摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 研究背景 | 第11-12页 |
1.1.1 牛肉营养价值 | 第11页 |
1.1.2 牛肉市场需求量 | 第11-12页 |
1.2 肌肉发育和肌生成分子调控的研究进展 | 第12-14页 |
1.2.1 骨骼肌发育 | 第12页 |
1.2.2 肌生成分子调控 | 第12-14页 |
1.3 Rybp基因研究进展 | 第14-15页 |
1.3.1 Rybp基因简介 | 第14页 |
1.3.2 Rybp基因在肌肉上的研究 | 第14-15页 |
1.4 基因功能的研究方法 | 第15-16页 |
1.4.1 腺病毒AdEasy表达系统 | 第15页 |
1.4.2 转录组测序(RNA-seq) | 第15-16页 |
1.5 本研究的目标及意义 | 第16-17页 |
1.6 本研究技术路线 | 第17-18页 |
第二章 牛Rybp基因组织表达特性分析 | 第18-26页 |
2.1 材料与方法 | 第18-19页 |
2.1.1 试验材料 | 第18页 |
2.1.2 试验方法 | 第18-19页 |
2.2 结果 | 第19-24页 |
2.2.1 Real-time PCR引物的检测 | 第19-20页 |
2.2.2 候选内参基因在不同组织中达到峰值循环数Ct值 | 第20-21页 |
2.2.3 内参基因表达稳定性评价 | 第21-22页 |
2.2.4 Rybp基因在秦川牛不同组织中表达特性分析 | 第22-24页 |
2.3 讨论 | 第24-25页 |
2.4 小结 | 第25-26页 |
第三章 秦川牛Rybp基因过表达载体构建 | 第26-32页 |
3.1 材料和方法 | 第26-27页 |
3.1.1 试验材料 | 第26页 |
3.1.2 试验方法 | 第26-27页 |
3.2 结果 | 第27-30页 |
3.2.1 牛Rybp基因CDS区克隆 | 第27-28页 |
3.2.2 穿梭载体pAdTrack-CMV-Rybp鉴定 | 第28页 |
3.2.3 骨架载体pAdEasy-Rybp鉴定 | 第28-29页 |
3.2.4 Rybp基因过表达载体病毒的包装、扩增与滴度测定 | 第29-30页 |
3.3 讨论 | 第30-31页 |
3.4 小结 | 第31-32页 |
第四章 Rybp基因抑制牛成肌细胞分化 | 第32-48页 |
4.1 材料与方法 | 第32-35页 |
4.1.1 试验材料 | 第32页 |
4.1.2 试验方法 | 第32-35页 |
4.2 结果 | 第35-45页 |
4.2.1 牛成肌细胞的分离培养 | 第35-36页 |
4.2.2 牛成肌细胞的分化培养 | 第36页 |
4.2.3 重组腺病毒pAd-Rybp感染复数MOI值的确定 | 第36-37页 |
4.2.4 过表达Rybp基因对牛成肌细胞分化的表型影响 | 第37-38页 |
4.2.5 RNA-seq测序 | 第38-45页 |
4.3 讨论 | 第45-47页 |
4.3.1 AD-Rybp重组腺病毒感染牛成肌细胞表型差异 | 第46页 |
4.3.2 RNA-seq数据分析 | 第46-47页 |
4.4 小结 | 第47-48页 |
第五章 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
附录 | 第55-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65页 |