摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-18页 |
1.1 肺癌概况 | 第13页 |
1.2 樟芝概况 | 第13页 |
1.3 樟芝的主要活性成分及抗肿瘤活性 | 第13-14页 |
1.4 细胞凋亡 | 第14-15页 |
1.4.1 细胞凋亡途径 | 第14-15页 |
1.4.2 细胞凋亡与肿瘤发生 | 第15页 |
1.5 细胞自噬 | 第15-16页 |
1.5.1 细胞自噬信号通路 | 第15-16页 |
1.5.2 细胞自噬与肿瘤发生 | 第16页 |
1.6 细胞凋亡与细胞自噬 | 第16-18页 |
第二章 樟芝发酵产物粗提物的抗肺癌活性 | 第18-26页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.2 实验试剂及仪器 | 第18-19页 |
2.2.1 实验试剂 | 第18页 |
2.2.2 实验仪器 | 第18-19页 |
2.3 实验方法 | 第19-20页 |
2.3.1 樟芝发酵液与发酵菌丝体制备 | 第19页 |
2.3.2 樟芝提取物制备 | 第19页 |
2.3.3 体外抑制肿瘤细胞增殖实验 | 第19-20页 |
2.3.4 细胞周期分布变化的检测 | 第20页 |
2.3.5 Annexin V和PI双染法检测细胞凋亡 | 第20页 |
2.4 实验结果 | 第20-25页 |
2.4.1 体外抑制SPCA-1 细胞的增殖作用 | 第20-21页 |
2.4.2 诱导SPCA-1 细胞发生细胞凋亡的作用 | 第21-23页 |
2.4.3 对SPCA-1 细胞周期的影响 | 第23-25页 |
2.5 结论 | 第25-26页 |
第三章 By-1 和Antrodin C的抗肺癌活性评价 | 第26-35页 |
3.1 实验材料 | 第26页 |
3.2 实验试剂及仪器 | 第26页 |
3.2.1 实验试剂 | 第26页 |
3.2.2 实验仪器 | 第26页 |
3.3 实验方法 | 第26-28页 |
3.3.1 体外抑制肿瘤细胞增殖实验 | 第26-27页 |
3.3.2 平板克隆法检测细胞活力 | 第27页 |
3.3.3 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第27页 |
3.3.4 细胞周期分布变化的检测 | 第27页 |
3.3.5 细胞内活性氧释放的测定 | 第27页 |
3.3.6 Annexin V和PI双染法检测细胞凋亡 | 第27-28页 |
3.3.7 ELISA法检测凋亡相关蛋白的表达 | 第28页 |
3.4 实验结果 | 第28-34页 |
3.4.1 对SPCA-1 细胞的体外增殖抑制作用 | 第28-29页 |
3.4.2 对SPCA-1 细胞克隆形成的影响 | 第29-30页 |
3.4.3 对SPCA-1 细胞迁移的影响 | 第30页 |
3.4.4 对SPCA-1 细胞周期的影响 | 第30-31页 |
3.4.5 对活性氧(ROS)释放的影响 | 第31-32页 |
3.4.6 对SPCA-1 细胞凋亡的影响 | 第32-33页 |
3.4.7 对凋亡相关蛋白的影响 | 第33-34页 |
3.5 结论 | 第34-35页 |
第四章 By-1 和Antrodin C诱导细胞自噬 | 第35-44页 |
4.1 实验材料 | 第35页 |
4.2 实验试剂及仪器 | 第35-36页 |
4.2.1 实验试剂 | 第35-36页 |
4.2.2 实验仪器 | 第36页 |
4.3 实验方法 | 第36-38页 |
4.3.1 透射电镜检测自噬体/自噬溶酶体 | 第36页 |
4.3.2 荧光显微镜检测自噬流发生 | 第36-37页 |
4.3.3 流式细胞仪检测细胞自噬的发生 | 第37页 |
4.3.4 Western blot检测相关蛋白的表达 | 第37-38页 |
4.3.5 Phosflow检测磷酸化蛋白表达 | 第38页 |
4.4 实验结果 | 第38-43页 |
4.4.1 透射电镜观察细胞自噬结构 | 第38-40页 |
4.4.2 自噬流的检测 | 第40页 |
4.4.3 自噬标记蛋白的检测 | 第40-41页 |
4.4.4 自噬标记蛋白LC3II增加的原因 | 第41-42页 |
4.4.5 自噬发生的信号通路 | 第42-43页 |
4.5 结论 | 第43-44页 |
第五章 自噬与凋亡交互式调控对细胞增殖的影响 | 第44-48页 |
5.1 实验材料 | 第44页 |
5.2 实验试剂及仪器 | 第44页 |
5.2.1 实验试剂 | 第44页 |
5.2.2 实验仪器 | 第44页 |
5.3 实验方法 | 第44页 |
5.3.1 体外抑制肿瘤细胞增殖实验 | 第44页 |
5.3.2 Annexin V和PI双染法检测细胞凋亡 | 第44页 |
5.4 实验结果 | 第44-47页 |
5.4.1 自噬与细胞增殖抑制的相关性 | 第44-45页 |
5.4.2 自噬与细胞凋亡的相关性 | 第45-46页 |
5.4.3 保护性自噬发生的条件 | 第46-47页 |
5.5 结论 | 第47-48页 |
第六章 樟芝活性化合物对EGFR缺陷型肺癌细胞的影响 | 第48-51页 |
6.1 实验材料 | 第48页 |
6.2 实验试剂及仪器 | 第48页 |
6.2.1 实验试剂 | 第48页 |
6.2.2 实验仪器 | 第48页 |
6.3 实验方法 | 第48页 |
6.3.1 体外抑制肿瘤细胞增殖实验 | 第48页 |
6.3.2 细胞周期分布变化的检测 | 第48页 |
6.3.3 Annexin V和PI双染法检测细胞凋亡 | 第48页 |
6.4 实验结果 | 第48-50页 |
6.4.1 对HCC827细胞体外增殖的抑制作用 | 第48-49页 |
6.4.2 对HCC827细胞周期的影响 | 第49-50页 |
6.4.3 对HCC827细胞凋亡的影响 | 第50页 |
6.5 结论 | 第50-51页 |
第七章 结论与展望 | 第51-53页 |
7.1 主要结论 | 第51页 |
7.2 创新点 | 第51-52页 |
7.3 展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
附录 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60-61页 |
附件 | 第61页 |