| 主要英文缩写词 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 肠道病毒EV71型概述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 EN71病毒的简介 | 第10页 |
| 1.1.2 EV71病毒致病机制 | 第10-11页 |
| 1.1.3 诊断方法 | 第11-12页 |
| 1.2 手足口病简介 | 第12-13页 |
| 1.3 EV71病毒防治与治疗 | 第13-14页 |
| 1.3.1 EV71疫苗 | 第13页 |
| 1.3.2 中和抗体 | 第13-14页 |
| 1.4 呼吸道病毒的检测 | 第14页 |
| 1.5 课题的研究内容及背景 | 第14-18页 |
| 第2章 肠道病毒EV71型安徽株的扩增与纯化 | 第18-22页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.1 细胞株、病毒毒株 | 第18页 |
| 2.1.2 主要材料 | 第18页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第18页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 细胞的复苏与培养 | 第18-19页 |
| 2.2.2 病毒的扩增培养 | 第19页 |
| 2.2.3 病毒的纯化浓缩 | 第19-20页 |
| 2.2.4 EV71病毒滴度检测 | 第20页 |
| 2.3 EV71病毒滴度测定结果 | 第20-21页 |
| 2.4 讨论 | 第21页 |
| 2.5 本章小结 | 第21-22页 |
| 第3章 抗EV71人源中和抗体的制备及鉴定 | 第22-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 3.1.1 细胞株、病毒毒株 | 第22页 |
| 3.1.2 主要材料 | 第22-23页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第23页 |
| 3.1.4 实验试剂配制 | 第23页 |
| 3.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 3.2.1 EV71特异性体B淋巴细胞的分选及记忆性B细胞的活化培养 | 第23-25页 |
| 3.2.2 人源抗EV71病毒抗体的ELISA检测 | 第25页 |
| 3.2.3 人源抗体重链和轻链可变区基因的扩增、鉴定及纯化 | 第25-28页 |
| 3.2.4 构建人源抗体重、轻链重组表达质粒及测序 | 第28-31页 |
| 3.2.5 重组表达载体转染 293T细胞及抗体性质鉴定 | 第31-34页 |
| 3.2.6 CCK8法检测细胞活性 | 第34页 |
| 3.2.7 EV71单克隆抗体亲和力活性检测及抗体配对 | 第34-36页 |
| 3.3 结果 | 第36-40页 |
| 3.3.1 细胞筛选结果 | 第36页 |
| 3.3.2 抗体结合活性鉴定结果 | 第36页 |
| 3.3.3 EV71抗体重链及轻链基因可变区基因扩增结果 | 第36-37页 |
| 3.3.4 表达质粒的构建及鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3.5 中和活性检测结果EV71病毒与系列稀释的抗体结果 | 第38-39页 |
| 3.3.6 抗体亲和力活性的检测结果 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 常见呼吸道病毒QPCR检测方法的建立 | 第42-50页 |
| 4.1 材料和方法 | 第42-44页 |
| 4.1.1 临床材料 | 第42页 |
| 4.1.2 主要材料 | 第42-43页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第43-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-47页 |
| 4.2.1 病毒核酸提取 | 第44页 |
| 4.2.2 核酸的检测 | 第44-46页 |
| 4.2.3 数据分析与结果判定 | 第46-47页 |
| 4.3 结果 | 第47-48页 |
| 4.3.1 EBV标准曲线建立的结果 | 第47页 |
| 4.3.2 不同病毒感染情况 | 第47页 |
| 4.3.3 混合感染情况 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48页 |
| 4.5 本章小结 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附录 1:巢式PCR引物 | 第56-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
