛋白质提取物的制备 | 第33-34页 |
2.2.10 线粒体膜电位去极化的测定 | 第34页 |
2.2.11 RNA干扰 | 第34-37页 |
第3章 结果与讨论 | 第37-53页 |
3.1 结果 | 第37-49页 |
3.1.1 桦木醇对多种肿瘤细胞具有细胞毒性作用 | 第37-38页 |
3.1.2 桦木醇诱导HeLa细胞凋亡 | 第38-40页 |
3.1.3 桦木醇诱导HeLa细胞凋亡过程中Caspase-9,-3被激活 | 第40-42页 |
3.1.4 桦木醇诱导HeLa细胞凋亡是线粒体cytochrome c和Smac的释放介导的 | 第42-43页 |
3.1.5 桦木醇诱导HeLa细胞凋亡过程中Bax、Bak转位到线粒体 | 第43-47页 |
3.1.6 SK-HEP-1细胞中Caspase-9的低表达可能是导致SK-HEP-1细胞对桦木醇耐受的主要原因 | 第47-49页 |
3.2 讨论 | 第49-52页 |
3.3 结论 | 第52-53页 |
第4章 Caspase-9在桦木醇诱导人源肝癌细胞HepG2凋亡中的重要作用 | 第53-65页 |
4.1 引言 | 第53页 |
4.2 材料与方法 | 第53-57页 |
4.2.1 细胞 | 第53页 |
4.2.2 主要试剂 | 第53页 |
4.2.3 细胞培养 | 第53-54页 |
4.2.4 细胞形态学观察 | 第54页 |
4.2.5 细胞凋亡的检测 | 第54页 |
4.2.6 全细胞裂解液的制备及蛋白浓度的测定 | 第54页 |
4.2.7 Caspase-3活性的检测 | 第54页 |
4.2.8 线粒体膜电位去极化的测定 | 第54-55页 |
4.2.9 PARP断裂和Caspase-9激活情况的检测 | 第55页 |
4.2.10 线粒体和胞浆蛋白质提取物的制备 | 第55-56页 |
4.2.11 RNA干扰 | 第56-57页 |
4.3 结果 | 第57-63页 |
4.3.1 桦木醇对人源肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用 | 第57页 |
4.3.2 桦木醇对人源肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用是通过其触发细胞凋亡来实现的 | 第57-59页 |
4.3.3 桦木醇诱导HepG2细胞凋亡过程中Caspase-9被激活以及PARP断裂 | 第59-60页 |
4.3.4 桦木醇诱导HepG2细胞凋亡是通过线粒体膜电位去极化和线粒体cytochrome c释放介导的 | 第60-63页 |
4.4 讨论 | 第63页 |
4.5 本章结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-75页 |
作者简历 | 第75-77页 |
博士阶段发表的论文 | 第77-79页 |
致谢 | 第79-80页 |