| 提要 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 英文缩写词表 | 第16-18页 |
| 第一篇 文献综述 | 第18-46页 |
| 第一章 TLR7/8/9 介导的固有免疫信号通路与疾病相关性研究进展 | 第18-30页 |
| 1 免疫系统与 TLRs 概述 | 第18-19页 |
| 2 识别核酸的 TLRs 及其通过配体引发的信号 | 第19-25页 |
| 2.1 TLR7 和 TLR9 与疾病的相关性研究 | 第21-23页 |
| 2.2 Unc93B1 的结构分布与生物学效应 | 第23-24页 |
| 2.3 Unc93B1 缺陷阻断 TLRs 信号转导 | 第24-25页 |
| 3 TLR 诱导的免疫反应的调节性机制 | 第25-26页 |
| 4 含有 RNA 和 DNA 的免疫复合物对 TLR7/8/9 不当激活引起的自身免疫疾病 | 第26-28页 |
| 5 TLR7/8/9 拮抗剂的发展前景治疗自身免疫性疾病 | 第28-29页 |
| 6 抑制性 ODN 的发展趋势 | 第29-30页 |
| 第二章 胞浆 DNAsensors 相关分子的研究进展 | 第30-46页 |
| 1 固有免疫系统的模式识别受体 | 第30-33页 |
| 2 胞浆 DNA 识别途径与自身免疫病的发病机制 | 第33-34页 |
| 3 DNA 识别中仍存在较多的未知 | 第34-37页 |
| 4 DNA 病原体反应中的 STING 通路固有免疫信号的调节 | 第37-39页 |
| 5 TLR 依赖的 DNA 识别机制 | 第39-40页 |
| 6 TLR 非依赖的 DNA 介导的固有免疫信号 | 第40-42页 |
| 7 胞浆 DNA 介导的 RNA 聚合酶 III/RIG-I/IPS-1 依赖的固有信号 | 第42-43页 |
| 8 胞浆 DNA 介导的炎性小体依赖的固有信号 | 第43页 |
| 9 DNA 识别机制和自身免疫 | 第43-44页 |
| 10 结语 | 第44-46页 |
| 第二篇 研究内容 | 第46-131页 |
| 一 CCT-ODN 对 TLR7/9 及其转运蛋白 Unc93B1 移行的影响 | 第46-69页 |
| 1.1 主要材料 | 第46-47页 |
| 1.1.1 ODNs | 第46页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第46-47页 |
| 1.1.3 细胞与细胞系 | 第47页 |
| 1.2 实验方法 | 第47-52页 |
| 1.2.1 培养液及溶剂配制 | 第47-48页 |
| 1.2.2 细胞的培养和分离 | 第48-49页 |
| 1.2.3 细胞玻片的制备 | 第49页 |
| 1.2.4 细胞间接免疫荧光技术 | 第49-50页 |
| 1.2.5 细胞荧光染色技术 | 第50-51页 |
| 1.2.6 Western Bloting 检测技术 | 第51-52页 |
| 1.3 结果 | 第52-64页 |
| 1.3.1 建立用于研究 CCT-ODN 影响配体诱导的 TLR7/9 细胞内移行的技术平台 | 第52-59页 |
| 1.3.2 CCT-ODN 抑制配体诱导的 TLR7/9 及其转运蛋白 Unc93B1 的移行 | 第59-62页 |
| 1.3.3 CCT-ODN 抑制 Unc93B1 移行可能性因素 | 第62-64页 |
| 1.4 讨论 | 第64-69页 |
| 1.4.1 CCT-ODN 抑制 TLR7/9 活性的可能靶点 | 第64-65页 |
| 1.4.2 CCT-ODN 对 TLR7 和 TLR9 的时效和量效参数选择 | 第65-66页 |
| 1.4.3 用于研究 TLR7/9 移行的细胞类型 | 第66-67页 |
| 1.4.4 CCT-ODN 抑制 TLR7/9 的机理不同于其它抑制剂 | 第67页 |
| 1.4.5 CCT-ODN 抑制 TLR7/9 胞内移行的普遍性 | 第67-68页 |
| 1.4.6 CCT-ODN 抑制 TLR7/9 胞内移行的序列依赖性 | 第68-69页 |
| 二 CCT-ODN 对 TLR7/9 及信号通路相关分子和胞浆 DNA 感知蛋白基因表达的影响 | 第69-106页 |
| 2.1 主要材料 | 第69页 |
| 2.2 方法 | 第69-74页 |
| 2.2.1 待检测细胞样本的制备 | 第69-70页 |
| 2.2.2 总 RNA 的提取 | 第70页 |
| 2.2.3 RNA 逆转录合成 cDNA 第一链 | 第70-71页 |
| 2.2.4 实时定量 PCR 检测 | 第71-73页 |
| 2.2.5 间接流式细胞术 | 第73-74页 |
| 2.3 结果 | 第74-102页 |
| 2.3.1 CCT-ODN 作用于 CAL-1 细胞不同时间后对内体 TLRs 基因表达的影响 | 第74-85页 |
| 2.3.2 CCT-ODN 不能诱导 TLR9 在 CAL-1 细胞表面表达 | 第85-87页 |
| 2.3.3 CCT-ODN 对 CAL-1 细胞中 TLR7/9 的蛋白表达没有影响 | 第87-88页 |
| 2.3.4 CCT-ODN 对负责转运 TLR3,7/9 的蛋白 Unc93B1 基因表达水平的影响 | 第88-92页 |
| 2.3.5 CCT-ODN 对 NF-κB 信号通路极其相关细胞因子（TNF- ，TGF-β，IL-10）基因表达水平的影响 | 第92-97页 |
| 2.3.6 CCT-ODN 对 IRF-7 信号通路相关分子基因表达水平的影响 | 第97-102页 |
| 2.4 讨论 | 第102-106页 |
| 2.4.1 CCT-ODN 能显著上调 CAL-1 细胞中 TLR7 和 TLR9 的基因表达水平 | 第102页 |
| 2.4.2 CCT-ODN 能上调 CAL-1 细胞中 IRF-7 的表达水平 | 第102-104页 |
| 2.4.3 CCT-ODN 对 STING 和以 STING 为中心的 DNA 识别蛋白介导的 I 型 IFN 产生信号通路的影响 | 第104-106页 |
| 三 CCT-ODN 的构效研究 | 第106-131页 |
| 3.1 材料 | 第106-107页 |
| 3.2 方法 | 第107页 |
| 3.2.1 间接免疫荧光染色 | 第107页 |
| 3.2.2 实时定量 PCR | 第107页 |
| 3.3 结果 | 第107-127页 |
| 3.3.1 变构 CCT-ODN 对 CAL-1 细胞 TLR9 的运输的影响 | 第107-110页 |
| 3.3.2 变构的 CCT-ODN 对 CAL-1 细胞 TLR7/9 基因表达水平的影响 | 第110-113页 |
| 3.3.3 变构的 CCT-ODN 对 DNA 识别蛋白 mRNA 表达的影响 | 第113-127页 |
| 3.4 讨论 | 第127-131页 |
| 3.4.1 变构 CCT-ODN 与 CCT-ODN 对 TLR7/9 表达水平影响的区别 | 第127-128页 |
| 3.4.2 这些变构 CCT-ODN 对 TLR9 胞内移行的影响区别 | 第128页 |
| 3.4.3 变构 CCT-ODN 对 DNA sensors 表达的影响 | 第128-129页 |
| 3.4.4 单链 DNA 介导的 STING 依赖的信号转导途径的激活 | 第129-131页 |
| 结论 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-145页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第145-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
