摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
第1章 前言 | 第13-15页 |
第2章 实验材料 | 第15-21页 |
2.1 细胞株 | 第15页 |
2.2 培养基于血清 | 第15页 |
2.3 主要药品、试剂和试剂盒 | 第15-16页 |
2.4 主要试剂配制 | 第16-18页 |
2.4.1 细胞培养基 | 第16页 |
2.4.2 western blot试剂配制 | 第16-18页 |
2.5 主要仪器和设备 | 第18-21页 |
第3章 实验方法 | 第21-29页 |
3.1 细胞培养及处理 | 第21-22页 |
3.2 Transwell体外侵袭实验 | 第22-23页 |
3.3 划痕损伤实验 | 第23页 |
3.4 Western blot | 第23-25页 |
3.4.1 蛋白样品的抽提 | 第23-24页 |
3.4.1.1 全细胞蛋白的抽提 | 第23-24页 |
3.4.1.2 胞质与胞核蛋白的抽提 | 第24页 |
3.4.2 BCA定量 | 第24页 |
3.4.3 电泳和转膜 | 第24-25页 |
3.4.4 封闭和抗体孵育 | 第25页 |
3.4.5 显影 | 第25页 |
3.5 细胞免疫荧光 | 第25-26页 |
3.6 抗体芯片检测 | 第26-28页 |
3.6.1 样品蛋白质抽提与标记 | 第26-27页 |
3.6.1.1 蛋白质抽提 | 第26页 |
3.6.1.2 蛋白质浓度测定 | 第26页 |
3.6.1.3 蛋白质标记 | 第26-27页 |
3.6.2 芯片杂交 | 第27-28页 |
3.6.2.1 芯片封闭 | 第27页 |
3.6.2.2 芯片杂交 | 第27页 |
3.6.2.3 芯片检测 | 第27-28页 |
3.6.3 芯片结果扫描 | 第28页 |
3.6.4 芯片数据整理及报告分析 | 第28页 |
3.7 数据分析 | 第28-29页 |
第4章 实验结果 | 第29-40页 |
4.1 PRMT2增加MCF | 第29-31页 |
4.1.1 PRMT2过表达促进MCF-7 细胞产生类似EMT现象的形态学改变 | 第29页 |
4.1.2 PRMT2过表达促进MCF | 第29-31页 |
4.1.2.1 PRMT2过表达促进MCF | 第29-31页 |
4.1.2.2 PRMT2过表达促进MCF | 第31页 |
4.2 PRMT2可上调MCF | 第31-35页 |
4.3 PRMT2可能通过调节 β-catenin磷酸化激活Wnt信号通路促进MCF | 第35-40页 |
4.3.1 抗体芯片检测MCF-7 细胞中PRMT2调控的肿瘤信号通路 | 第35-37页 |
4.3.2 蛋白质印迹验证Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达 | 第37-40页 |
4.3.2.1 WB检测MCF-7 全细胞蛋白 β-catenin与p-β-catenin的表达 | 第37-38页 |
4.3.2.2 WB检测MCF-7 细胞胞质与胞核蛋白Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达 | 第38-40页 |
第5章 讨论 | 第40-43页 |
第6章 实验结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
综述 | 第49-58页 |
参考文献 | 第55-58页 |
附录 | 第58-59页 |
攻读学位期间的科研成果 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-62页 |