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Cdhl对肝再生模型中细胞周期的调控及DNA损伤的影响

中英文缩略词表第5-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1.引言第11-14页
2.实验材料与仪器第14-16页
    2.1 实验材料第14-15页
        2.1.1 实验动物第14页
        2.1.2 主要实验试剂和配制第14-15页
    2.2 实验仪器第15-16页
3.实验方法第16-32页
    3.1 条件性敲除实验小鼠获得与鉴定第16-18页
        3.1.1 获取实验小鼠第16页
        3.1.2 提取小鼠基因组第16-17页
        3.1.3 小鼠基因型鉴定第17-18页
        3.1.4 进行琼脂糖凝胶电泳测定第18页
    3.2 小鼠组织中总RNA的提取第18-21页
        3.2.1 提取RNA样品材料的处理第18-19页
        3.3.2 组织中总RNA提取第19页
        3.2.3 RNA的反转录第19-20页
        3.2.4 Q-PCR反应第20-21页
    3.3 组织总蛋白的提取和检测第21-24页
        3.3.1 提取组织蛋白第21-22页
        3.3.2 蛋白浓度的测定第22页
        3.3.3 WB检测蛋白的表达第22-24页
    3.4 肝脏切除术和组织样本的收集第24-25页
    3.5 石蜡组织切片和冰冻切片的制备第25-26页
        3.5.1 石蜡组织组织切片的制备第25页
        3.5.2 冰冻切片的制备第25-26页
    3.6 BrdU免疫组化第26页
    3.7 pH3免疫荧光第26-27页
    3.8 分离小鼠的肝实质细胞第27-28页
    3.9 流式细胞术检测分析BrdU的掺入第28-29页
    3.10 小鼠MEF细胞的获取及培养第29-31页
        3.10.1 小鼠 13.5 天MEF细胞的获取第29-30页
        3.10.2 细胞的传代第30页
        3.10.3 细胞的冻存第30-31页
    3.11 MTS检测MEF细胞的增殖第31-32页
    3.12 统计分析第32页
4.实验结果第32-45页
    4.1 采用Cre-loxp系统构建Cdh1条件性敲除小鼠第32-35页
    4.2 Cdh1缺失对肝再生过程中细胞周期的影响第35-40页
    4.3 Cdh1缺失导致再生过程中的肝细胞复制压力(replicative stress)增加第40-45页
5.讨论第45-46页
6.结论第46-47页
参考文献第47-51页
附录第51-52页
致谢第52-53页
综述第53-62页
    参考文献第59-62页

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