| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第10-18页 |
| 1.1 免疫系统概述 | 第10页 |
| 1.2 无脊椎动物先天免疫系统 | 第10-13页 |
| 1.2.1 细胞免疫 | 第11页 |
| 1.2.2 体液免疫 | 第11-12页 |
| 1.2.3 病原体相关分子模式 | 第12页 |
| 1.2.4 模式识别受体 | 第12-13页 |
| 1.3 甲壳动物抗菌肽研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 对虾素（penaeidins） | 第14页 |
| 1.3.2 甲壳肽（crustins） | 第14-15页 |
| 1.3.3 抗脂多糖因子（antiliposaccharides factors，ALFs） | 第15-16页 |
| 1.4 本论文研究目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 拟穴青蟹SpALF6与其突变体功能差异的研究 | 第18-46页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-31页 |
| 2.2.1 实验动物的获得和免疫刺激 | 第20页 |
| 2.2.2 血细胞的分离和组织采样 | 第20-21页 |
| 2.2.3 总RNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.4 总RNA的检测 | 第21-22页 |
| 2.2.5 cDNA第一条链的合成 | 第22页 |
| 2.2.6 cDNA全长的克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.7 免疫刺激后表达模式分析 | 第23页 |
| 2.2.8 Sp ALF6和SpALF6-M编码区的克隆 | 第23-24页 |
| 2.2.9 生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.2.10 重组蛋白SpALF6和SpALF6-M的表达和纯化 | 第24-29页 |
| 2.2.11 LBD肽的合成 | 第29页 |
| 2.2.12 Sp ALF6和SpALF6-M抑菌活性的比较 | 第29页 |
| 2.2.13 Sp ALF6和SpALF6-M细菌结合实验 | 第29-31页 |
| 2.2.14 微生物多糖结合实验 | 第31页 |
| 2.3 结果 | 第31-43页 |
| 2.3.1 Sp ALF6 cDNA全长序列和序列比对结果 | 第31-34页 |
| 2.3.2 相似性和系统进化树分析 | 第34-36页 |
| 2.3.3 Sp ALF6的空间结构 | 第36页 |
| 2.3.4 Sp ALF6在各部位中的分布和病原刺激后的表达变化 | 第36-38页 |
| 2.3.5 Sp ALF6和SpALF6-M的表达和纯化 | 第38页 |
| 2.3.6 Sp ALF6-M和SpALF6在细菌生长抑制实验上的差异 | 第38-39页 |
| 2.3.7 Sp ALF6-M和SpALF6的细菌结合实验 | 第39-40页 |
| 2.3.8 Sp ALF6-M和SpALF6结合微生物多糖活性 | 第40-41页 |
| 2.3.9 LBD肽的细菌多糖结合实验和细菌生长抑制实验 | 第41-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-46页 |
| 第三章 拟穴青蟹中SpALF7的克隆、表达及功能研究 | 第46-60页 |
| 3.1 材料 | 第47页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第47页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第47页 |
| 3.1.3 主要仪器和试剂 | 第47页 |
| 3.2 方法 | 第47-49页 |
| 3.2.1 Sp ALF7编码区的克隆 | 第47页 |
| 3.2.2 Sp ALF7的序列分析以及生物信息学分析 | 第47页 |
| 3.2.3 Sp ALF7在体内的组织分布 | 第47页 |
| 3.2.4 重组蛋白表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 3.2.5 重组蛋白的纯化 | 第48页 |
| 3.2.6 Sp ALF7抑制病原微生物生长实验 | 第48页 |
| 3.2.7 Sp ALF7与病原微生物结合实验 | 第48-49页 |
| 3.2.8 Sp ALF7与病原微生物多糖结合实验 | 第49页 |
| 3.3 结果 | 第49-58页 |
| 3.3.1 Sp ALF7蛋白质序列特征和模拟的 3D结构 | 第49-51页 |
| 3.3.2 蛋白质同源比对和进化树分析 | 第51-53页 |
| 3.3.3 Sp ALF7体内组织分布 | 第53页 |
| 3.3.4 重组蛋白SpALF7的表达与纯化 | 第53-54页 |
| 3.3.5 病原微生物抑制实验 | 第54-55页 |
| 3.3.6 病原微生物结合实验 | 第55-56页 |
| 3.3.7 多糖结合实验 | 第56-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-60页 |
| 小结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
