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线粒体自噬在急性高糖导致的肾小管损伤中的作用机制

中文摘要第4-8页
Abstract第8-12页
缩略语/符号说明第17-18页
前言第18-20页
    研究现状、成果第18-19页
    研究目的、方法第19-20页
技术路线 1第20-21页
技术路线 2第21-22页
一、急性高糖对大鼠肾小管损伤的浓度依赖关系及可逆性探讨第22-52页
    1.1 对象和方法第22-23页
        1.1.1 研究对象第22页
        1.1.2 主要试剂第22-23页
        1.1.3 主要仪器第23页
    1.2 实验方法第23-27页
        1.2.1 动物饲养第23页
        1.2.2 大鼠颈静脉置管术第23-24页
        1.2.3 大鼠高葡萄糖钳夹实验第24页
        1.2.4 标本留取第24-25页
        1.2.5 一般指标检测第25页
        1.2.6 酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)第25-26页
        1.2.7 苏木素-伊红染色(H&E 染色)第26页
        1.2.8 透射电子显微镜观察肾脏形态学变化第26页
        1.2.9 统计学分析第26-27页
    1.3 实验结果第27-45页
        1.3.1 大鼠一般情况第27页
        1.3.2 急性高糖对大鼠肾小管损伤的浓度梯度关系第27-36页
        1.3.3 急性高糖导致大鼠肾小管损伤的可逆性探讨第36-45页
    1.4 讨论第45-51页
    1.5 小结第51-52页
二、线粒体自噬在急性高糖导致大鼠肾小管损伤中的作用研究第52-77页
    2.1 对象和方法第52-54页
        2.1.1 研究对象第52页
        2.1.2 主要器材第52-53页
        2.1.3 主要试剂第53-54页
    2.2 实验方法第54-59页
        2.2.1 透射电子显微镜观察第54页
        2.2.2 荧光定量PCR操作步骤第54-55页
        2.2.3 Western Blot法检测蛋白表达水平第55-58页
        2.2.4 组织免疫荧光法检测蛋白表达水平第58页
        2.2.5 免疫组织化学染色检测蛋白表达第58-59页
        2.2.6 统计学分析第59页
    2.3 实验结果第59-71页
        2.3.1 透射电镜观察大鼠肾小管上皮细胞线粒体自噬第59-60页
        2.3.2 大鼠肾脏自噬、线粒体自噬和自噬调节相关指标mRNA表达第60-65页
        2.3.3 大鼠肾脏自噬、线粒体自噬和自噬调节相关指标蛋白表达第65-69页
        2.3.4 组织免疫荧光法观察不同浓度急性高糖大鼠肾脏LC3变化第69-70页
        2.3.5 免疫组化法观察不同浓度急性高糖大鼠肾脏SGLT-2 蛋白表达第70-71页
    2.4 讨论第71-76页
    2.5 小结第76-77页
三、AMPK/mTOR信号通路在急性高糖导致NRK-52E细胞线粒体自噬障碍中的作用第77-96页
    3.1 对象和方法第77-78页
        3.1.1 研究对象第77页
        3.1.2 主要器材第77-78页
        3.1.3 主要试剂第78页
    3.2 实验方法第78-82页
        3.2.1 细胞培养第79-80页
        3.2.2 MTT检测法检测细胞活力第80页
        3.2.3 荧光定量PCR法检测NRK-52E细胞自噬、线粒体自噬及AMPK/mTOR信号通路相关指标mRNA表达第80-81页
        3.2.4 Western Blot法检测NRK-52E细胞自噬、线粒体自噬及AMPK/mTOR信号通路相关蛋白表达第81-82页
        3.2.5 AMPK激动剂及mTOR抑制剂对高糖培养的NRK-52E细胞自噬及线粒体自噬影响第82页
        3.2.6 统计学分析第82页
    3.3 实验结果第82-92页
        3.3.1 NRK-52E细胞形态第82-83页
        3.3.2 不同浓度急性高糖对NRK-52E细胞活力影响第83页
        3.3.3 不同浓度急性高糖对NRK-52E细胞自噬、线粒体自噬及自噬调节相关指标的mRNA表达的影响第83-87页
        3.3.4 不同浓度急性高糖对NRK-52E细胞自噬、线粒体自噬及自噬调节相关蛋白的表达的影响第87-90页
        3.3.5 AMPK激动剂及mTOR抑制剂干预对NRK-52E细胞自噬及线粒体自噬的影响第90-92页
    3.4 讨论第92-95页
    3.5 小结第95-96页
结论第96-97页
参考文献第97-103页
发表论文和参加科研情况说明第103-104页
综述 线粒体自噬与肾脏损伤研究进展第104-115页
    综述参考文献第110-115页
致谢第115-116页
个人简历第116页

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