| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第20-30页 |
| 1.1 食品过敏原 | 第20-22页 |
| 1.2 过敏原分析检测方法 | 第22-25页 |
| 1.2.1 高效液相色谱法 | 第22-23页 |
| 1.2.2 凝胶电泳 | 第23页 |
| 1.2.3 质谱法 | 第23-24页 |
| 1.2.4 酶联免疫吸附法 | 第24-25页 |
| 1.3 同位素稀释质谱法 | 第25-28页 |
| 1.3.1 同位素稀释质谱法原理 | 第25-26页 |
| 1.3.2 同位素稀释质谱法的特点 | 第26页 |
| 1.3.3 同位素稀释质谱法的应用 | 第26-28页 |
| 1.4 课题提出 | 第28-30页 |
| 第二章 nanoUPLC-Q-TOF测定氨基酸含量方法研究及应用 | 第30-38页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第30页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第30-31页 |
| 2.2 实验内容 | 第31-33页 |
| 2.2.1 标准溶液配制 | 第31页 |
| 2.2.2 四级杆-飞行时间质谱实验参数 | 第31页 |
| 2.2.3 三重四级杆质谱实验参数 | 第31-32页 |
| 2.2.4 溶菌酶水解 | 第32页 |
| 2.2.5 同位素稀释质谱法测定及均匀性检验 | 第32-33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-37页 |
| 2.3.1 液相色谱-质谱条件的优化 | 第33-34页 |
| 2.3.2 方法学评价 | 第34-36页 |
| 2.3.2.1 外标法的评价 | 第34-35页 |
| 2.3.2.2 同位素稀释质谱法的评价 | 第35-36页 |
| 2.3.3 在同位素稀释质谱法中的应用 | 第36-37页 |
| 2.4 结论 | 第37-38页 |
| 第三章 四种蛋奶过敏原纯品的同位素稀释质谱定量方法研究 | 第38-58页 |
| 3.1 试剂与仪器 | 第38-39页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第38页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.2 实验内容 | 第39-44页 |
| 3.2.1 溶液配制 | 第39页 |
| 3.2.2 纯度扣除法测定蛋白质含量 | 第39-41页 |
| 3.2.2.1 凝胶电泳纯度测定 | 第40页 |
| 3.2.2.2 高效液相色谱纯度分析条件 | 第40页 |
| 3.2.2.3 水分测定 | 第40-41页 |
| 3.2.2.4 无机成分的测定 | 第41页 |
| 3.2.2.5 纯度扣除法蛋白质含量的计算 | 第41页 |
| 3.2.3 同位素稀释质谱法测定蛋白含量 | 第41-44页 |
| 3.2.3.1 蛋白鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.3.2 蛋白质精确分子量测定 | 第42页 |
| 3.2.3.3 同位素稀释质谱法样品处理 | 第42-43页 |
| 3.2.3.4 蛋白水解时间条件优化 | 第43页 |
| 3.2.3.5 同位素稀释质谱法液质分析条件 | 第43页 |
| 3.2.3.6 同位素稀释质谱法蛋白质含量的计算 | 第43-44页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第44-56页 |
| 3.3.1 纯度扣除法蛋白质含量测定结果 | 第44-50页 |
| 3.3.1.1 凝胶电泳结果 | 第44页 |
| 3.3.1.2 高效液相色谱法测定结果 | 第44-46页 |
| 3.3.1.3 水分测定结果 | 第46页 |
| 3.3.1.4 无机成分测定结果 | 第46-49页 |
| 3.3.1.5 纯度扣除法的计算 | 第49-50页 |
| 3.3.2 同位素稀释质谱法测定蛋白含量结果 | 第50-56页 |
| 3.3.2.1 蛋白鉴定结果 | 第50-51页 |
| 3.3.2.2 分子量分析结果 | 第51-53页 |
| 3.3.2.3 水解时间的确定 | 第53-54页 |
| 3.3.2.4 同位素稀释质谱法方法学评价 | 第54-56页 |
