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磷脂爬行酶对流感病毒抑制作用及两株埃及H5N1病毒分离鉴定及生物特性研究

英文缩略表第3-4页
摘要第4-7页
Abstract第7-10页
第一章 绪论第14-40页
    1.1 流感概述第14-32页
        1.1.1 流感病毒的分类与命名第14-15页
        1.1.2 流感病毒的组分和功能第15-29页
        1.1.3 流感病毒生命周期第29-32页
    1.2 PLSCR1研究进展第32-35页
        1.2.1 PLSCR1结构组成第32-34页
        1.2.2 PLSCR1的生物学功能第34-35页
    1.3 研究蛋白质相互作用的技术方法第35-39页
        1.3.1 酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid (Y2H) system)第36-37页
        1.3.2 串联亲和纯化技术(tandem affinity purification,TAP)第37-38页
        1.3.3 噬菌体展示技术(phage display)第38-39页
    1.4 研究的目的意义第39-40页
第二章 PLSCR1通过影响NP入核抑制流感病毒复制第40-79页
    2.1 材料第40-41页
        2.1.1 相关试剂第40页
        2.1.2 载体、菌株、病毒株、细胞及酵母文库第40-41页
    2.2 方法第41-52页
        2.2.1 引物设计第41-42页
        2.2.2 质粒的构建第42-44页
        2.2.3 诱饵菌株的构建第44-45页
        2.2.4 酵母文库筛选第45-46页
        2.2.5 酵母回交验证第46页
        2.2.6 细胞转染第46-47页
        2.2.7 免疫共沉淀第47页
        2.2.8 Western Blot第47-48页
        2.2.9 激光共聚焦第48页
        2.2.10 RNAi实验和病毒复制第48-49页
        2.2.11 构建过表达细胞系及病毒复制第49页
        2.2.12 拯救突变WSN病毒第49-50页
        2.2.13 病毒滴定第50页
        2.2.14 双荧光素酶报告基因试验第50-51页
        2.2.15 荧光定量PCR第51页
        2.2.16 数据分析第51-52页
    2.3 实验结果分析第52-72页
        2.3.1 酵母双杂交筛选与A/Anhui/2/05(H5N1) 病毒株NP相互作用的蛋白第52-55页
        2.3.2 PLSCR1蛋白与NP在 293T细胞中相互作用验证及作用区段定位第55-59页
        2.3.3 293T细胞过表达或干扰PLSCR1对流感聚合酶活性的影响第59-60页
        2.3.4 PLSCR1抑制流感病毒的复制第60-68页
        2.3.5 PLSCR1与NP相互作用对病毒复制影响的机制研究第68-72页
    2.4 讨论第72-79页
第三章 两株埃及分离H5N1禽流感病毒的生物学特性研究第79-90页
    3.1 材料第79页
        3.1.1 病毒株与实验动物第79页
        3.1.2 相关试剂第79页
    3.2 方法第79-81页
        3.2.1 病毒全基因组序列测定第79页
        3.2.2 测定病毒的鸡胚半数致死量(EID50)第79-80页
        3.2.3 病毒唾液酸受体结合特性分析第80页
        3.2.4 病毒感染BALB/c小鼠实验第80页
        3.2.5 豚鼠和雪貂病毒感染实验第80-81页
        3.2.6 血清抗体检测第81页
    3.3 实验结果分析第81-87页
        3.3.1 病毒全基因组序列鉴定结果第81页
        3.3.2 病毒唾液酸受体结合特性检测结果第81-82页
        3.3.3 BALB/c小鼠感染实验结果第82-84页
        3.3.3 病毒在豚鼠和雪貂模型复制结果第84页
        3.3.4 病毒在豚鼠和雪貂模型飞沫传播及接触传播实验结果第84-87页
    3.4 讨论第87-90页
第四章 全文结论第90-91页
参考文献第91-106页
致谢第106-108页
作者简历第108-110页
导师简介第110-111页

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