致谢 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
缩略词表 | 第9-12页 |
引言 | 第12-14页 |
1 材料与仪器 | 第14-18页 |
1.1 细胞株及质粒 | 第14页 |
1.2 临床标本 | 第14-15页 |
1.3 抗体及引物 | 第15-16页 |
1.4 试剂及材料 | 第16-17页 |
1.5 仪器及设备 | 第17-18页 |
2 实验方法 | 第18-26页 |
2.1 细胞培养 | 第18页 |
2.2 质粒构建 | 第18页 |
2.3 细胞转染 | 第18-19页 |
2.4 细胞和组织蛋白提取 | 第19页 |
2.5 细胞和组织蛋白定量 | 第19-20页 |
2.6 免疫共沉淀和免疫印迹 | 第20-22页 |
2.6.1 蛋白裂解物的预清除步骤 | 第20页 |
2.6.2 蛋白裂解物的免疫沉淀步骤 | 第20页 |
2.6.3 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳步骤 | 第20-22页 |
2.7 RT-PCR和PCR | 第22页 |
2.8 细胞划痕修复 | 第22页 |
2.9 细胞Transwell | 第22-23页 |
2.10 细胞表面蛋白标记 | 第23页 |
2.11 细胞免疫荧光 | 第23-24页 |
2.12 动物实验 | 第24页 |
2.13 统计学方法 | 第24页 |
2.14 溶液配置 | 第24-26页 |
3 实验结果 | 第26-40页 |
3.1 在人类结直肠癌细胞系中发现新的RON剪接变异体 | 第26-28页 |
3.2 在HEK293上皮细胞中稳定转染表达新变异体蛋白RON△165~(E2) | 第28-30页 |
3.3 变异体RON△165~(E2)蛋白表达于细胞内 | 第30-31页 |
3.4 PI3K/Akt/mTOR通路在HEK293 RON△165~(E2)细胞中持续激活 | 第31-33页 |
3.5 RON△165~(E2)促进PTEN蛋白磷酸化 | 第33-34页 |
3.6 RON△165~(E2)促进HEK293细胞移动 | 第34-37页 |
3.7 RON△165~(E2)蛋白促进小鼠皮下肿瘤的生长 | 第37-38页 |
3.8 RON△165~(E2)变异体与肿瘤临床分期相关 | 第38-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
综述 | 第49-62页 |
参考文献 | 第56-62页 |
作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第62页 |