| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-12页 |
| 第二章 Tet-on advanced系统调控的SV40T表达慢病毒载体的构建 | 第12-37页 |
| 1 材料 | 第12-15页 |
| 2 方法 | 第15-27页 |
| ·pLV.EX2d.P/puro-EF1A>rtTA(M2)载体的构建 | 第15-21页 |
| ·pLV.EX3d.P/neo-TRE>SV40T>IRES/eGFP载体的构建 | 第21-26页 |
| ·慢病毒载体扩增提纯备用转染 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-34页 |
| ·pLV.EX2d.P/puro-EF1A>rtTA(M2)载体的构建 | 第27-30页 |
| ·pLV.Ex3d.P/neo-TRE>SV40T>IRES/eGFP表达载体的构建 | 第30-34页 |
| ·重组慢病毒载体的质量控制 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-37页 |
| 第三章 Tet-on系统调控的永生化小鼠胰岛β细胞系的建立 | 第37-54页 |
| 1 材料 | 第37-39页 |
| 2 方法 | 第39-45页 |
| ·Tet-on advanced调控的慢病毒载体的包装 | 第39-41页 |
| ·原代小鼠胰岛细胞的分离纯化与培养 | 第41-42页 |
| ·Tet-on advanced调控的永生化小鼠胰岛β细胞系的建立 | 第42-45页 |
| 3 结果 | 第45-51页 |
| ·Tet-on advanced调控的慢病毒载体的包装 | 第45-47页 |
| ·原代小鼠胰岛细胞的分离纯化与培养 | 第47-48页 |
| ·Tet-on advanced调控的可逆性永生化小鼠胰岛β细胞系的建立 | 第48-51页 |
| 4、讨论 | 第51-54页 |
| 第四章 可逆性永生化小鼠胰岛β细胞系生物学特性研究 | 第54-67页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| 2 方法 | 第55-59页 |
| ·可逆性永生化鼠源胰岛细胞系的安全性研究 | 第55-58页 |
| ·可逆性永生化鼠源胰岛细胞系的功能性研究 | 第58-59页 |
| 3 结果 | 第59-64页 |
| ·回复前后的RIB细胞形态变化 | 第59页 |
| ·染色体稳定性检测 | 第59-60页 |
| ·RIB细胞增殖能力的测定 | 第60-61页 |
| ·Western Blot检测SV40T蛋白的表达水平 | 第61页 |
| ·平板克隆形成试验 | 第61页 |
| ·回复前后RIB细胞系胰腺相关基因表达 | 第61-62页 |
| ·回复前后RIB细胞系胰腺相关蛋白表达 | 第62-63页 |
| ·回复前后RIB细胞系葡萄糖刺激实验 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-67页 |
| 全文结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 缩略语 | 第74-75页 |
| 综述 | 第75-81页 |
| 参考文献 | 第78-81页 |
| 在校期间发表文章 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
