| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-15页 |
| 1.1 基因组印记的发现及其概念 | 第9页 |
| 1.2 印记基因的特征 | 第9-10页 |
| 1.3 印记基因可能的调控机制 | 第10-11页 |
| 1.3.1 DNA甲基化 | 第10页 |
| 1.3.2 组蛋白修饰 | 第10-11页 |
| 1.3.3 非编码RNA | 第11页 |
| 1.4 基因组印记的生物学意义 | 第11-12页 |
| 1.4.1 印记基因与家畜育种 | 第11页 |
| 1.4.2 基因组印记与动物体细胞核移植 | 第11页 |
| 1.4.3 印记异常与遗传疾病 | 第11-12页 |
| 1.5 主要研究方法 | 第12-13页 |
| 1.5.1 亚硫酸盐测序法(bisulfite sequence PCR，BSP) | 第12-13页 |
| 1.5.2 甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR，MSP) | 第13页 |
| 1.5.3 甲基化敏感性限制性内切酶法(Methylation-sensitive Restriction Endonuclease PCR，MS-RE-PCR) | 第13页 |
| 1.6 所研究的基因 | 第13-14页 |
| 1.6.1 Dio3基因研究现状 | 第13-14页 |
| 1.6.2 Dio3os基因研究现状 | 第14页 |
| 1.6.3 Wif1基因研究现状 | 第14页 |
| 1.7 研究的内容及意义 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-21页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 牛组织样品 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂、试剂盒 | 第15页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第15页 |
| 2.1.4 生物信息学分析软件和网站 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-17页 |
| 2.2.1 牛组织RNA的提取 | 第16页 |
| 2.2.2 反转录合成c DNA | 第16-17页 |
| 2.3 基因组织表达的RT-PCR分析 | 第17-18页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第17页 |
| 2.3.2 RT-PCR | 第17-18页 |
| 2.4 印记状态分析 | 第18-19页 |
| 2.4.1 牛基因组DNA的提取及检测 | 第18页 |
| 2.4.2 PCR扩增 | 第18页 |
| 2.4.3 PCR产物的回收 | 第18-19页 |
| 2.4.4 DNA测序确定杂合子牛 | 第19页 |
| 2.4.5 RT-PCR法研究基因的表达谱 | 第19页 |
| 2.5 Wif1基因甲基化研究 | 第19-21页 |
| 2.5.1 CG岛预测及BSP-PCR引物设计 | 第19页 |
| 2.5.2 BSP-PCR扩增 | 第19-20页 |
| 2.5.3 PCR产物胶回收、克隆、测序 | 第20页 |
| 2.5.4 数据分析 | 第20-21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-29页 |
| 3.1 筛选牛Dio3、Dio3os和Wif1基因杂合子个体 | 第21页 |
| 3.2 牛Dio3基因的印记状态分析 | 第21-22页 |
| 3.2.1 牛Dio3基因的在组织中的表达 | 第21-22页 |
| 3.2.2 牛Dio3基因的印记分析 | 第22页 |
| 3.3 牛Dio3os基因的印记状态分析 | 第22-23页 |
| 3.3.1 牛Dio3os基因的组织表达分析 | 第22-23页 |
| 3.3.2 牛Dio3os基因的印记分析 | 第23页 |
| 3.4 牛Wif1基因组织表达印记状态及甲基化状态 | 第23-29页 |
| 3.4.1 牛Wif1基因组织表达印记状态分析 | 第23-24页 |
| 3.4.2 牛Wif1基因甲基化状态分析 | 第24-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 4.1 牛Dio3和Dio3os基因的组织特异性表达及印记状态分析 | 第29页 |
| 4.2 牛Wif1基因的组织表达、印记及甲基化状态 | 第29-31页 |
| 5 结论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-39页 |
| 在读期间发表论文 | 第39-40页 |
| 简历 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
