| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-28页 |
| ·金黄色葡萄球菌蛋白A | 第11-14页 |
| ·蛋白A简介 | 第11页 |
| ·蛋白A的结构与功能 | 第11-13页 |
| ·蛋白A的应用 | 第13-14页 |
| ·重组蛋白A | 第14-17页 |
| ·重组蛋白A概述 | 第14-15页 |
| ·重组蛋白A的国内外产业化现状 | 第15-16页 |
| ·重组蛋白A的分离纯化工艺国内外研究进展 | 第16-17页 |
| ·基因工程重组蛋白下游纯化技术 | 第17-27页 |
| ·蛋白质纯化的三步纯化策略 | 第17-19页 |
| ·纯化过程的关键技术 | 第19-24页 |
| ·纯化技术的选择与组合 | 第24-26页 |
| ·蛋白质纯化后的保存 | 第26-27页 |
| ·论文的研究基础、目标及主要内容 | 第27-28页 |
| 2 rPA的提取与初分离纯化技术研究 | 第28-37页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验材料与仪器 | 第28-29页 |
| ·材料和试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-32页 |
| ·BCA法测定总蛋白含量 | 第29页 |
| ·体积排阻高效液相色谱外标法测定rPA含量及纯度 | 第29-30页 |
| ·反相高效液相色谱外标法测定rPA含量及纯度 | 第30页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30-31页 |
| ·细胞破碎 | 第31页 |
| ·热沉淀 | 第31-32页 |
| ·乙醇沉淀 | 第32页 |
| ·实验结果与讨论 | 第32-36页 |
| ·BCA法测定总蛋白标准曲线 | 第32页 |
| ·HPLC外标法测定rPA标准曲线 | 第32-33页 |
| ·裂解缓冲液离子强度优化 | 第33-34页 |
| ·热沉淀条件优化 | 第34-35页 |
| ·乙醇沉淀条件优化 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 3 rPA的层析精分离纯化技术研究 | 第37-52页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·实验材料与仪器 | 第37-38页 |
| ·材料和试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·DEAE弱阴离子交换层析介质的合成 | 第38-39页 |
| ·DEAE弱阴离子交换层析条件优化 | 第39-40页 |
| ·MEP疏水电荷诱导层析介质的合成 | 第40页 |
| ·MEP疏水电荷诱导层析条件优化 | 第40-41页 |
| ·实验结果与讨论 | 第41-51页 |
| ·DEAE Sepharose CL-6B的合成优化 | 第41-45页 |
| ·DEAE弱阴离子交换层析洗脱缓冲液的盐浓度优化 | 第45页 |
| ·DEAE弱阴离子交换层析起始缓冲液的pH优化 | 第45-47页 |
| ·DEAE Sepharose CL-6B凝胶的动态结合容量测定 | 第47-48页 |
| ·MEP疏水电荷诱导层析介质配基密度的优化 | 第48页 |
| ·MEP疏水电荷诱导层析平衡缓冲液pH和盐浓度优化 | 第48-50页 |
| ·MEP疏水电荷诱导层析洗脱缓冲液的pH优化 | 第50页 |
| ·MEP Sepharose CL-6B凝胶的动态结合容量测定 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 4 rPA的分离纯化工艺及终产品的鉴定分析 | 第52-64页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·实验材料与仪器 | 第52-53页 |
| ·材料和试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·纯化工艺具体操作条件 | 第53页 |
| ·终产品纯度测定 | 第53页 |
| ·终产品Western blot分析 | 第53-54页 |
| ·终产品分子量测定 | 第54页 |
| ·终产品等电点测定 | 第54-55页 |
| ·终产品N端序列分析 | 第55页 |
| ·终产品与人IgG结合能力评价 | 第55页 |
| ·rPA保存方法初步研究 | 第55页 |
| ·实验结果与讨论 | 第55-63页 |
| ·纯化工艺总结 | 第55-58页 |
| ·终产品纯度测定 | 第58-60页 |
| ·终产品Western blot分析 | 第60页 |
| ·终产品分子量测定 | 第60-61页 |
| ·终产品等电点测定 | 第61页 |
| ·终产品N端序列分析 | 第61页 |
| ·终产品与人IgG结合能力评价 | 第61-62页 |
| ·rPA保存方法初步研究 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 附录A 实验室构建的rPA氨基酸序列 | 第69-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
