摘要 | 第1-14页 |
Abstract | 第14-18页 |
第一章 引言 | 第18-28页 |
1 植物体胚发生 | 第18-20页 |
·植物体胚发生的研究进展 | 第18-19页 |
·植物体细胞胚发生过程中基因表达的研究进展 | 第19-20页 |
2. 龙眼体胚发生过程中的细胞程序性死亡 | 第20页 |
3 植物细胞程序性死亡 | 第20-26页 |
·植物细胞程序性死亡的途径 | 第21页 |
·植物细胞程序性死亡相关蛋白 | 第21-26页 |
4 本研究意义及主要内容 | 第26-28页 |
·本研究意义 | 第26-27页 |
·主要研究内容 | 第27-28页 |
第二章 龙眼体胚发生过程中PCD 相关基因CP、COXVb 和Caspase 的cDNA 克隆 | 第28-64页 |
第一节 龙眼胚性愈伤组织总RNA 的提取 | 第28-30页 |
1 材料与方法 | 第28-29页 |
·材料 | 第28-29页 |
2 结果与分析 | 第29-30页 |
第二节 龙眼体胚发生过程中PCD 相关基因CP cDNA 克隆 | 第30-43页 |
1 材料与方法 | 第31-36页 |
·材料 | 第31页 |
·方法 | 第31-36页 |
2 结果与分析 | 第36-42页 |
·龙眼胚性愈伤组织CP cDNA 保守区的克隆 | 第36-37页 |
·龙眼胚性愈伤组织CP 的cDNA 的3′RACE 克隆结果 | 第37-38页 |
·龙眼胚性愈伤组织 CP 的 cDNA 的 5' RACE 克隆结果 | 第38-39页 |
·龙眼胚性愈伤组织CP 基因全长序列拼接结果 | 第39-40页 |
·龙眼胚性愈伤组织CP 基因序列分析 | 第40-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
·克隆龙眼胚性愈伤组织CP 基因的难点分析 | 第42页 |
·龙眼胚性愈伤组织CP 可能是papain 蛋白家族成员 | 第42-43页 |
第三节 龙眼体胚发生过程中PCD 相关基因COXVb cDNA 克隆 | 第43-52页 |
1 材料与方法 | 第43-47页 |
·材料 | 第43页 |
·方法 | 第43-47页 |
2 结果与分析 | 第47-52页 |
·龙眼胚性愈伤组织 COX Vb 的 cDNA 的保守区的克隆 | 第47-48页 |
·龙眼胚性愈伤组织 COX Vb 基因 cDNA 的 5' RACE 的克隆 | 第48-49页 |
·龙眼 EC 中 COX Vb 基因 cDNA 全长序列拼接 | 第49-50页 |
·龙眼胚性愈伤组织中COX Vb 基因序列分析 | 第50-52页 |
3 讨论 | 第52页 |
第四节 龙眼体胚发生过程中PCD 相关基因Caspase cDNA 克隆 | 第52-64页 |
1 材料与方法 | 第53-57页 |
·材料 | 第53页 |
·方法 | 第53-57页 |
2 结果与分析 | 第57-62页 |
·龙眼胚性愈伤组织Caspase 的cDNA 的保守区的克隆 | 第57-58页 |
·龙眼胚性愈伤组织 Caspase 的 cDNA 的 3' RACE 的克隆 | 第58-59页 |
·龙眼胚性愈伤组织 Caspase 基因 cDNA 的 5' RACE 的克隆 | 第59-60页 |
·龙眼EC 中Caspase 基因cDNA 全长序列拼接 | 第60-61页 |
·龙眼胚性愈伤组织中Caspase 基因序列分析 | 第61-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
·龙眼Caspase 和Caspase 家族的关系 | 第62-63页 |
·关于Caspase 与龙眼体胚发生过程中褐变的关系 | 第63-64页 |
第三章 龙眼体胚发生过程中PCD 相关基因的生物信息学分析 | 第64-98页 |
第一节 龙眼体胚发生过程中 PCD 相关基因 CP 生物信息学分析 | 第64-76页 |
1. 材料与方法 | 第64-65页 |
·材料 | 第64页 |
·方法 | 第64-65页 |
2 结果与分析 | 第65-74页 |
·CP 蛋白质理化性质预测与分析 | 第65-68页 |
·同源蛋白质家族比较分析 | 第68-69页 |
·龙眼CP 信号肽的预测和分析 | 第69-70页 |
·龙眼CP 蛋白的跨膜结构预测与分析 | 第70-71页 |
·龙眼CP 蛋白卷曲螺旋结构的预测与分析 | 第71页 |
·龙眼CP 蛋白质二级结构预测与分析 | 第71-72页 |
·龙眼CP 磷酸化位点预测与分析 | 第72-73页 |
·龙眼CP 其他功能点预测和分析 | 第73页 |
·龙眼CP 蛋白三维结构的预测和分析 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-76页 |
·生物信息学推测龙眼CP 蛋白的功能 | 第74-75页 |
·龙眼 CP 蛋白信号肽 | 第75页 |
·生物信息学推测龙眼CP 蛋白参与调控细胞衰老和死亡的机制 | 第75-76页 |
第二节 龙眼胚性愈伤组织 COXVb cDNA 生物信息学分析 | 第76-86页 |
1. 材料与方法 | 第76-77页 |
·材料 | 第76页 |
·方法 | 第76-77页 |
2 结果与分析 | 第77-84页 |
