| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 内源性反转录病毒研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1 内源性反转录病毒 | 第10页 |
| 1.2 内源性反转录病毒基因组的结构组成 | 第10-11页 |
| 1.3 内源性反转录病毒与天然免疫 | 第11-12页 |
| 2 鸡内源性反转录病毒——禽内源性白血病病毒的研究进展 | 第12-14页 |
| 2.1 禽白血病病毒 | 第12-13页 |
| 2.2 禽内源性白血病病毒 | 第13页 |
| 2.3 禽内源性白血病病毒的基因特性 | 第13-14页 |
| 3 CRISPR/Cas9系统研究进展 | 第14-18页 |
| 3.1 CRISPR/Cas9系统 | 第14-15页 |
| 3.2 CRISPR/Cas系统作用机制 | 第15-16页 |
| 3.3 CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑 | 第16-18页 |
| 4 转录终止 | 第18-19页 |
| 4.1 转录终止研究概述 | 第18页 |
| 4.2 转录终止子的研究进展 | 第18-19页 |
| 5 研究意义与目的 | 第19-20页 |
| 第二章 禽内源性白血病病毒ALVE1的鉴定及其表达分析 | 第20-31页 |
| 前言 | 第20页 |
| 1 材料与方法 | 第20-27页 |
| 1.1主要试剂 | 第20-21页 |
| 1.2 主要仪器 | 第21-22页 |
| 1.3 细胞培养 | 第22页 |
| 1.4 禽内源性白血病病毒ALVE1序列分析 | 第22-23页 |
| 1.5 禽内源性白血病病毒ALVEl的末端序列鉴定 | 第23-25页 |
| 1.6 禽内源性白血病病毒ALVE1在HD11细胞中的转录情况分析 | 第25-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-29页 |
| 2.1 禽内源性白血病病毒ALVE1的序列分析 | 第27-28页 |
| 2.2 禽内源性白血病病毒ALVE1的末端序列鉴定 | 第28页 |
| 2.3 禽内源性白血病病毒ALVE1在基因组中的位置验证 | 第28-29页 |
| 2.4 禽内源性白血病病毒ALVE1在HD11细胞中的转录情况分析 | 第29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 转录终止元件的筛选 | 第31-39页 |
| 前言 | 第31页 |
| 1 材料与方法 | 第31-35页 |
| 1.1 主要试剂 | 第32页 |
| 1.2 主要仪器 | 第32页 |
| 1.3 细胞和质粒 | 第32-33页 |
| 1.4 相关的引物设计与合成 | 第33页 |
| 1.5 载体构建 | 第33-34页 |
| 1.6 瞬时转染 | 第34页 |
| 1.7 总RNA提取、反转录和荧光定量PCR | 第34-35页 |
| 1.8 统计学处理 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-37页 |
| 2.1 构建获得的载体 | 第35-36页 |
| 2.2 不同转录终止元件的终止效率比较 | 第36-37页 |
| 2.3 正向与反向polyA序列的转录终止活性比较 | 第37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 CRISPR/Cas9系统介导的禽内源性白血病病毒ALVE1的转录终止及其功能探索 | 第39-54页 |
| 前言 | 第39-40页 |
| 1 材料与方法 | 第40-47页 |
| 1.1 主要试剂 | 第40页 |
| 1.2 主要仪器 | 第40页 |
| 1.3 细胞和质粒 | 第40-41页 |
| 1.4 相关引物设计与合成 | 第41-42页 |
| 1.5 HD11转染效率筛选 | 第42-43页 |
| 1.6 基因定点敲入靶位点的选择 | 第43页 |
| 1.7 gRNA模版的构建及其效率验证 | 第43-44页 |
| 1.8 ALVE1去功能(Loss of function)试验以及相关载体构建 | 第44-45页 |
| 1.9 鸡巨噬细胞HDllPuromycin、Neomycin抗生素浓度筛选 | 第45-46页 |
| 1.10 转染并获得稳转细胞系 | 第46页 |
| 1.11 对禽内源性白血病病毒ALVE1功能的初步探索 | 第46-47页 |
| 1.12 统计学处理 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-52页 |
| 2.1 HD11转染效率筛选 | 第47-49页 |
| 2.2 ALVE1靶位点的选择 | 第49页 |
| 2.3 同源重组载体的鉴定 | 第49-50页 |
| 2.4 鸡巨噬细胞HD11Puromycin和Neomycin抗生素致死浓度筛选 | 第50页 |
| 2.5 禽内源性白血病病毒ALVE1转录终止结果鉴定 | 第50-51页 |
| 2.6 对禽内源性白血病病毒ALVE1功能的初步探索 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 全文总结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文目录 | 第61-62页 |
