中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
1.布鲁氏菌研究进展 | 第13-17页 |
·布鲁氏菌生物学特征 | 第13页 |
·布鲁氏菌毒力因子 | 第13-15页 |
·布鲁氏菌在宿主细胞中的生存机制 | 第15-17页 |
2. 细胞自噬与病原菌感染的研究进展 | 第17-23页 |
·细胞自噬 | 第17-18页 |
·细胞自噬与细菌的关系 | 第18-23页 |
3. 布鲁氏菌与细胞自噬的关系 | 第23-24页 |
第二章 实验研究 | 第24-68页 |
实验一 Atg5在羊种布鲁氏菌 16M诱导的非典型自噬中的研究 | 第24-45页 |
1 材料与方法 | 第25-36页 |
·材料 | 第25页 |
·方法 | 第25-36页 |
2 结果 | 第36-43页 |
·总RNA的提取结果 | 第36页 |
·获取Atg5基因 | 第36-37页 |
·重组pMD19-T-Atg5载体的酶切鉴定 | 第37-38页 |
·重组慢病毒质粒pLEX-Atg5载体的双酶切 | 第38页 |
·QRT-PCR检测RAW264.7-LC3-GFP细胞中Atg5的表达 | 第38-41页 |
·激光共聚焦检测RAW264.7-LC3-GFP中LC3与溶酶体共定位情况 | 第41-42页 |
·过表达Atg5 对布鲁氏菌16M胞内生存的影响 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-44页 |
4 小结 | 第44-45页 |
实验二 AIR在羊种布鲁氏菌 16M诱导的非典型自噬中的研究 | 第45-68页 |
1. 材料与方法 | 第46-55页 |
·材料 | 第46页 |
·方法 | 第46-55页 |
2 结果与分析 | 第55-66页 |
·AIR干扰载体的构建与鉴定 | 第55页 |
·荧光显微镜观察细胞转染后效果 | 第55-56页 |
·QRT-PCR检测RAW264.7 细胞中AIR的表达 | 第56-57页 |
·16M侵染干扰后巨噬细胞总RNA的提取 | 第57-58页 |
·QRT-PCR检测侵染后p62、LC3I/II在mRNA水平上的变化 | 第58-59页 |
·siRNA-AIR对侵染后p62、LC3I/II蛋白表达量的影响 | 第59-60页 |
·siRNA-AIR对 16M胞内存活的影响 | 第60-61页 |
·获取嘌呤霉素抗性基因 | 第61-62页 |
·重组pMD19-T-PM载体的酶切鉴定 | 第62-63页 |
·重组慢病毒质粒pLentiLox3.7-PM-AIR载体的双酶切 | 第63页 |
·QRT-PCR检测RAW264.7-LC3-GFP细胞中AIR的表达 | 第63-65页 |
·激光共聚焦检测RAW264.7 中LC3与溶酶体共定位情况 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-67页 |
4.小结 | 第67-68页 |
实验总结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
附录 | 第76-79页 |
创新点 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
作者简介 | 第81-82页 |
附件 | 第82页 |