| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒及其疫苗的研究进展 | 第13-41页 |
| 1 PRRSV基因组结构及编码的蛋白 | 第14-18页 |
| 1.1 病毒基因组结构 | 第14页 |
| 1.2 病毒蛋白 | 第14-18页 |
| 2 PRRSV疫苗的研究进展 | 第18-31页 |
| 2.1 PRRSV的免疫特性 | 第18-20页 |
| 2.2 现有商品化疫苗的免疫效果 | 第20-21页 |
| 2.3 新型疫苗的研究 | 第21-27页 |
| 2.4 减毒沙门氏菌作为DNA疫苗载体的研究进展 | 第27-31页 |
| 参考文献 | 第31-41页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因修饰及其真核表达质粒的构建与鉴定 | 第41-61页 |
| 1 材料 | 第42页 |
| 1.1 质粒、菌株与细胞 | 第42页 |
| 1.2 试剂 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-52页 |
| 2.1 PRRSV SY0608 ORF5基因修饰设计思路 | 第42-43页 |
| 2.2 PRRSV SY0608天然GP5基因的扩增 | 第43-44页 |
| 2.3 修饰的ORF5基因的获得 | 第44-45页 |
| 2.4 重叠PCR扩增SynGP5/GP4-3 | 第45-46页 |
| 2.5 目的基因的回收与纯化 | 第46页 |
| 2.6 重组真核质粒 | 第46-49页 |
| 2.7 重组质粒的真核表达鉴定 | 第49-52页 |
| 3 结果 | 第52-55页 |
| 3.1 GP5、SynGP5、SynGP5/GP4-5、SynGP5/N-7基因的获得 | 第52-53页 |
| 3.2 SynGP5/GP4-3基因的扩增 | 第53页 |
| 3.3 重组真核质粒的构建与鉴定 | 第53-54页 |
| 3.4 Western blot鉴定蛋白的表达 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 第三章 表达修饰的GP5蛋白的真核质粒DNA小鼠免疫特性研究 | 第61-73页 |
| 1 材料 | 第62页 |
| 1.1 质粒、病毒、菌株与细胞 | 第62页 |
| 1.2 主要试剂 | 第62页 |
| 2 方法 | 第62-66页 |
| 2.1 质粒的制备 | 第62-63页 |
| 2.2 小鼠分组与免疫实验 | 第63页 |
| 2.3 ELISA抗体检测 | 第63-64页 |
| 2.4 病毒中和试验 | 第64-65页 |
| 2.5 淋巴细胞增殖试验 | 第65页 |
| 2.6 细胞因子测定 | 第65-66页 |
| 2.7 数据统计分析 | 第66页 |
| 3 结果 | 第66-68页 |
| 3.1 体液免疫应答 | 第66-67页 |
| 3.2 细胞免疫应答 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 第四章 表达修饰的GP5蛋白的真核质粒及其重组减毒沙门氏菌对仔猪的免疫特性研究 | 第73-89页 |
| 1 材料 | 第74-75页 |
| 1.1 质粒、菌株和病毒 | 第74-75页 |
| 1.2 试剂 | 第75页 |
| 1.3 实验动物 | 第75页 |
| 2 方法 | 第75-79页 |
| 2.1 重组减毒沙门氏菌的构建及鉴定 | 第75-76页 |
| 2.2 猪体免疫和攻毒保护试验 | 第76页 |
| 2.3 PRRSV特异性ELISA抗体检测 | 第76-77页 |
| 2.4 PRRSV中和试验——固定病毒稀释血清法 | 第77页 |
| 2.5 细胞因子的测定 | 第77页 |
| 2.6 Realtime-PCR检测血清中PRRSV RNA含量 | 第77-78页 |
| 2.7 体温变化及肺脏大体病变统计 | 第78页 |
| 2.8 肺脏组织病理学观察 | 第78-79页 |
| 2.9 数据统计分析 | 第79页 |
| 3 结果 | 第79-84页 |
| 3.1 重组减毒沙门氏菌的鉴定 | 第79-80页 |
| 3.2 PRRSV特异性的ELISA及中和抗体测定 | 第80页 |
| 3.3 细胞因子的检测 | 第80-81页 |
| 3.4 攻毒猪临床表现及体温变化 | 第81-82页 |
| 3.5 病毒血症检测 | 第82页 |
| 3.6 攻毒猪肺脏肉眼病变及组织病理学变化 | 第82-84页 |
| 4 讨论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-89页 |
| 全文总结 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 附录 | 第93-96页 |
