| 摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 英文缩略词 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 材料与方法 | 第13-23页 |
| 1.材料 | 第13-15页 |
| 1.1 细胞及质粒 | 第13页 |
| 1.2 主要仪器设备及耗材 | 第13-14页 |
| 1.3 主要试剂 | 第14页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第14-15页 |
| 2.实验方法 | 第15-22页 |
| 2.1 实验的分组 | 第15-16页 |
| 2.1.1 采用ELISA检测MIN6细胞胞内cAMP及Ins释放量的分组 | 第15页 |
| 2.1.2 基于荧光生物传感器的FRET技术实时监测MIN6活细胞中cAMP变化时的实验分组 | 第15-16页 |
| 2.2 MIN6细胞培养、扩增及冻存方法 | 第16页 |
| 2.3 质粒扩增储备方法 | 第16-17页 |
| 2.4 质粒通过真核细胞电穿孔转染进入MIN6细胞 | 第17-18页 |
| 2.5 ELISA检测各组MIN6细胞胞内c AMP含量 | 第18-19页 |
| 2.6 酶联免疫法检测各组MIN6细胞Ins的释放量 | 第19-20页 |
| 2.7 基于FRET技术的MIN6活细胞中cAMP实时定量检测 | 第20-22页 |
| 3.技术路线 | 第22页 |
| 4.统计方法 | 第22-23页 |
| 结果 | 第23-37页 |
| 1. MIN6细胞培养过程中的形态 | 第23页 |
| 2. cAMP荧光生物传感器-ICUE3质粒的表达与功能的测试 | 第23-25页 |
| 2.1 cAMP荧光生物传感器-ICUE3质粒在MIN6细胞中的表达 | 第23-24页 |
| 2.2 cAMP荧光生物传感器-ICUE3质粒功能的测试 | 第24-25页 |
| 3. MIN6活细胞中实时定量检测不同浓度Glu和Gc对cAMP含量的影响 | 第25-32页 |
| 3.1 无Glu时低GC浓度MIN6细胞内cAMP的变化 | 第25-26页 |
| 3.2 无Glu时高GC浓度MIN6细胞内cAMP的变化 | 第26-27页 |
| 3.3 低Glu时低GC浓度MIN6细胞内cAMP的变化 | 第27-28页 |
| 3.4 低Glu时高GC浓度MIN6细胞内cAMP的变化 | 第28-29页 |
| 3.5 高Glu时低GC浓度MIN6细胞内cAMP的变化 | 第29-30页 |
| 3.6 高Glu时高GC浓度MIN6细胞内cAMP的变化 | 第30-31页 |
| 3.7 不同浓度Gc在不同浓度Glu下对cAMP生成影响的比较 | 第31-32页 |
| 4. ELISA法检测不同浓度Glu和不同浓度Gc处理MIN6细胞内cAMP含量的变化 | 第32-34页 |
| 5. ELISA法检测不同浓度Glu和不同浓度Gc处理下的MIN6细胞Ins分泌量的变化 | 第34-35页 |
| 6. MIN6细胞胞内cAMP水平与胰岛素释放量的相关性分析 | 第35-37页 |
| 讨论 | 第37-41页 |
| 1.FRET技术实时监测MIN6细胞中cAMP的水平 | 第37-39页 |
| 2.Gc在MIN6细胞Ins分泌的cAMP通路中的作用 | 第39-40页 |
| 3.展望 | 第40-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 文献综述 | 第46-52页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 导师评阅表 | 第54页 |
