摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
前言 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-21页 |
1 肾型IBV研究进展 | 第13-17页 |
1.1 肾型IBV病毒学概述 | 第13页 |
1.2 肾型IBV流行病学 | 第13-14页 |
1.3 肾型IBV免疫机制 | 第14页 |
1.4 肾型IBV的致病性 | 第14-15页 |
1.5 肾型IBV检测方法研究 | 第15-17页 |
1.5.1 病毒的分离鉴定 | 第15页 |
1.5.2 血清学实验 | 第15-16页 |
1.5.3 分子生物学技术 | 第16-17页 |
2 肾型IBV致鸡痛风的研究进展 | 第17-18页 |
2.1 鸡痛风简介 | 第17页 |
2.2 发病原因 | 第17页 |
2.3 发病机理 | 第17-18页 |
3 尿酸与痛风之间的关系的研究进展 | 第18-20页 |
3.1 尿酸合成增多 | 第19页 |
3.2 尿酸排泄减少 | 第19-20页 |
4 禽类早期胚胎作为实验模型工具的研究进展 | 第20页 |
5 本试验的目的和意义 | 第20-21页 |
第二部分 试验研究 | 第21-60页 |
试验一:肾型IBV感染鸡胚后的临床病理学变化及肝肾组织中病毒含量的检测 | 第21-42页 |
1 材料与方法 | 第21-27页 |
1.1 试验材料 | 第21-22页 |
1.1.1 肾型IBV毒株与鸡胚 | 第21页 |
1.1.2 主要仪器和设备 | 第21页 |
1.1.3 试验耗材 | 第21-22页 |
1.1.4 试验试剂 | 第22页 |
1.2 试验方法 | 第22-27页 |
1.2.1 肾型IBV鸡胚半数致死量(Embryo median lethal dose,ELD50)的测定 | 第22页 |
1.2.2 鸡胚孵化 | 第22页 |
1.2.3 试验鸡胚及分组 | 第22-23页 |
1.2.4 鸡胚攻毒和鸡胚绒毛尿囊膜采血方法 | 第23页 |
1.2.5 样品采集与处理 | 第23-24页 |
1.2.5.1 血液 | 第23页 |
1.2.5.2 鸡胚尿囊液 | 第23-24页 |
1.2.5.3 内脏器官的采集与称重 | 第24页 |
1.2.6 肝、肾功能以及血浆电解质指标的测定 | 第24页 |
1.2.7 血浆抗氧化功能相关指标的测定 | 第24页 |
1.2.8 肝、肾组织中病毒含量的测定 | 第24-26页 |
1.2.8.1 肝脏和肾脏组织总RNA的提取 | 第24-25页 |
1.2.8.2 测定RNA纯度和浓度 | 第25页 |
1.2.8.3 逆转录-聚合酶链反应 | 第25页 |
1.2.8.4 引物设计与合成 | 第25-26页 |
1.2.8.5 N基因片段克隆与质粒标准品的制备 | 第26页 |
1.2.8.6 荧光定量PCR方法的建立 | 第26页 |
1.2.8.7 检测肾型IBV在SPF鸡胚胎肝脏、肾脏中的病毒含量 | 第26页 |
1.2.9 数据处理 | 第26-27页 |
2 试验结果 | 第27-34页 |
2.1 肾型IBV ELD50测定结果 | 第27页 |
2.2 鸡胚胎解剖病变 | 第27-28页 |
2.3 EE比值、AFI、HSI和KSI的变化 | 第28-29页 |
2.4 肾型IBV感染鸡胚胎肝功能指标结果 | 第29-30页 |
2.5 肾型IBV感染鸡胚胎肾功能指标结果 | 第30页 |
2.6 肾型IBV感染鸡胚胎血浆电解质结果 | 第30-31页 |
2.7 肾型IBV感染鸡胚胎血浆抗氧化结果 | 第31页 |
2.8 鸡胚尿囊液中的尿酸含量 | 第31-32页 |
2.9 肾型IBV感染鸡胚胎肝脏和肾脏病毒载量的变化 | 第32-34页 |
2.9.1 标准质粒浓度的计算 | 第32页 |
