中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
符号说明 | 第11-12页 |
引言 | 第12-15页 |
参考文献 | 第13-15页 |
第一部分:研究T-uc.475是否受到p53的直接调控 | 第15-26页 |
1. 实验材料 | 第15-16页 |
1.1 实验细胞 | 第15页 |
1.2 实验动物 | 第15页 |
1.3 主要实验试剂 | 第15-16页 |
1.4 主要仪器设备 | 第16页 |
2. 实验方法 | 第16-23页 |
2.1 p53ER2细胞荷瘤 | 第16-17页 |
2.2 Trizol提取总RNA | 第17页 |
2.3 实时荧光定量PCR | 第17-19页 |
2.4 CHIP实验 | 第19-23页 |
3. 实验结果 | 第23-24页 |
3.1 不同时间段p53激活后T-uc.475的表达情况 | 第23页 |
3.2 P53Ab可能的结合部位 | 第23-24页 |
4. 讨论 | 第24-25页 |
参考文献 | 第25-26页 |
第二部分:研究T-uc.475在B淋巴瘤中的功能 | 第26-57页 |
1. 实验材料 | 第26-28页 |
1.1 实验细胞 | 第26页 |
1.2 实验动物 | 第26-27页 |
1.3 主要试剂 | 第27页 |
1.4 主要仪器设备 | 第27-28页 |
2. 实验方法 | 第28-48页 |
2.1 引物设计 | 第28页 |
2.2 各种质粒的制备 | 第28-29页 |
2.3 PCR扩增uc.475和shRNA | 第29-30页 |
2.4 扩增产物验证 | 第30-31页 |
2.5 胶回收 | 第31页 |
2.6 TA克隆T-uc.475 | 第31-32页 |
2.7 T4克隆OGT和shlnc-uc.4754hRNA | 第32-34页 |
2.8 T4连接产物转化扩増 | 第34页 |
2.9 提取重组后的质粒 | 第34-35页 |
2.10 质粒酶切验证 | 第35-37页 |
2.11 质粒中提 | 第37页 |
2.12 逆转录病毒的制备和感染淋巴瘤细胞 | 第37-39页 |
2.13 石蜡块中提取RNA | 第39-40页 |
2.14 做实时荧光定量PCR | 第40页 |
2.15 Trizol总RNA提取 | 第40页 |
2.16 细胞全蛋白提取 | 第40页 |
2.17 细胞周期检测 | 第40-42页 |
2.18 细胞凋亡检测(AnnexinV/PI) | 第42页 |
2.19 细胞计数 | 第42-43页 |
2.20 免疫组化(Ki67 増殖,anti-OGT) | 第43页 |
2.21 组织凋亡检测(TUNEL) | 第43-45页 |
2.22 Western Blot | 第45-48页 |
3. 实验结果 | 第48-55页 |
3.1 T-uc.475在细胞和石蜡组织切片中的表达情况 | 第48-49页 |
3.2 T-uc.475在体外细胞培养过程中的作用 | 第49-52页 |
3.3 T-uc.475在小鼠体内瘤组织中的功能 | 第52-53页 |
3.4 T-uc.475和OGT的关系 | 第53-55页 |
4. 讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-57页 |
文献综述 T-UCRs在人类癌症中的功能研究进展 | 第57-69页 |
1. T-UCR的表达和调节机制 | 第58-60页 |
1.1 T-UCR和miRNA的相互作用 | 第59页 |
1.2 T-UCR甲基化 | 第59-60页 |
2. T-UCR与疾病 | 第60-62页 |
2.1 T-UCR与肝癌 | 第60页 |
2.2 T-UCR与前列腺癌 | 第60页 |
2.3 T-UCR与神经癌 | 第60-61页 |
2.4 T-UCR与结肠癌 | 第61页 |
2.5 T-UCR与淋巴瘤 | 第61-62页 |
3. 靶向T-UCR的治疗 | 第62-63页 |
4. 小结 | 第63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70-71页 |