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平邑甜茶VPE及MhVPEγ基因对几种非生物胁迫的响应

英文缩写符号及中英文对照表第1-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
1 前言第12-18页
   ·植物液泡加工酶类型和功能第12-14页
     ·液泡加工酶的发现第12-13页
     ·VPE的类型第13页
     ·VPE的结构及活化第13-14页
     ·VPE的功能第14页
   ·果树对非生物胁迫的反应第14-16页
   ·本研究的目的与意义第16-18页
2 材料和方法第18-24页
   ·试验材料第18页
     ·植物材料第18页
     ·酶及生化试剂第18页
   ·试验处理第18-20页
     ·平邑甜茶的处理第18-19页
     ·拟南芥的处理第19-20页
     ·转基因植株鉴定第20-21页
     ·转MhVPEγ正义基因拟南芥卡那霉素培养基筛选及PCR鉴定第20页
     ·转pFGC5941-RNAi-MhVPEγ干扰载体拟南芥草胺磷培养基筛选及PCR鉴定第20页
     ·拟南芥RNA提取及半定量RT-PCR第20-21页
   ·指标测定方法第21-24页
     ·实时荧光定量PCR第21-22页
       ·平邑甜茶实时荧光定量PCR第21页
       ·拟南芥实时荧光定量PCR第21-22页
     ·VPE活性的检测第22页
     ·类caspases蛋白酶活性的检测第22页
     ·细胞死亡数量及凋亡率的测定第22-23页
     ·根系活力、丙二醛和ATP含量的测定第23页
     ·H_2O_2含量和叶绿素含量的测定第23页
     ·抗氧化酶活性的测定第23页
     ·拟南芥幼苗生长量的测量第23-24页
3.结果和分析第24-56页
   ·平邑甜茶根系VPE与细胞死亡相关指标的变化规律第24-26页
     ·平邑甜茶吸收根和延长根VPE活性的变化第24页
     ·平邑甜茶吸收根和延长根根系活力变化第24-25页
     ·平邑甜茶吸收根和延长根细胞死亡数量变化第25页
     ·平邑甜茶吸收根和延长根细胞ATP含量的变化第25-26页
     ·平邑甜茶吸收根和延长根MhVPEγ表达量的变化第26页
   ·H_2O_2胁迫对平邑甜茶根系VPE与细胞死亡的影响第26-32页
     ·H_2O_2对平邑甜茶根系活力和MDA含量的影响第26-27页
     ·H_2O_2对平邑甜茶根系ATP含量和细胞死亡的影响第27页
     ·H_2O_2对平邑甜茶根系VPE活性和MhVPEγ表达的影响第27-28页
     ·外源VPE抑制剂对H_2O_2胁迫下根系活力和MDA含量的影响第28页
     ·外源VPE抑制剂对H_2O_2胁迫下ATP含量和细胞死亡数量的影响第28-30页
     ·VPE抑制剂对H_2O_2胁迫下根系VPE活性和MhVPEγ表达的影响第30页
     ·平邑甜茶VPE和类caspases活性的相关性分析第30-32页
   ·高温胁迫对平邑甜茶VPE与细胞死亡的影响第32-35页
     ·高温胁迫下平邑甜茶VPE活性及MhVPEγ表达变化第32-33页
     ·高温胁迫下平邑甜茶细胞死亡数量的变化第33-34页
     ·高温胁迫下平邑甜茶VPE活性及MhVPEγ表达的器官差异第34-35页
     ·高温胁迫下平邑甜茶细胞死亡数量的的器官差异第35页
   ·转MhVPEγ基因拟南芥的鉴定及其表型分析第35-40页
     ·转MhVPEγ拟南芥的鉴定第35-37页
     ·转MhVPEγ拟南芥的表型分析第37-40页
   ·转MhVPEγ基因拟南芥对H_2O_2胁迫的反应第40-44页
     ·H_2O_2胁迫下拟南芥叶片细胞死亡特性第40-42页
     ·H_2O_2胁迫下转基因拟南芥叶片H_2O_2及MDA含量的变化第42-43页
     ·H_2O_2胁迫下转基因拟南芥叶片抗氧化酶活性的变化第43-44页
     ·H_2O_2胁迫下转基因拟南芥叶片VPE和类caspase-1 活性的变化第44页
     ·H_2O_2胁迫下转基因拟南芥叶片MhVPEγ表达水平的变化第44页
   ·转MhVPEγ基因拟南芥对高温胁迫的反应第44-49页
     ·高温胁迫下转基因拟南芥叶片VPE活性及MhVPEγ表达水平的变化第45-46页
     ·高温胁迫下转MhVPEγ拟南芥的表型分析第46-47页
     ·高温胁迫下转基因拟南芥叶片MDA含量及H_2O_2含量的变化第47-48页
     ·高温胁迫下转基因拟南芥细胞死亡数量和凋亡率的变化第48-49页
   ·转MhVPEγ基因拟南芥对干旱胁迫的反应第49-53页
     ·转基因拟南芥在干旱胁迫下的直观反应第49页
     ·干旱胁迫对转MhVPEγ基因拟南芥和野生型植株开花时间的影响第49-50页
     ·干旱胁迫下转基因拟南芥叶片细胞活性的变化第50-51页
     ·干旱胁迫下转基因拟南芥叶片中MDA含量及H_2O_2含量的变化第51-52页
     ·干旱胁迫下转基因拟南芥ATP含量的变化第52页
     ·干旱胁迫下转基因拟南芥VPE活性及MhVPEγ表达水平的变化第52-53页
   ·转MhVPEγ基因拟南芥对NaCl和重金属胁迫的反应第53-56页
     ·转MhVPEγ基因拟南芥对NaCl胁迫的反应第53-54页
     ·转MhVPEγ基因拟南芥对CdSO4胁迫的反应第54-56页
4.讨论第56-62页
   ·平邑甜茶液泡加工酶及其基因与细胞死亡的相关性第56-57页
   ·平邑甜茶MhVPEγ基因对氧化胁迫的响应第57-58页
   ·过量表达MhVPEγ基因促进高温、NaCl及重金属胁迫下转基因拟南芥的细胞死亡第58-60页
   ·异源表达平邑甜茶MhVPEγ对拟南芥发育进程及其抗干旱性的影响第60-62页
5.结论第62-63页
参考文献第63-70页
致谢第70-71页
攻读硕士学位期间发表及投寄的论文情况第71页

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