| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-20页 |
| 1.1 黄病毒概述 | 第15-16页 |
| 1.2 坦布苏病毒概述及研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.1 坦布苏病毒概述 | 第16页 |
| 1.2.2 坦布苏病毒分子流行病学 | 第16页 |
| 1.2.3 坦布苏病毒研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 反向遗传操作系统概述 | 第17-19页 |
| 1.3.1 病毒反向遗传操作系统概述 | 第17页 |
| 1.3.2 黄病毒反向遗传操作系统概述 | 第17-18页 |
| 1.3.3 黄病毒反向遗传操作系统的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 坦布苏病毒MM1775株 全基因组序列测定 | 第20-30页 |
| 2.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 坦布苏病毒MM1775株核酸 | 第20页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.4 引物设计 | 第21-22页 |
| 2.2 方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 病毒RNA提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 5’末端序列快速扩增（5’RACE） | 第23页 |
| 2.2.3 3’末端序列快速扩增（3’RACE） | 第23-24页 |
| 2.2.4 MM1775全基因组分段扩增及序列测定 | 第24页 |
| 2.3 结果 | 第24-28页 |
| 2.3.1 5’和 3’末端序列扩增结果 | 第24-25页 |
| 2.3.2 MM1775基因组分片段扩增结果 | 第25-26页 |
| 2.3.3 MM1775和FX2010基因组序列比较 | 第26-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 坦布苏病毒MM1775株 反向遗传操作系统的建立 | 第30-44页 |
| 3.1 材料 | 第30-33页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.2 主要培养基、缓冲液及部分试剂配制 | 第31页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第31-33页 |
| 3.2 MM1775反 向遗传操作系统构建策略 | 第33页 |
| 3.3 方法 | 第33-39页 |
| 3.3.1 MM1775全基因组分段扩增 | 第33页 |
| 3.3.2 目的片段的磷酸化 | 第33页 |
| 3.3.3 目的片段与载体连接 | 第33-34页 |
| 3.3.4 重组质粒转化入宿主细胞 | 第34页 |
| 3.3.5 阳性质粒的抽提 | 第34页 |
| 3.3.6 MM1775基因组单一性限制性酶切位点分析 | 第34-35页 |
| 3.3.7 MM1775基因组分片段克隆 | 第35页 |
| 3.3.8 11064567pSIMPLE、335211001pSIMPLE质粒的构建 | 第35-37页 |
| 3.3.9 MM1775全长cDNA的扩增 | 第37-38页 |
| 3.3.10 MM1775拯救毒株的救获 | 第38-39页 |
| 3.4 结果 | 第39-42页 |
| 3.4.1 MM1775基因组分段克隆 | 第39-40页 |
| 3.4.2 MM1775序列T7-3827和 3549-11001的扩增 | 第40页 |
| 3.4.3 MM1775全长cDNA的扩增 | 第40-41页 |
| 3.4.4 MM1775株的成功救获 | 第41-42页 |
| 3.5 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 坦布苏病毒MM1775拯 救毒株的生物学特性研究 | 第44-53页 |
| 4.1 材料 | 第44页 |
| 4.1.1 病毒、细胞和实验动物 | 第44页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第44页 |
| 4.2 方法 | 第44-46页 |
| 4.2.1 病毒扩增 | 第44页 |
| 4.2.2 病毒滴度测定 | 第44-45页 |
| 4.2.3 组织样品、血清的制备 | 第45页 |
| 4.2.4 病毒RNA提取 | 第45页 |
| 4.2.5 Real-Time PCR方法 | 第45-46页 |
| 4.2.6 Blocking ELISA | 第46页 |
| 4.3 动物试验 | 第46-48页 |
| 4.3.1 病毒对鸡胚致病性试验 | 第46-47页 |
| 4.3.2 病毒对小鼠致病性试验 | 第47页 |
| 4.3.3 病毒对鸭子致病性试验 | 第47-48页 |
| 4.4 结果 | 第48-51页 |
| 4.4.1 病毒滴定结果 | 第48页 |
| 4.4.2 病毒对鸡胚致病性结果 | 第48-49页 |
| 4.4.3 病毒对小鼠致病性结果 | 第49-50页 |
| 4.4.4 病毒对鸭子致病性结果 | 第50-51页 |
| 4.5 讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60页 |
