摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第11-13页 |
第一章 引言 | 第13-26页 |
1.1 衰老概述 | 第13-19页 |
1.1.1 植株衰老的启动 | 第14-16页 |
1.1.2 植株衰老的生理指标 | 第16-17页 |
1.1.3 衰老的分子机制 | 第17-19页 |
1.1.4 源库关系和衰老 | 第19页 |
1.2 叶片衰老分子机制研究进展 | 第19-22页 |
1.2.1 转录因子 | 第19-20页 |
1.2.2 蛋白酶相关基因 | 第20-21页 |
1.2.3 代谢降解相关基因 | 第21-22页 |
1.2.4 防御反应相关基因 | 第22页 |
1.3 植物糖基转移酶研究进展 | 第22-25页 |
1.3.1 激素的平衡类相关基因 | 第23页 |
1.3.2 糖的合成相关基因 | 第23页 |
1.3.3 逆境胁迫相关基因 | 第23-24页 |
1.3.4 植株脱毒反应相关基因 | 第24页 |
1.3.5 与其它生理过程相关基因 | 第24页 |
1.3.6 水稻糖基转移酶研究 | 第24-25页 |
1.4 本研究目的和意义 | 第25-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-37页 |
2.1 表型分析方法 | 第26-29页 |
2.1.1 实验材料与田间种植 | 第26页 |
2.1.2 农艺性状调查 | 第26页 |
2.1.3 叶绿素含量测定 | 第26页 |
2.1.4 植物总RNA提取 | 第26-27页 |
2.1.5 基因表达分析 | 第27页 |
2.1.6 透射电镜(TEM)观察 | 第27-28页 |
2.1.7 荧光显微镜观察 | 第28页 |
2.1.8 丙二醛(MDA)含量测定 | 第28页 |
2.1.9 过氧化氢(H_2O_2)含量测定 | 第28页 |
2.1.10 超氧化物歧化酶(SOD)测定 | 第28页 |
2.1.11 DAB染色反应 | 第28-29页 |
2.2 图位克隆与转基因验证 | 第29-32页 |
2.2.1 实验材料与田间种植 | 第29页 |
2.2.2 DNA提取 | 第29页 |
2.2.3 图位克隆 | 第29-30页 |
2.2.4 候选基因预测 | 第30页 |
2.2.5 质粒提取 | 第30-31页 |
2.2.6 农杆菌转化体系 | 第31页 |
2.2.7 转基因功能验证 | 第31-32页 |
2.2.8 转基因阳性植株的鉴定 | 第32页 |
2.3 功能分析 | 第32-37页 |
2.3.1 基因时空表达和GUS染色 | 第32页 |
2.3.2 树脂切片 | 第32-33页 |
2.3.3 原位杂交 | 第33-35页 |
2.3.4 亚细胞定位 | 第35页 |
2.3.5 可溶性糖测定 | 第35页 |
2.3.6 淀粉含量测定 | 第35-36页 |
2.3.7 ABA含量测定 | 第36-37页 |
第三章 结果 | 第37-56页 |
3.1 水稻突变体pls2的表型分析 | 第37-39页 |
3.2 突变体pls2的透射电镜观察 | 第39-41页 |
3.3 衰老和光合作用相关基因的表达量在pls2中下调 | 第41-42页 |
3.4 突变体pls2积累较多的活性氧 | 第42-43页 |
3.5 早衰基因PLS2的克隆 | 第43-47页 |
3.5.1 PLS2基因精细定位 | 第43-45页 |
3.5.2 定位区间的候选基因鉴定 | 第45页 |
3.5.3 PLS2转基因验证 | 第45-47页 |
3.6 PLS2蛋白进化树分析 | 第47-48页 |
3.7 早衰基因PLS2表达模式分析 | 第48-50页 |
3.8 PLS2蛋白的亚细胞定位 | 第50-51页 |
3.9 早衰突变体pls2积累较多的蔗糖 | 第51-52页 |
3.10 PLS2基因突变影响蔗糖转运 | 第52-53页 |
3.11 PLS2突变影响ABA合成与信号转导 | 第53-56页 |
第四章 讨论 | 第56-59页 |
4.1 突变体pls2提前进入衰老进程 | 第56页 |
4.2 PLS2编码未知底物的糖基转移酶 | 第56-57页 |
4.3 PLS2影响糖的合成、转运及ABA的合成与信号转导 | 第57-59页 |
第五章 全文结论 | 第59-61页 |
5.1 pls2为水稻叶片衰老突变体 | 第59页 |
5.2 pls2植株积累了较多的活性氧 | 第59页 |
5.3 PLS2编码底物未知的糖基转移酶 | 第59-60页 |
5.4 PLS2在植株各组织中均有表达,且定位于内质网 | 第60页 |
5.5 pls2植株中积累了较多的可溶性糖 | 第60页 |
5.6 PLS2突变影响了植株体内的糖转运 | 第60页 |
5.7 ABA信号和合成相关基因的表达量在pls2中均下降 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-78页 |
附录 | 第78-85页 |
致谢 | 第85-87页 |
个人简介 | 第87页 |