英文缩写符号及中英文对照表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-18页 |
·植物液泡加工酶类型和功能 | 第12-14页 |
·液泡加工酶的发现 | 第12-13页 |
·VPE的类型 | 第13页 |
·VPE的结构及活化 | 第13-14页 |
·VPE的功能 | 第14页 |
·果树对非生物胁迫的反应 | 第14-16页 |
·本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
2 材料和方法 | 第18-24页 |
·试验材料 | 第18页 |
·植物材料 | 第18页 |
·酶及生化试剂 | 第18页 |
·试验处理 | 第18-20页 |
·平邑甜茶的处理 | 第18-19页 |
·拟南芥的处理 | 第19-20页 |
·转基因植株鉴定 | 第20-21页 |
·转MhVPEγ正义基因拟南芥卡那霉素培养基筛选及PCR鉴定 | 第20页 |
·转pFGC5941-RNAi-MhVPEγ干扰载体拟南芥草胺磷培养基筛选及PCR鉴定 | 第20页 |
·拟南芥RNA提取及半定量RT-PCR | 第20-21页 |
·指标测定方法 | 第21-24页 |
·实时荧光定量PCR | 第21-22页 |
·平邑甜茶实时荧光定量PCR | 第21页 |
·拟南芥实时荧光定量PCR | 第21-22页 |
·VPE活性的检测 | 第22页 |
·类caspases蛋白酶活性的检测 | 第22页 |
·细胞死亡数量及凋亡率的测定 | 第22-23页 |
·根系活力、丙二醛和ATP含量的测定 | 第23页 |
·H_2O_2含量和叶绿素含量的测定 | 第23页 |
·抗氧化酶活性的测定 | 第23页 |
·拟南芥幼苗生长量的测量 | 第23-24页 |
3.结果和分析 | 第24-56页 |
·平邑甜茶根系VPE与细胞死亡相关指标的变化规律 | 第24-26页 |
·平邑甜茶吸收根和延长根VPE活性的变化 | 第24页 |
·平邑甜茶吸收根和延长根根系活力变化 | 第24-25页 |
·平邑甜茶吸收根和延长根细胞死亡数量变化 | 第25页 |
·平邑甜茶吸收根和延长根细胞ATP含量的变化 | 第25-26页 |
·平邑甜茶吸收根和延长根MhVPEγ表达量的变化 | 第26页 |
·H_2O_2胁迫对平邑甜茶根系VPE与细胞死亡的影响 | 第26-32页 |
·H_2O_2对平邑甜茶根系活力和MDA含量的影响 | 第26-27页 |
·H_2O_2对平邑甜茶根系ATP含量和细胞死亡的影响 | 第27页 |
·H_2O_2对平邑甜茶根系VPE活性和MhVPEγ表达的影响 | 第27-28页 |
·外源VPE抑制剂对H_2O_2胁迫下根系活力和MDA含量的影响 | 第28页 |
·外源VPE抑制剂对H_2O_2胁迫下ATP含量和细胞死亡数量的影响 | 第28-30页 |
·VPE抑制剂对H_2O_2胁迫下根系VPE活性和MhVPEγ表达的影响 | 第30页 |
·平邑甜茶VPE和类caspases活性的相关性分析 | 第30-32页 |
·高温胁迫对平邑甜茶VPE与细胞死亡的影响 | 第32-35页 |
·高温胁迫下平邑甜茶VPE活性及MhVPEγ表达变化 | 第32-33页 |
·高温胁迫下平邑甜茶细胞死亡数量的变化 | 第33-34页 |
·高温胁迫下平邑甜茶VPE活性及MhVPEγ表达的器官差异 | 第34-35页 |
·高温胁迫下平邑甜茶细胞死亡数量的的器官差异 | 第35页 |
·转MhVPEγ基因拟南芥的鉴定及其表型分析 | 第35-40页 |
·转MhVPEγ拟南芥的鉴定 | 第35-37页 |
·转MhVPEγ拟南芥的表型分析 | 第37-40页 |
·转MhVPEγ基因拟南芥对H_2O_2胁迫的反应 | 第40-44页 |
·H_2O_2胁迫下拟南芥叶片细胞死亡特性 | 第40-42页 |
·H_2O_2胁迫下转基因拟南芥叶片H_2O_2及MDA含量的变化 | 第42-43页 |
·H_2O_2胁迫下转基因拟南芥叶片抗氧化酶活性的变化 | 第43-44页 |
·H_2O_2胁迫下转基因拟南芥叶片VPE和类caspase-1 活性的变化 | 第44页 |
·H_2O_2胁迫下转基因拟南芥叶片MhVPEγ表达水平的变化 | 第44页 |
·转MhVPEγ基因拟南芥对高温胁迫的反应 | 第44-49页 |
·高温胁迫下转基因拟南芥叶片VPE活性及MhVPEγ表达水平的变化 | 第45-46页 |
·高温胁迫下转MhVPEγ拟南芥的表型分析 | 第46-47页 |
·高温胁迫下转基因拟南芥叶片MDA含量及H_2O_2含量的变化 | 第47-48页 |
·高温胁迫下转基因拟南芥细胞死亡数量和凋亡率的变化 | 第48-49页 |
·转MhVPEγ基因拟南芥对干旱胁迫的反应 | 第49-53页 |
·转基因拟南芥在干旱胁迫下的直观反应 | 第49页 |
·干旱胁迫对转MhVPEγ基因拟南芥和野生型植株开花时间的影响 | 第49-50页 |
·干旱胁迫下转基因拟南芥叶片细胞活性的变化 | 第50-51页 |
·干旱胁迫下转基因拟南芥叶片中MDA含量及H_2O_2含量的变化 | 第51-52页 |
·干旱胁迫下转基因拟南芥ATP含量的变化 | 第52页 |
·干旱胁迫下转基因拟南芥VPE活性及MhVPEγ表达水平的变化 | 第52-53页 |
·转MhVPEγ基因拟南芥对NaCl和重金属胁迫的反应 | 第53-56页 |
·转MhVPEγ基因拟南芥对NaCl胁迫的反应 | 第53-54页 |
·转MhVPEγ基因拟南芥对CdSO4胁迫的反应 | 第54-56页 |
4.讨论 | 第56-62页 |
·平邑甜茶液泡加工酶及其基因与细胞死亡的相关性 | 第56-57页 |
·平邑甜茶MhVPEγ基因对氧化胁迫的响应 | 第57-58页 |
·过量表达MhVPEγ基因促进高温、NaCl及重金属胁迫下转基因拟南芥的细胞死亡 | 第58-60页 |
·异源表达平邑甜茶MhVPEγ对拟南芥发育进程及其抗干旱性的影响 | 第60-62页 |
5.结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读硕士学位期间发表及投寄的论文情况 | 第71页 |