英文缩略表 | 第3-4页 |
摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
第一章 绪论 | 第14-40页 |
1.1 流感概述 | 第14-32页 |
1.1.1 流感病毒的分类与命名 | 第14-15页 |
1.1.2 流感病毒的组分和功能 | 第15-29页 |
1.1.3 流感病毒生命周期 | 第29-32页 |
1.2 PLSCR1研究进展 | 第32-35页 |
1.2.1 PLSCR1结构组成 | 第32-34页 |
1.2.2 PLSCR1的生物学功能 | 第34-35页 |
1.3 研究蛋白质相互作用的技术方法 | 第35-39页 |
1.3.1 酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid (Y2H) system) | 第36-37页 |
1.3.2 串联亲和纯化技术(tandem affinity purification,TAP) | 第37-38页 |
1.3.3 噬菌体展示技术(phage display) | 第38-39页 |
1.4 研究的目的意义 | 第39-40页 |
第二章 PLSCR1通过影响NP入核抑制流感病毒复制 | 第40-79页 |
2.1 材料 | 第40-41页 |
2.1.1 相关试剂 | 第40页 |
2.1.2 载体、菌株、病毒株、细胞及酵母文库 | 第40-41页 |
2.2 方法 | 第41-52页 |
2.2.1 引物设计 | 第41-42页 |
2.2.2 质粒的构建 | 第42-44页 |
2.2.3 诱饵菌株的构建 | 第44-45页 |
2.2.4 酵母文库筛选 | 第45-46页 |
2.2.5 酵母回交验证 | 第46页 |
2.2.6 细胞转染 | 第46-47页 |
2.2.7 免疫共沉淀 | 第47页 |
2.2.8 Western Blot | 第47-48页 |
2.2.9 激光共聚焦 | 第48页 |
2.2.10 RNAi实验和病毒复制 | 第48-49页 |
2.2.11 构建过表达细胞系及病毒复制 | 第49页 |
2.2.12 拯救突变WSN病毒 | 第49-50页 |
2.2.13 病毒滴定 | 第50页 |
2.2.14 双荧光素酶报告基因试验 | 第50-51页 |
2.2.15 荧光定量PCR | 第51页 |
2.2.16 数据分析 | 第51-52页 |
2.3 实验结果分析 | 第52-72页 |
2.3.1 酵母双杂交筛选与A/Anhui/2/05(H5N1) 病毒株NP相互作用的蛋白 | 第52-55页 |
2.3.2 PLSCR1蛋白与NP在 293T细胞中相互作用验证及作用区段定位 | 第55-59页 |
2.3.3 293T细胞过表达或干扰PLSCR1对流感聚合酶活性的影响 | 第59-60页 |
2.3.4 PLSCR1抑制流感病毒的复制 | 第60-68页 |
2.3.5 PLSCR1与NP相互作用对病毒复制影响的机制研究 | 第68-72页 |
2.4 讨论 | 第72-79页 |
第三章 两株埃及分离H5N1禽流感病毒的生物学特性研究 | 第79-90页 |
3.1 材料 | 第79页 |
3.1.1 病毒株与实验动物 | 第79页 |
3.1.2 相关试剂 | 第79页 |
3.2 方法 | 第79-81页 |
3.2.1 病毒全基因组序列测定 | 第79页 |
3.2.2 测定病毒的鸡胚半数致死量(EID50) | 第79-80页 |
3.2.3 病毒唾液酸受体结合特性分析 | 第80页 |
3.2.4 病毒感染BALB/c小鼠实验 | 第80页 |
3.2.5 豚鼠和雪貂病毒感染实验 | 第80-81页 |
3.2.6 血清抗体检测 | 第81页 |
3.3 实验结果分析 | 第81-87页 |
3.3.1 病毒全基因组序列鉴定结果 | 第81页 |
3.3.2 病毒唾液酸受体结合特性检测结果 | 第81-82页 |
3.3.3 BALB/c小鼠感染实验结果 | 第82-84页 |
3.3.3 病毒在豚鼠和雪貂模型复制结果 | 第84页 |
3.3.4 病毒在豚鼠和雪貂模型飞沫传播及接触传播实验结果 | 第84-87页 |
3.4 讨论 | 第87-90页 |
第四章 全文结论 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-106页 |
致谢 | 第106-108页 |
作者简历 | 第108-110页 |
导师简介 | 第110-111页 |