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布鲁氏菌侵染巨噬细胞后对自噬—溶酶体降解途径的影响

中文摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩略表第11-12页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-24页
 1.布鲁氏菌研究进展第13-17页
   ·布鲁氏菌生物学特征第13页
   ·布鲁氏菌毒力因子第13-15页
   ·布鲁氏菌在宿主细胞中的生存机制第15-17页
 2. 细胞自噬与病原菌感染的研究进展第17-23页
   ·细胞自噬第17-18页
   ·细胞自噬与细菌的关系第18-23页
 3. 布鲁氏菌与细胞自噬的关系第23-24页
第二章 实验研究第24-68页
 实验一 Atg5在羊种布鲁氏菌 16M诱导的非典型自噬中的研究第24-45页
  1 材料与方法第25-36页
   ·材料第25页
   ·方法第25-36页
  2 结果第36-43页
   ·总RNA的提取结果第36页
   ·获取Atg5基因第36-37页
   ·重组pMD19-T-Atg5载体的酶切鉴定第37-38页
   ·重组慢病毒质粒pLEX-Atg5载体的双酶切第38页
   ·QRT-PCR检测RAW264.7-LC3-GFP细胞中Atg5的表达第38-41页
   ·激光共聚焦检测RAW264.7-LC3-GFP中LC3与溶酶体共定位情况第41-42页
   ·过表达Atg5 对布鲁氏菌16M胞内生存的影响第42-43页
  3 讨论第43-44页
  4 小结第44-45页
 实验二 AIR在羊种布鲁氏菌 16M诱导的非典型自噬中的研究第45-68页
  1. 材料与方法第46-55页
   ·材料第46页
   ·方法第46-55页
  2 结果与分析第55-66页
   ·AIR干扰载体的构建与鉴定第55页
   ·荧光显微镜观察细胞转染后效果第55-56页
   ·QRT-PCR检测RAW264.7 细胞中AIR的表达第56-57页
   ·16M侵染干扰后巨噬细胞总RNA的提取第57-58页
   ·QRT-PCR检测侵染后p62、LC3I/II在mRNA水平上的变化第58-59页
   ·siRNA-AIR对侵染后p62、LC3I/II蛋白表达量的影响第59-60页
   ·siRNA-AIR对 16M胞内存活的影响第60-61页
   ·获取嘌呤霉素抗性基因第61-62页
   ·重组pMD19-T-PM载体的酶切鉴定第62-63页
   ·重组慢病毒质粒pLentiLox3.7-PM-AIR载体的双酶切第63页
   ·QRT-PCR检测RAW264.7-LC3-GFP细胞中AIR的表达第63-65页
   ·激光共聚焦检测RAW264.7 中LC3与溶酶体共定位情况第65-66页
  3 讨论第66-67页
  4.小结第67-68页
实验总结第68-69页
参考文献第69-76页
附录第76-79页
创新点第79-80页
致谢第80-81页
作者简介第81-82页
附件第82页

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