2.9.2 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第32-33页 |
2.9.3 肾型IBV在SPF鸡胚肝脏和肾脏中的动态分布 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-41页 |
3.1 肾型IBV感染鸡胚对其肝肾发育的影响 | 第34-35页 |
3.2 肾型IBV感染鸡胚对其肝功能的影响 | 第35-36页 |
3.3 肾型IBV感染鸡胚对其肾功能的影响 | 第36页 |
3.4 肾型IBV感染鸡胚胎对其血浆电解质浓度的影响 | 第36-37页 |
3.5 肾型IBV感染鸡胚对其血浆抗氧化功能的影响 | 第37-39页 |
3.6 肾型IBV感染鸡胚对其尿酸代谢的影响 | 第39页 |
3.7 肾型IBV感染鸡胚肝肾组织中病毒含量的变化 | 第39-41页 |
4 结论 | 第41-42页 |
试验二:不同组织嗜性IBV对鸡胚胎肝肾损伤及其尿酸代谢的研究 | 第42-60页 |
1 材料与方法 | 第42-44页 |
1.1 试验材料 | 第42页 |
1.1.1 IBV毒株与鸡胚 | 第42页 |
1.1.2 主要仪器和试剂(参考试验一 1.1.2) | 第42页 |
1.1.3 试验耗材(参考试验一 1.1.3) | 第42页 |
1.2 试验方法 | 第42-44页 |
1.2.1 呼吸型IBV鸡胚半数致死量(ELD50)的测定(参考试验一的 1.2.1) | 第42页 |
1.2.2 鸡胚孵化 | 第42-43页 |
1.2.3 试验鸡胚及分组 | 第43页 |
1.2.4 鸡胚攻毒和鸡胚绒毛尿囊膜采血方法(参考试验一 1.2.4) | 第43页 |
1.2.5 样品采集与处理 | 第43页 |
1.2.5.1 血液 | 第43页 |
1.2.5.2 鸡胚尿囊液 | 第43页 |
1.2.5.3 肝肾器官的采集与称重(同试验一的 1.2.5.3) | 第43页 |
1.2.6 肝、肾功能以及血浆电解质指标的测定(参考试验一 1.2.6) | 第43页 |
1.2.7 血浆抗氧化功能相关指标的测定(参考试验一 1.2.7) | 第43页 |
1.2.8 尿囊液体积及其尿酸含量的测定 | 第43-44页 |
1.2.9 数据处理 | 第44页 |
2 试验结果 | 第44-60页 |
2.1 呼吸型IBV ELD50测定结果 | 第44页 |
2.2 鸡胚胎解剖病变 | 第44-45页 |
2.3 肝重和肾重的变化 | 第45页 |
2.4 EE比值、HSI和KSI的变化 | 第45-46页 |
2.5 肝功能指标的变化 | 第46-49页 |
2.5.1 血浆酶活性的变化 | 第46-48页 |
2.5.2 血浆蛋白和总胆红素含量的变化 | 第48-49页 |
2.6 肾功能指标的变化 | 第49-50页 |
2.6.1 血浆CR含量的变化 | 第49-50页 |
2.6.2 血浆BUN含量的变化 | 第50页 |
2.6.3 血浆UA含量的变化 | 第50页 |
2.7 血浆电解质的变化 | 第50-53页 |
2.8 抗氧化功能指标的变化 | 第53-54页 |
2.9 尿囊液体积及尿酸排泄的变化 | 第54-55页 |
2.9.1 尿囊液体积的变化 | 第54-55页 |
2.9.2 尿酸排泄的变化 | 第55页 |
3 讨论 | 第55-59页 |
3.1 不同IBV感染鸡胚对其肝肾发育指标的影响 | 第56页 |
3.2 不同IBV感染鸡胚对其肝功能的影响 | 第56-57页 |
3.3 不同IBV感染鸡胚对其肾功能的影响 | 第57页 |
3.4 不同IBV感染鸡胚对其血浆电解质的影响 | 第57-58页 |
3.5 不同IBV感染鸡胚对其抗氧化功能的影响 | 第58页 |
3.6 不同IBV感染鸡胚对其尿囊液体积及UA排泄的影响 | 第58-59页 |
4 结论 | 第59-60页 |
全文结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第69页 |