甲壳废弃物资源化关键酶开发及组合应用研究
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 课题背景 | 第10页 |
| 1.2 虾蟹壳废弃物的回收与深加工 | 第10-11页 |
| 1.2.1 虾蟹壳废弃物的回收 | 第10-11页 |
| 1.2.2 虾蟹壳的深加工 | 第11页 |
| 1.3 甲壳素及其衍生物的性质及应用 | 第11-16页 |
| 1.3.1 甲壳素及其高聚衍生物的性质 | 第11-13页 |
| 1.3.2 甲壳低聚糖的基本性质 | 第13页 |
| 1.3.3 甲壳素及其高聚衍生物的应用 | 第13-15页 |
| 1.3.4 甲壳低聚糖的应用 | 第15-16页 |
| 1.4 甲壳低聚糖的生产方法 | 第16-18页 |
| 1.4.1 化学降解法 | 第16页 |
| 1.4.2 酶降解法 | 第16-18页 |
| 1.5 课题来源及研究目的与意义 | 第18页 |
| 1.5.1 课题研究来源 | 第18页 |
| 1.5.2 课题研究目的与意义 | 第18页 |
| 1.6 课题研究内容与技术路线 | 第18-20页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第20-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 试剂与药品 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第21页 |
| 2.1.4 培养基 | 第21-22页 |
| 2.1.5 实验相关溶液配制 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 菌株的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.2 菌种摇瓶培养与菌种保藏 | 第25-26页 |
| 2.2.3 酶液的获取与酶蛋白的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.4 酶活力的测定方法 | 第27-29页 |
| 2.2.5 酶学基本性质研究 | 第29-30页 |
| 2.2.6 甲壳低聚糖的酶法制备 | 第30-32页 |
| 2.2.7 底物表征与酶解产物的测定分析 | 第32-33页 |
| 2.2.8 菌株产酶条件的优化 | 第33-34页 |
| 2.2.9 酶液贮存条件研究 | 第34-36页 |
| 第3章 三种甲壳素转化酶的重组表达 | 第36-47页 |
| 3.1 重组菌株的构建与表达鉴定 | 第36-39页 |
| 3.1.1 质粒DNA的酶切与克隆 | 第36-37页 |
| 3.1.2 重组菌株酶蛋白的表达鉴定 | 第37-39页 |
| 3.2 酶的活性鉴定 | 第39-41页 |
| 3.2.1 甲壳素酶活力鉴定 | 第39页 |
| 3.2.2 壳聚糖酶活力鉴定 | 第39-40页 |
| 3.2.3 脱乙酰酶活力鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3 酶的基本酶学性质研究 | 第41-46页 |
| 3.3.1 温度对酶的影响 | 第41-43页 |
| 3.3.2 pH对酶的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.3 酶促反应动力学研究 | 第44-46页 |
| 3.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第4章 虾蟹壳酶法制备甲壳低聚糖的研究 | 第47-55页 |
| 4.1 虾蟹壳的前处理 | 第47-50页 |
| 4.1.1 从虾蟹壳制备甲壳素 | 第47-48页 |
| 4.1.2 甲壳素及壳聚糖的羧甲基化 | 第48-50页 |
| 4.2 甲壳低聚糖的酶法制备 | 第50-54页 |
| 4.2.1 酶的组合应用 | 第50-51页 |
| 4.2.2 不同酶组合的应用效果比较 | 第51-53页 |
| 4.2.3 酶解产物分析 | 第53-54页 |
| 4.3 本章小结 | 第54-55页 |
| 第5章 甲壳素酶的表达优化及贮存研究 | 第55-65页 |
| 5.1 摇瓶培养下酶的表达条件优化 | 第55-58页 |
| 5.1.1 不同诱导时机对酶活的影响 | 第55-56页 |
| 5.1.2 不同诱导温度与时间对酶活的影响 | 第56-58页 |
| 5.1.3 不同诱导剂浓度对酶活的影响 | 第58页 |
| 5.2 菌株高密度培养及酶的表达研究 | 第58-61页 |
| 5.2.1 菌株生长状况研究 | 第59-60页 |
| 5.2.2 高密度培养下的酶的表达情况 | 第60-61页 |
| 5.3 酶液的贮存条件研究 | 第61-64页 |
| 5.3.1 保护剂对酶热稳定性的作用研究 | 第61-62页 |
| 5.3.2 保护剂对酶液长期贮存的作用研究 | 第62-64页 |
| 5.4 本章小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
