中文摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
缩略语/符号说明 | 第17-18页 |
前言 | 第18-20页 |
研究现状、成果 | 第18-19页 |
研究目的、方法 | 第19-20页 |
技术路线 1 | 第20-21页 |
技术路线 2 | 第21-22页 |
一、急性高糖对大鼠肾小管损伤的浓度依赖关系及可逆性探讨 | 第22-52页 |
1.1 对象和方法 | 第22-23页 |
1.1.1 研究对象 | 第22页 |
1.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
1.1.3 主要仪器 | 第23页 |
1.2 实验方法 | 第23-27页 |
1.2.1 动物饲养 | 第23页 |
1.2.2 大鼠颈静脉置管术 | 第23-24页 |
1.2.3 大鼠高葡萄糖钳夹实验 | 第24页 |
1.2.4 标本留取 | 第24-25页 |
1.2.5 一般指标检测 | 第25页 |
1.2.6 酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) | 第25-26页 |
1.2.7 苏木素-伊红染色(H&E 染色) | 第26页 |
1.2.8 透射电子显微镜观察肾脏形态学变化 | 第26页 |
1.2.9 统计学分析 | 第26-27页 |
1.3 实验结果 | 第27-45页 |
1.3.1 大鼠一般情况 | 第27页 |
1.3.2 急性高糖对大鼠肾小管损伤的浓度梯度关系 | 第27-36页 |
1.3.3 急性高糖导致大鼠肾小管损伤的可逆性探讨 | 第36-45页 |
1.4 讨论 | 第45-51页 |
1.5 小结 | 第51-52页 |
二、线粒体自噬在急性高糖导致大鼠肾小管损伤中的作用研究 | 第52-77页 |
2.1 对象和方法 | 第52-54页 |
2.1.1 研究对象 | 第52页 |
2.1.2 主要器材 | 第52-53页 |
2.1.3 主要试剂 | 第53-54页 |
2.2 实验方法 | 第54-59页 |
2.2.1 透射电子显微镜观察 | 第54页 |
2.2.2 荧光定量PCR操作步骤 | 第54-55页 |
2.2.3 Western Blot法检测蛋白表达水平 | 第55-58页 |
2.2.4 组织免疫荧光法检测蛋白表达水平 | 第58页 |
2.2.5 免疫组织化学染色检测蛋白表达 | 第58-59页 |
2.2.6 统计学分析 | 第59页 |
2.3 实验结果 | 第59-71页 |
2.3.1 透射电镜观察大鼠肾小管上皮细胞线粒体自噬 | 第59-60页 |
2.3.2 大鼠肾脏自噬、线粒体自噬和自噬调节相关指标mRNA表达 | 第60-65页 |
2.3.3 大鼠肾脏自噬、线粒体自噬和自噬调节相关指标蛋白表达 | 第65-69页 |
2.3.4 组织免疫荧光法观察不同浓度急性高糖大鼠肾脏LC3变化 | 第69-70页 |
2.3.5 免疫组化法观察不同浓度急性高糖大鼠肾脏SGLT-2 蛋白表达 | 第70-71页 |
2.4 讨论 | 第71-76页 |
2.5 小结 | 第76-77页 |
三、AMPK/mTOR信号通路在急性高糖导致NRK-52E细胞线粒体自噬障碍中的作用 | 第77-96页 |
3.1 对象和方法 | 第77-78页 |
3.1.1 研究对象 | 第77页 |
3.1.2 主要器材 | 第77-78页 |
3.1.3 主要试剂 | 第78页 |
3.2 实验方法 | 第78-82页 |
3.2.1 细胞培养 | 第79-80页 |
3.2.2 MTT检测法检测细胞活力 | 第80页 |
3.2.3 荧光定量PCR法检测NRK-52E细胞自噬、线粒体自噬及AMPK/mTOR信号通路相关指标mRNA表达 | 第80-81页 |
3.2.4 Western Blot法检测NRK-52E细胞自噬、线粒体自噬及AMPK/mTOR信号通路相关蛋白表达 | 第81-82页 |
3.2.5 AMPK激动剂及mTOR抑制剂对高糖培养的NRK-52E细胞自噬及线粒体自噬影响 | 第82页 |
3.2.6 统计学分析 | 第82页 |
3.3 实验结果 | 第82-92页 |
3.3.1 NRK-52E细胞形态 | 第82-83页 |
3.3.2 不同浓度急性高糖对NRK-52E细胞活力影响 | 第83页 |
3.3.3 不同浓度急性高糖对NRK-52E细胞自噬、线粒体自噬及自噬调节相关指标的mRNA表达的影响 | 第83-87页 |
3.3.4 不同浓度急性高糖对NRK-52E细胞自噬、线粒体自噬及自噬调节相关蛋白的表达的影响 | 第87-90页 |
3.3.5 AMPK激动剂及mTOR抑制剂干预对NRK-52E细胞自噬及线粒体自噬的影响 | 第90-92页 |
3.4 讨论 | 第92-95页 |
3.5 小结 | 第95-96页 |
结论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-103页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第103-104页 |
综述 线粒体自噬与肾脏损伤研究进展 | 第104-115页 |
综述参考文献 | 第110-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
个人简历 | 第116页 |