| 3.3.2.4.1 方法重复性 | 第54-55页 |
| 3.3.2.4.2 检出限和定量限 | 第55页 |
| 3.3.2.4.3 方法准确性 | 第55-56页 |
| 3.4 结论 | 第56-58页 |
| 第四章 奶粉中β-乳球蛋白含量同位素稀释质谱定量方法研究 | 第58-78页 |
| 4.1 试剂与仪器 | 第58-59页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第58-59页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第59页 |
| 4.2 实验内容 | 第59-64页 |
| 4.2.1 溶液配制 | 第59页 |
| 4.2.2 肽段水解 | 第59-60页 |
| 4.2.3 蛋白酶切 | 第60页 |
| 4.2.4 蛋白鉴定 | 第60-61页 |
| 4.2.5 奶粉中β-乳球蛋白含量的测定 | 第61页 |
| 4.2.6 奶粉中β-乳球蛋白含量分析的液质条件 | 第61-62页 |
| 4.2.7 酶解液中纯品β-乳球蛋白含量计算 | 第62页 |
| 4.2.8 奶粉酶解液β-乳球蛋白含量计算 | 第62-64页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第64-77页 |
| 4.3.1 特征肽段的选择 | 第64页 |
| 4.3.2 肽段水解时间的优化及含量测定结果 | 第64-65页 |
| 4.3.3 酶切条件的优化 | 第65-69页 |
| 4.3.3.1 酶切时间的优化 | 第66页 |
| 4.3.3.2 变性剂和还原烷基化试剂用量的优化 | 第66-68页 |
| 4.3.3.3 还原烷基化试剂用量 | 第68页 |
| 4.3.3.4 还原烷基化温度及时间 | 第68-69页 |
| 4.3.4 酶切效率的考察 | 第69-71页 |
| 4.3.4.1 纯品蛋白酶切效率测定 | 第70页 |
| 4.3.4.2 奶粉中β-乳球蛋白酶切效率测定 | 第70-71页 |
| 4.3.5 β-乳球蛋白同位素稀释质谱方法学参数的考察 | 第71-73页 |
| 4.3.5.1 准确度 | 第71页 |
| 4.3.5.2 检出限和定量限 | 第71-72页 |
| 4.3.5.3 加标回收率 | 第72-73页 |
| 4.3.6 奶粉样品中β-乳球蛋白的测定 | 第73-77页 |
| 4.4 结论 | 第77-78页 |
| 第五章 β-乳球蛋白的同位素稀释质谱定值结果在两种ELISA试剂盒的互通性研究中的应用 | 第78-86页 |
| 5.1 实验试剂和仪器 | 第78-79页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第78页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第78-79页 |
| 5.2 实验内容 | 第79-81页 |
| 5.2.1 试剂盒评价 | 第79-80页 |
| 5.2.1.1 Biocheck试剂盒 | 第79页 |
| 5.2.1.2 拜发试剂盒 | 第79-80页 |
| 5.2.2 试剂盒互通性研究 | 第80-81页 |
| 5.2.2.1 Biocheck试剂盒的互通性研究 | 第80页 |
| 5.2.2.2 拜发试剂盒的互通性研究 | 第80-81页 |
| 5.2.3 未知样品中β-乳球蛋白含量的测定 | 第81页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第81-85页 |
| 5.3.1 试剂盒评价结果 | 第81-83页 |
| 5.3.1.1 Biocheck试剂盒评价结果 | 第81-82页 |
| 5.3.1.2 拜发试剂盒评价结果 | 第82-83页 |
| 5.3.2 试剂盒互通性研究结果 | 第83-85页 |
| 5.3.2.1 Biocheck试剂盒转换系数的测定 | 第83-84页 |
| 5.3.2.2 拜发试剂盒转换系数的测定 | 第84-85页 |
| 5.3.3 未知样品β-乳球蛋白含量测定结果及互通性研究结果 | 第85页 |
| 5.4 结论 | 第85-86页 |
| 第六章 结论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第96-98页 |
| 作者和导师简介 | 第98-99页 |
| 附件 | 第99-100页 |
