| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-29页 |
| ·蕨类植物概述 | 第14-19页 |
| ·蕨类植物的分类地位与分布 | 第14页 |
| ·蕨类植物的综合利用价值 | 第14-16页 |
| ·蕨类植物分子生物学研究进展 | 第16-17页 |
| ·肾蕨 | 第17-19页 |
| ·肾蕨的分类地位与分布 | 第17页 |
| ·肾蕨的形态特征与生境 | 第17-18页 |
| ·肾蕨的研究进展 | 第18-19页 |
| ·黄酮类化合物研究进展 | 第19-23页 |
| ·黄酮类化合物的结构与分类 | 第19-20页 |
| ·黄酮类化合物的功能 | 第20-21页 |
| ·黄酮类化合物的生物合成途径 | 第21-22页 |
| ·蕨类植物中黄酮类化合物的研究进展 | 第22-23页 |
| ·查尔酮合成酶研究进展 | 第23-29页 |
| ·查尔酮合成酶基因的结构 | 第23-24页 |
| ·查尔酮合成酶蛋白的结构和作用底物 | 第24-25页 |
| ·查尔酮合成酶基因的进化 | 第25-26页 |
| ·查尔酮合成酶基因的表达调控 | 第26-28页 |
| ·查尔酮合成酶在植物防御中的作用 | 第28-29页 |
| 第二章 肾蕨查尔酮合成酶基因的克隆、原核表达及条件优化 | 第29-50页 |
| ·引言 | 第29-30页 |
| ·材料和方法 | 第30-50页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·实验使用设备 | 第30-31页 |
| ·酶与分子生物学试剂 | 第31-32页 |
| ·实验菌株 | 第32页 |
| ·实验质粒 | 第32页 |
| ·实验重组质粒 | 第32页 |
| ·引物合成与测序 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-50页 |
| ·肾蕨各部分样品总黄酮提取液含量的测定 | 第32-34页 |
| ·肾蕨总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·cDNA的合成 | 第35页 |
| ·设计简并引物 | 第35-36页 |
| ·PCR获得核心片段 | 第36页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第36页 |
| ·核心片段的回收纯化 | 第36-37页 |
| ·核心片段的连接、转化及鉴定 | 第37页 |
| ·NaCHS基因的 3’RACE | 第37-38页 |
| ·NaCHS基因的 5’RACE | 第38-42页 |
| ·肾蕨查尔酮合成酶基因ORF序列的获得 | 第42-43页 |
| ·构建原核表达载体 | 第43-45页 |
| ·诱导蛋白表达和鉴定 | 第45-47页 |
| ·肾蕨查尔酮合成酶活性测定 | 第47-48页 |
| ·肾蕨查尔酮合基因原核表达条件优化 | 第48-50页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第50-67页 |
| ·蕨各部位总黄酮提取液含量的测定 | 第50页 |
| ·肾查尔酮合成酶（NACHS）基因的克隆 | 第50-55页 |
| ·肾蕨总RNA的提取 | 第50-51页 |
| ·肾蕨查尔酮合成酶基因核心片段克隆结果 | 第51-52页 |
| ·3'端基因序列的克隆 | 第52-53页 |
| ·5'端基因序列的克隆 | 第53-54页 |
| ·肾蕨查尔酮合成酶ORF序列的获得 | 第54-55页 |
| ·肾查尔酮合成酶（NACHS）基因的生物学分析 | 第55-57页 |
| ·肾蕨查尔酮合成酶ORF序列分析 | 第55页 |
| ·肾蕨查尔酮合成酶DNA man软件分析 | 第55-56页 |
| ·肾蕨查尔酮合成酶Proteinblast分析 | 第56-57页 |
| ·肾查尔酮合成酶（NACHS）基因的原核表达 | 第57-60页 |
| ·载体和目的基因双酶切鉴定 | 第57-58页 |
| ·诱导蛋白表达和鉴定 | 第58页 |
| ·肾蕨查尔酮合成酶酶活测定 | 第58-60页 |
| ·肾查尔酮合成酶（NACHS）基因的原核表达条件优化 | 第60-62页 |
| ·不同浓度IPTG对菌体生长和蛋白表达影响 | 第60页 |
| ·诱导时间对蛋白酶表达量影响 | 第60-61页 |
| ·诱导温度对蛋白酶表达量影响 | 第61页 |
| ·诱导前菌体浓度对表达影响 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-67页 |
| ·肾蕨中的黄酮化合物 | 第62-63页 |
| ·查尔酮合成酶基因的进化 | 第63-64页 |
| ·查尔酮合成酶蛋白特性 | 第64-65页 |
| ·肾蕨查尔酮合成酶基因原核表达条件优化探讨 | 第65-67页 |
| 第四章 总结与展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第78页 |