中英文缩略词表 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1.引言 | 第11-14页 |
2.实验材料与仪器 | 第14-16页 |
2.1 实验材料 | 第14-15页 |
2.1.1 实验动物 | 第14页 |
2.1.2 主要实验试剂和配制 | 第14-15页 |
2.2 实验仪器 | 第15-16页 |
3.实验方法 | 第16-32页 |
3.1 条件性敲除实验小鼠获得与鉴定 | 第16-18页 |
3.1.1 获取实验小鼠 | 第16页 |
3.1.2 提取小鼠基因组 | 第16-17页 |
3.1.3 小鼠基因型鉴定 | 第17-18页 |
3.1.4 进行琼脂糖凝胶电泳测定 | 第18页 |
3.2 小鼠组织中总RNA的提取 | 第18-21页 |
3.2.1 提取RNA样品材料的处理 | 第18-19页 |
3.3.2 组织中总RNA提取 | 第19页 |
3.2.3 RNA的反转录 | 第19-20页 |
3.2.4 Q-PCR反应 | 第20-21页 |
3.3 组织总蛋白的提取和检测 | 第21-24页 |
3.3.1 提取组织蛋白 | 第21-22页 |
3.3.2 蛋白浓度的测定 | 第22页 |
3.3.3 WB检测蛋白的表达 | 第22-24页 |
3.4 肝脏切除术和组织样本的收集 | 第24-25页 |
3.5 石蜡组织切片和冰冻切片的制备 | 第25-26页 |
3.5.1 石蜡组织组织切片的制备 | 第25页 |
3.5.2 冰冻切片的制备 | 第25-26页 |
3.6 BrdU免疫组化 | 第26页 |
3.7 pH3免疫荧光 | 第26-27页 |
3.8 分离小鼠的肝实质细胞 | 第27-28页 |
3.9 流式细胞术检测分析BrdU的掺入 | 第28-29页 |
3.10 小鼠MEF细胞的获取及培养 | 第29-31页 |
3.10.1 小鼠 13.5 天MEF细胞的获取 | 第29-30页 |
3.10.2 细胞的传代 | 第30页 |
3.10.3 细胞的冻存 | 第30-31页 |
3.11 MTS检测MEF细胞的增殖 | 第31-32页 |
3.12 统计分析 | 第32页 |
4.实验结果 | 第32-45页 |
4.1 采用Cre-loxp系统构建Cdh1条件性敲除小鼠 | 第32-35页 |
4.2 Cdh1缺失对肝再生过程中细胞周期的影响 | 第35-40页 |
4.3 Cdh1缺失导致再生过程中的肝细胞复制压力(replicative stress)增加 | 第40-45页 |
5.讨论 | 第45-46页 |
6.结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
附录 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
综述 | 第53-62页 |
参考文献 | 第59-62页 |