| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 引言 | 第12-15页 |
| 第一部分 LB-1抑制HIF-1α和Stat3信号转导发挥抗胰腺癌作用及机制研究 | 第15-72页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 实验材料 | 第17-21页 |
| 实验方法 | 第21-35页 |
| 1. 细胞培养 | 第21页 |
| 2. LA及其衍生物处理方法 | 第21页 |
| 3. HRE-U251细胞筛选模型及化合物活性检测 | 第21-22页 |
| 4. 蛋白质组学分析(iTRAQ) | 第22-23页 |
| 5. MTT法检测细胞活力 | 第23-24页 |
| 6. 集落形成实验 | 第24页 |
| 7. 裸鼠异体移植瘤实验 | 第24-25页 |
| 8. 肿瘤组织检测Ki67和HIF-1α | 第25-26页 |
| 9. 蛋白免疫印迹法(western blotting)检测蛋白表达变化 | 第26-28页 |
| 10. 实时定量-聚合酶链式反应(Q-PCR) | 第28-31页 |
| 11. HIF-1α与DNA结合活性实验 | 第31页 |
| 12. 免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第31-32页 |
| 13. HUVECs细胞体外管腔形成实验 | 第32-33页 |
| 14. HIF-1靶基因VEGF表达的检测 | 第33页 |
| 15. shRNA法沉默人胰腺癌细胞中HIF-1α和Stat3 | 第33-34页 |
| 16. 统计学分析 | 第34-35页 |
| 实验结果 | 第35-67页 |
| 1. LA及其衍生物对HIF-1抑制活性的筛选 | 第35-38页 |
| 2. 蛋白质组学分析HRE-U251细胞筛选模型并初步推测LB-1作用机制 | 第38-42页 |
| 3. LB-1体外药效学研究 | 第42-44页 |
| 4. LB-1体内药效学研究 | 第44-51页 |
| 5. LB-1抗胰腺癌作用机制研究 | 第51-65页 |
| 6. LB-1是潜在的RNAPⅡ介导的转录起始抑制剂 | 第65-67页 |
| 讨论 | 第67-71页 |
| 小结 | 第71-72页 |
| 第二部分 LB-1逆转EMT过程并诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗胰腺癌侵袭转移作用及机制研究 | 第72-107页 |
| 前言 | 第72-74页 |
| 实验材料 | 第74-76页 |
| 实验方法 | 第76-84页 |
| 1. 细胞培养 | 第76页 |
| 2. LB-1和LA处理方法 | 第76页 |
| 3. MTT法检测细胞活力 | 第76页 |
| 4. 重组基质膜侵袭运动实验 | 第76-77页 |
| 5. SW1990-G-lue胰腺原位移植瘤模型的建立 | 第77-78页 |
| 6. 裸鼠原位移植瘤实验 | 第78-79页 |
| 7. Western blotting检测EMT和凋亡相关蛋白的表达 | 第79页 |
| 8. Q-PCR检测EMT相关基因mRNA水平 | 第79页 |
| 9. 流式细胞术分析E-Cadherin的表达 | 第79-80页 |
| 10. 免疫荧光细胞化学法分析E-Cadherin的表达 | 第80-81页 |
| 11. 瞬转shRNA质粒过表达Snail或沉默HIF-1α | 第81-82页 |
| 12. 流式细胞术分析细胞周期分布 | 第82页 |
| 13. 流式细胞术-Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡实验 | 第82-83页 |
| 14. 统计学分析 | 第83-84页 |
| 实验结果 | 第84-103页 |
| 1. LB-1短时间处理胰腺癌细胞的体外药效学研究 | 第84-86页 |
| 2. LB-1体内药效学研究 | 第86-91页 |
| 3. LB-1抗胰腺癌侵袭转移作用机制研究 | 第91-98页 |
| 4. LB-1诱导胰腺癌细胞凋亡的机制研究 | 第98-103页 |
| 讨论 | 第103-106页 |
| 小结 | 第106-107页 |
| 全文总结 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-115页 |
| 综述 | 第115-123页 |
| 参考文献 | 第120-123页 |
| 缩略词表 | 第123-126页 |
| 附录(一) 发表文章 | 第126-138页 |
| 附录(二) 溶液配制 | 第138-143页 |
| 个人简历 | 第143-145页 |
| 致谢 | 第145-148页 |