·COXVb 蛋白质理化性质预测与分析 | 第77-79页 |
·同源蛋白质家族比较分析 | 第79-80页 |
·龙眼COXVb 信号肽的预测和分析 | 第80页 |
·龙眼COXVb 蛋白的跨膜结构预测与分析 | 第80-81页 |
·龙眼COXVb 蛋白卷曲螺旋结构的预测和分析 | 第81-82页 |
·龙眼COXVb 蛋白质二级结构预测与分析 | 第82页 |
·龙眼COXVb 磷酸化位点预测与分析 | 第82-83页 |
·龙眼COXVb 保守结构域与功能域分析 | 第83-84页 |
·龙眼COXVb 其他功能点预测和分析 | 第84页 |
·龙眼COXVb 三维结构的预测和分析 | 第84页 |
3 讨论 | 第84-86页 |
·生物信息学分析龙眼COXVb 蛋白的作用 | 第84-85页 |
·生物信息学分析龙眼COXVb 对PCD 的调控机制 | 第85-86页 |
第三节 龙眼胚性愈伤组织Caspase 基因cDNA 生物信息学分析 | 第86-98页 |
1. 材料与方法 | 第86-87页 |
·材料 | 第86页 |
·方法 | 第86-87页 |
2 结果与分析 | 第87-95页 |
·Caspase 蛋白质理化性质预测与分析 | 第87-89页 |
·同源蛋白质家族比较分析 | 第89-90页 |
·龙眼Caspase 蛋白信号肽的预测和分析 | 第90-91页 |
·龙眼Caspase 蛋白的跨膜结构预测与分析 | 第91页 |
·龙眼Caspase 蛋白卷曲螺旋结构的预测与分析 | 第91-92页 |
·龙眼Caspase 蛋白二级结构预测与分析 | 第92-93页 |
·龙眼Caspase 蛋白磷酸化位点预测与分析 | 第93-94页 |
·龙眼蛋白Caspase 蛋白保守结构域分析 | 第94页 |
·龙眼Caspase 其他功能点预测和分析 | 第94-95页 |
·龙眼Caspase 蛋白三维结构的预测和分析 | 第95页 |
3 讨论 | 第95-98页 |
·龙眼 Caspase 蛋白与 caspase 家族的关系 | 第95-96页 |
·生物信息学准确性和龙眼Caspase 蛋白亚细胞定位 | 第96页 |
·龙眼Caspase 蛋白活化途径 | 第96-98页 |
第四章 龙眼体胚发生过程中 CP、COX Vb 和 Caspase 基因表的荧光定量 PCR 分析 | 第98-118页 |
第一节 龙眼体胚发生相关基因 CP 荧光定量 PCR 表达分析 | 第99-107页 |
1 材料和方法 | 第99-102页 |
·材料 | 第99页 |
·主要试剂和仪器 | 第99页 |
·方法 | 第99-102页 |
2 结果与分析 | 第102-106页 |
·龙眼体胚发生过程中不同阶段胚性培养物材料的获得 | 第102-103页 |
·龙眼体胚发生不同阶段培养物总 RNA 提取 | 第103页 |
·荧光实时PCR 扩增参照基因和CP 基因的参数分析 | 第103-105页 |
·龙眼体胚发生过程中CP 基因相对定量表达分析 | 第105-106页 |
3 讨论 | 第106-107页 |
·CP 在龙眼体胚发生过程中的作用 | 第106页 |
·CP 在龙眼体胚的成熟胚中可能有同工酶基因表达 | 第106-107页 |
第二节 龙眼体胚发生相关基因 COXVb 表达分析 | 第107-112页 |
1 材料和方法 | 第107-109页 |
·材料 | 第107页 |
·主要试剂和仪器 | 第107页 |
·方法 | 第107-109页 |
2 结果与分析 | 第109-111页 |
·荧光实时PCR 扩增参照基因和COXVb 基因的参数分析 | 第109-111页 |
·龙眼体胚发生过程中COXVb 基因相对定量表达分析 | 第111页 |
3 讨论 | 第111-112页 |
第三节 龙眼体胚发生相关基因 Caspase 表达分析 | 第112-118页 |
1 材料和方法 | 第112-114页 |
·材料 | 第112页 |
·主要试剂和仪器 | 第112页 |
·方法 | 第112-114页 |
2 结果与分析 | 第114-116页 |
·荧光实时PCR 扩增参照基因和Caspase 基因的参数分析 | 第114-115页 |
·龙眼体胚发生过程中Caspase 基因相对定量表达分析 | 第115-116页 |
3 讨论 | 第116-118页 |
·Caspase 在龙眼体胚发生过程中的作用 | 第116-117页 |
·COX Vb、Caspase 和植物PCD 的关系 | 第117-118页 |
第五章 小结 | 第118-121页 |
1 本研究的主要结论 | 第118-121页 |
·龙眼体胚发生过程中PCD 相关基因CP | 第118页 |
·龙眼体胚发生过程中PCD 相关基因COXVb | 第118-119页 |
·龙眼体胚发生过程中PCD 相关基因Caspase | 第119-121页 |
参考文献 | 第121-126页 |
附录 | 第126-132页 |
附录1 龙眼CP 基因(cDNA)序列登录GenBank 信息 | 第126-128页 |
附录2 龙眼COXVb 基因(cDNA)序列登录GenBank 信息 | 第128-130页 |
附录3 龙眼Caspase 基因(cDNA)序列登录GenBank 信息 | 第130-132页 |
致谢 | 第132页 |