| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-20页 |
| 1.1 贾第虫的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 贾第虫生活史 | 第12页 |
| 1.1.2 贾第虫形态学特点 | 第12-13页 |
| 1.1.3 贾第虫病的症状 | 第13页 |
| 1.1.4 贾第虫病的流行病学研究 | 第13页 |
| 1.1.5 贾第虫病的诊断 | 第13-14页 |
| 1.1.6 贾第虫蛋白质组学研究 | 第14-15页 |
| 1.1.7 贾第虫病的防治 | 第15页 |
| 1.2 端粒酶的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.1 端粒和端粒酶的结构 | 第15-16页 |
| 1.2.2 寄生虫端粒酶相关蛋白的研究 | 第16页 |
| 1.2.3 贾第虫端粒的研究进展 | 第16页 |
| 1.3 酵母双杂交技术的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 酵母双杂交技术 | 第16-18页 |
| 1.3.2 GST pull-down技术 | 第18页 |
| 1.3.3 蛋白质互作的其他技术 | 第18页 |
| 1.4 研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-41页 |
| 2.1 材料 | 第20-25页 |
| 2.1.1 虫种 | 第20页 |
| 2.1.2 文库、载体、感受态和细胞株 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第21-25页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-41页 |
| 2.2.1 贾第虫滋养体的培养 | 第25-26页 |
| 2.2.2 贾第虫滋养体DNA的获得 | 第26-27页 |
| 2.2.3 贾第虫cDNA的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.4 酵母双杂交c DNA文库质量的检测 | 第28页 |
| 2.2.5 贾第虫TERT互作的蛋白质的筛选 | 第28-34页 |
| 2.2.6 GST pull-down方法验证贾第虫的CHP和TRBD互作 | 第34-38页 |
| 2.2.7 免疫共沉淀方法验证蛋白间互作 | 第38-41页 |
| 3 结果 | 第41-52页 |
| 3.1 贾第虫滋养体培养 | 第41页 |
| 3.2 贾第虫基因组DNA的提取 | 第41页 |
| 3.3 贾第虫总RNA提取 | 第41-42页 |
| 3.4 贾第虫文库检测 | 第42-43页 |
| 3.5 酵母双杂交筛选 | 第43-47页 |
| 3.6 GST pull-down验证 | 第47-50页 |
| 3.6.1 真核表达诱饵基因Gl_RBD | 第47-48页 |
| 3.6.2 PCR扩增Gl_CHP全长 | 第48-49页 |
| 3.6.3 考马斯亮蓝染色 | 第49页 |
| 3.6.4 诱饵蛋白与目的蛋白GST pull-down鉴定 | 第49-50页 |
| 3.7 免疫共沉淀验证 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 酵母双杂交中诱饵的选取与获得 | 第52页 |
| 4.2 诱饵蛋白与互作蛋白的性质分析 | 第52-53页 |
| 4.3 酵母双杂交中筛选结果分析 | 第53-54页 |
| 4.4 GST pull-down验证蛋白互作关系 | 第54页 |
| 4.5 免疫共沉淀验证蛋白互作关系 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66页 |
