摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第9-18页 |
1.1 诱导多潜能干细胞(iPSCs) | 第11-12页 |
1.1.1 诱导多潜能干细胞概述 | 第11-12页 |
1.2 生殖细胞分化 | 第12-14页 |
1.2.1 小鼠生殖细胞发生 | 第12-13页 |
1.2.2 人类生殖细胞发生研究进展 | 第13-14页 |
1.3 三维细胞培养技术 | 第14-17页 |
1.3.1 甲基纤维素(methylcellulose,MC) | 第15页 |
1.3.2 胶原水凝胶 | 第15页 |
1.3.3 丝素蛋白 | 第15页 |
1.3.4 PET(聚对苯二甲酸乙二酯) | 第15-16页 |
1.3.5 微载体 | 第16页 |
1.3.6 基质胶(Matrigel) | 第16页 |
1.3.7 聚乙二醇水凝胶(poly-ethylene glycol hydrogel,PEG水凝胶) | 第16-17页 |
1.4 未来展望 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-26页 |
2.1 实验常用试剂的配方 | 第18-19页 |
2.2 主要实验的方法与步骤 | 第19-26页 |
2.2.1 CF1胎鼠成纤维细胞的培养及feeder(饲养层)细胞的制备 | 第19-21页 |
2.2.2 传统mESCs的培养及EpiLCs的诱导分化 | 第21页 |
2.2.3 优化后的Epil Cs的诱导分化 | 第21-22页 |
2.2.4 传统环境中mPGCLCs的诱导分化 | 第22-23页 |
2.2.5 三维环境中mPGCLCs的诱导分化 | 第23页 |
2.2.6 day4的mPGCLCs的流式分析 | 第23-24页 |
2.2.7 免疫荧光染色 | 第24-26页 |
第三章 实验结果 | 第26-34页 |
3.1 小鼠原始生殖细胞体外分化三维培养体系的建立 | 第26-27页 |
3.2 小鼠mES多能性的鉴定及三维培养条件下的EpiLCs的鉴定 | 第27-29页 |
3.3 不同KOSR浓度对三维培养条件下mPGCLCs | 第29-30页 |
3.4 MC条件下mPGCLCs悬浮培养分析 | 第30-32页 |
3.5 三维培养条件节约成本 | 第32-34页 |
第四章 总结与讨论 | 第34-36页 |
英文缩略词表 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
致谢 | 第40页 |