| 中文摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 缩略语/符号说明 | 第17-20页 |
| 前言 | 第20-22页 |
| 研究现状、成果 | 第20-21页 |
| 研究目的、方法 | 第21-22页 |
| 一、ZEB2、E-cadherin在食管癌组织和细胞株中的表达及意义 | 第22-46页 |
| 1.1 对象和方法 | 第23-30页 |
| 1.1.1 细胞株 | 第23页 |
| 1.1.2 食管癌组织石蜡标本及相应临床资料收集 | 第23页 |
| 1.1.3 随访资料 | 第23页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 1.1.5 主要试剂 | 第24-25页 |
| 1.1.6 实验方法和步骤 | 第25-30页 |
| 1.2 结果 | 第30-39页 |
| 1.2.1 食管鳞癌组织中ZEB2和E-cadherin蛋白的表达 | 第30-32页 |
| 1.2.2 食管鳞癌组织中ZEB2和E-cadherin蛋白表达与患者临床病理特征的关系 | 第32-33页 |
| 1.2.3 食管鳞癌组织中ZEB2和E-cadherin蛋白的相关性 | 第33页 |
| 1.2.4 肿瘤周围食管组织中ZEB2和E-cadherin蛋白的相关性 | 第33-34页 |
| 1.2.5 ZEB2和E-cadherin表达水平与ESCC生存率的关系 | 第34页 |
| 1.2.6 Cox模型分析影响ESCC患者预后的因素 | 第34-36页 |
| 1.2.7 四组食管癌细胞RNA提取结果 | 第36页 |
| 1.2.8 Real-time PCR检测ZEB2 mNRA的表达 | 第36-37页 |
| 1.2.9 Real-time PCR检测Ecadherin mNRA的表达 | 第37-38页 |
| 1.2.10 Real-time PCR检测CRB3 mNRA的表达 | 第38-39页 |
| 1.2.11 Western blot检测ZEB2、Ecadherin、CRB3的表达 | 第39页 |
| 1.3 讨论 | 第39-45页 |
| 1.3.1 食管癌中EMT是肿瘤的侵袭和转移关键特征 | 第39-40页 |
| 1.3.2 ZEB2蛋白在食管癌组织中的表达 | 第40-41页 |
| 1.3.3 E-cadherin在食管癌组织中表达 | 第41-43页 |
| 1.3.4 ZEB2与E-cadherin在食管癌组织中相关性分析 | 第43-44页 |
| 1.3.5 ZEB2、E-cadherin和CRB3mRNA在人食管癌细胞株表达 | 第44页 |
| 1.3.6 ZEB2、E-cadherin和CRB3蛋白在人食管癌细胞株表达 | 第44-45页 |
| 1.4 小结 | 第45-46页 |
| 二、ZEB2基因干扰对TGF-β1 诱导食管癌细胞的EMT及CRB3的影响 | 第46-68页 |
| 2.1 对象和方法 | 第46-53页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第46页 |
| 2.1.2 试剂 | 第46-47页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第47页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第47-50页 |
| 2.1.5 筛选ZEB2干扰效率高的siRNA片段 | 第50-51页 |
| 2.1.6 荧光定量PCR检测各组细胞ZEB表达 | 第51页 |
| 2.1.7 WB检测各组细胞中的蛋白表达水平 | 第51-52页 |
| 2.1.8 Transwell检测各组细胞的侵袭能力 | 第52-53页 |
| 2.1.9 划痕实验检测各组细胞的迁移能力 | 第53页 |
| 2.1.10 数据统计分析 | 第53页 |
| 2.2 结果 | 第53-61页 |
| 2.2.1 筛选细胞转染siRNA终浓度 | 第53-54页 |
| 2.2.2 荧光定量PCR检测各组细胞ZEB2mRNA表达水平 | 第54-56页 |
| 2.2.3 荧光定量PCR检测各组细胞CRB3mRNA、E-Cadherin mRNA及Vimentin m RNA表达水平 | 第56-58页 |
| 2.2.4 WB检测各组细胞中ZEB2、CRB3、E-Cadherin和Vimentin的蛋白表达水平 | 第58-60页 |
| 2.2.5 Transwell检测各组细胞的侵袭能力 | 第60页 |
| 2.2.6 划痕实验检测各组细胞的迁移能力 | 第60-61页 |
| 2.3 讨论 | 第61-67页 |
| 2.3.1 siRNA ZEB2构建 | 第61-62页 |
| 2.3.2 TGF-β1 对EMT的影响 | 第62-63页 |
| 2.3.3 干扰ZEB2对EMT相关蛋白的影响 | 第63-65页 |
| 2.3.4 干扰ZEB2对食管癌细胞侵袭迁移的影响 | 第65-66页 |
| 2.3.5 干扰ZEB2极性蛋白CRB3的影响 | 第66-67页 |
| 2.4 小结 | 第67-68页 |
| 三、ZEB2过表达对TGF-β1 诱导食管癌细胞的EMT及CRB3的影响 | 第68-82页 |
| 3.1 对象和方法 | 第68-73页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第68-69页 |
| 3.1.2 质粒 | 第69页 |
| 3.1.3 主要试剂及设备 | 第69-70页 |
| 3.1.4 实验方法及步骤 | 第70-73页 |
| 3.2 结果 | 第73-79页 |
| 3.2.1 pcDNA3.1(+)/ ZEB2质粒的构建 | 第73-74页 |
| 3.2.2 荧光定量PCR检测各组细胞ZEB2 m RNA表达水平 | 第74页 |
| 3.2.3 荧光定量PCR检测各组细胞CRB3mRNA及E-Cadherin mRNA表达水平 | 第74-75页 |
| 3.2.4 WB检测各组细胞中E-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平 | 第75-76页 |
| 3.2.5 Transwell检测各组细胞的侵袭能力 | 第76-77页 |
| 3.2.6 划痕实验检测各组细胞的迁移能力 | 第77-78页 |
| 3.2.7 ZEB2过表达检测各组细胞的肺转移瘤能力 | 第78-79页 |
| 3.3 讨论 | 第79-81页 |
| 3.3.1 ZEB2过表达质粒构建 | 第79-80页 |
| 3.3.2 ZEB2过表达对EMT相关蛋白和CRB3表达影响 | 第80页 |
| 3.3.3 ZEB2过表达促进食管鳞癌细胞体内转移影响 | 第80-81页 |
| 3.4 小结 | 第81-82页 |
| 全文结论 | 第82-84页 |
| 论文创新点 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第93-94页 |
| 附录 | 第94-97页 |
| 综述 ZEB家族在肿瘤发生发展中调控研究进展 | 第97-124页 |
| 综述参考文献 | 第112-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 个人简历 | 第125页 |
